Erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in male newborn babies and its relationship with neonatal jaundice / Deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase eritrocitária em recém-nascidos do sexo masculino e sua relação com a icterícia neonatal

Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency, the commonest red cell enzymopathy in humans, has an X-linked inheritance. The major clinical manifestations are drug induced hemolytic anemia, neonatal jaundice and chronic nonspherocytic hemolytic anemia. The incidence of neonatal hyperbilirubinemia is much greater in G6PD-deficient neonates than babies without this deficiency. The aim of this study was to ascertain the presence of neonatal jaundice in erythrocyte G6PD-deficient male newborns. Samples of umbilical cord blood from a total of 204 male newborns of the Januário Cicco School Maternity located in Natal, Rio Grande do Norte, Brazil were analyzed. The G6PD deficiency was identified by the methemoglobin reduction test (Brewer's test). The deficiency was confirmed by quantitative spectrophotometric assay for enzyme activity and cellulose acetate electrophoresis was used to identify the G6PD variant. Eight newborns were found to be G6PD deficient with four of them exhibiting jaundice during the first 48 hours after birth with bilirubin levels higher than 10 mg/dL. All deficient individuals presented the G6PD A- variant at electrophoresis. Our findings confirmed the association between G6PD deficiency and neonatal jaundice. Hence, early diagnosis of the deficiency at birth is essential to control the appearance of jaundice and to prevent the exposure of these newborns to known hemolytic agents.

A deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) é a anormalidade enzimática hereditária mais frequente. É transmitida como caráter recessivo ligado ao cromossomo X e as principais manifestações clínicas são hemólise induzida por fármacos, icterícia neonatal e anemia hemolítica não esferocítica. O objetivo do estudo foi determinar a presença de icterícia neonatal em recém-nascidos do sexo masculino deficientes de glicose-6-fosfato desidrogenase. Foram analisadas 204 amostras de sangue umbilical de recém-nascidos do sexo masculino provenientes da Maternidade Escola Januário Cicco em Natal, Rio Grande do Norte. A deficiência da glicose-6-fosfato desidrogenase foi determinada através do método qualitativo da redução da metahemoglobina (teste de Brewer) e confirmada mediante determinação espectrofotométrica quantitativa da atividade da G6PD e pela eletroforese da enzima em acetato de celulose. Oito recém-nascidos apresentaram deficiência da G6PD, e quatro deles exibiram icterícia nas primeiras 48 horas depois do nascimento, com valores de bilirrubina maiores de 10 mg/dL. Todos os deficientes apresentaram a variante A-. Os dados encontrados confirmam a associação da deficiência da G6PD e a icterícia neonatal. Assim sendo, o diagnóstico precoce da deficiência logo após o nascimento é essencial ao controle do aparecimento da icterícia e para evitar o contato destes recém-nascidos com conhecidos agentes hemolíticos.

Porphobilmogen deaminase gene mutations in Brazilian acute intermittent porphyria patients.

Acute intermittent porphyria (AIP) is an autosomal dominant disorder resulting from porphobilmogen deaminase (PBGD) deficiency. Seven unrelated Brazilian patients were investigated regarding PBGD gene mutations by polymerase chain reaction (PCR) and single strand conformation polymorphism (SSCP) analysis followed by direct DNA sequencing. The PBG gene screening disclosed abnormal SSCP patterns in exons 7, 9, 12, 13, and 15, as well as in introns 3 and 10. Direct DNA sequencing revealed the occurrence of three nonsense mutations (R149X, R225X, and R325X) in exons 9, 12, and 15, respectively, and one missense mutation G111R in exon 7. The G111R mutation was detected in two unrelated patients. Intragenic polymorphisms (3119G/T in intron 2, 3581G/A in intron 3, 7052A/G and 7064C/A in intron 10, and -65C/T in exon 1) were also observed. In addition, two silent mutations (V202V in exon 10 and A266A in exon 13) were found. The latter has not heretofore been reported. Thus, this study revealed the mutations involved in Brazilian symptomatic AIP patients, as well as the intragenic polymorphisms found in the patients.

Purificaçö parcial da desidrogenase lática eritrocitária / Partial purification of erythrocyte lactate dehydrogenase

A purificaçäo parcial da desidrogenase lática (LDH) de glóbulos vermelhos humanos vencidos foi efetuada utilizando-se, basicamente, a DEAE-celulose equilbrada em tampäo fosfato 10mM, pH 7,6, em que a hemoglobina näo se liga, mas a desidrogenase lática se adere à resina. A eluiçäo foi feita em gradiente fosfato 10-100mM e as fraçöes onde as atividades de LDH estavam presentes foram reunidas, dialisadas e novamente submetidas a cromatografia e eluiçäo. A preparaçäo final mostrou ausência de piruvato quinase e das enzimas da glicólise, com exceçäo de negligível contaminaçäo com monofosfogliceromutase e glutationa peroxidase, também presentes na preparaçäo Sigma L2881 obtida de coraçäo de suíno

Anemia megaloblástica: importância diagnóstico da hipersegmentaçäo de neutrófilos quando da associaçäo com a deficiência de ferro

Este trabalho teve como objetivo apontar método simples e rápido que permita o diagnóstico de anemia megaloblástica. Foram estudados 31 pacientes internados nas enfermarias gerais do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina e do Hospital Geral Universitário do Universidade de Säo Paulo, com diagnóstico inicial de "anemia a esclarecer". Destacou-se como de fundamental importância o aumento da segmentaçäo de neutrófilos positiva em 100% de nossos pacientes, até mesmo nos portadores de anemia mista por carência de ferro e folato com valores de volume corpuscular médio e desidrogenase láctica dentro dos limites da normalidade. Cabe ressaltar a grande incidência de complicaçöes cardiovasculares, septicemias e hemorragias decorrentes da anemia megaloblástica em nosso meio, mostrando que, apesar de ser doença de rápido diagnóstico e fácil tratamento, ainda é responsavel por uma taxa de mortalidade de 7% nos pacientes incluídos neste estudo. Cumpre ainda destacar que na investigaçäo de uma pancitopenia deve sempre ser levantada a hipótese diagnóstica de anemia megaloblástica, visto que em 80% dos nossos doentes esta foi a apresentaçäo encontrada no sangue periférico, e, por outro lado, das pancitopenias internadas em nossas enfermarias, no período de estudo, 65% foram diagnosticadas como anemia megaloblástica

Avaliaçäo do quociente das proteínas da membrana eritrocitária e da proteína 3 nas anemias esferocíticas / Red cell membrane proteins ratios in relation to band 3 in spherocytosis

As proteínas da membrana eritrocitária foram estudadas por meio de eletroforese de poliacrilamida (SDS-PAGE) em nove pacientes, utilizando-se o quociente de todas as bandas protéicas em relaçäo à banda 3; um grupo controle normal foi utilizado. O quociente espectrina/banda 3 dos pacientes com esferocitose foi baixo (p=0,0001), o que indica deficiência de espectrina. Foi também observado um aumento relativo geral das demais proteínas, em especial das bandas 4.1 e 4.5 (p=0,046 e p=0,0001, respectivamente), o que pode ser imputado à diminuiçäo da concentraçäo das espectrinas