Identification and characterization of a new true lipase isolated through metagenomic approach.

BACKGROUND: Metagenomics, the application of molecular genomics to consortia of non-cultivated microbes, has the potential to have a substantial impact on the search for novel industrial enzymes such as esterases (carboxyl ester hydrolases, EC 3.1.1.1) and lipases (triacylglycerol lipases, EC 3.1.1.3). In the current work, a novel lipase gene was identified from a fosmid metagenomic library constructed with the "prokaryotic-enriched" DNA from a fat-contaminated soil collected from a wastewater treatment plant. RESULTS: In preliminary screening on agar containing 1% tributyrin, 2661 of the approximately 500,000 clones in the metagenomic library showed activity. Of these, 127 showed activity on agar containing 1% tricaprylin, while 32 were shown to be true lipase producers through screening on agar containing 1% triolein. The clone with the largest halo was further characterized. Its lipase gene showed 72% identity to a putative lipase of Yersinia enterocolitica subsp. palearctica Y11. The lipase, named LipC12, belongs to family I.1 of bacterial lipases, has a chaperone-independent folding, does not possess disulfide bridges and is calcium ion dependent. It is stable from pH 6 to 11 and has activity from pH 4.5 to 10, with higher activities at alkaline pH values. LipC12 is stable up to 3.7 M NaCl and from 20 to 50°C, with maximum activity at 30°C over a 1 h incubation. The pure enzyme has specific activities of 1722 U/mg and 1767 U/mg against olive oil and pig fat, respectively. Moreover, it is highly stable in organic solvents at 15% and 30% (v/v). CONCLUSIONS: The combination of the use of a fat-contaminated soil, enrichment of prokaryotic DNA and a three-step screening strategy led to a high number of lipase-producing clones in the metagenomic library. The most notable properties of the new lipase that was isolated and characterized were a high specific activity against long chain triacylglycerols, activity and stability over a wide range of pH values, good thermal stability and stability in water-miscible organic solvents and at high salt concentrations. These characteristics suggest that this lipase has potential to perform well in biocatalytic processes, such as for hydrolysis and synthesis reactions involving long-chain triacylglycerols and fatty acid esters.

Endocarditis due to Trichosporon beigelii 11 years after mitral valve replacement. / Endocardite por Trichosporon beigelii 11 anos após cirurgia de troca valvar mitral.

Trichosporon beigelii is a non-pathogenic fungus that can however become an opportunist agent of disseminating and potentially fatal infections, especially in immunocompromised patients. In the literature, there are only 11 published cases of infective endocarditis due to T. beigelii. Most of these cases involved immunocompetent individuals and the main risk factor was the presence of a prosthetic valve. The longest interval between surgery and endocarditis was eight years. In the present study, a case of prosthetic valve endocarditis due to T. beigelii is reported in an immunocompetent patient 11 years after mitral valve replacement. As with similar cases, low clinical suspicion and negative blood cultures delayed the beginning of antifungal therapy and cardiac surgery. Considering the high mortality and severity of T. beigelii endocarditis, it should be considered when there is a prosthetic valve infection with negative blood cultures, irrespective of the time elapsed since the previous surgery.

Characterization of a new Acidobacteria-derived moderately thermostable lipase from a Brazilian Atlantic Forest soil metagenome.

A clone (LP001) expressing a new lipase gene was isolated from a metagenomic library of the Brazilian Atlantic Forest soil. The DNA insert of LP001 was fully sequenced, and 38 ORFs were identified. Comparison of ORFs, %G + C content and gene organization with sequenced bacterial genomes suggested that the fosmid DNA insert belongs to an organism of the Acidobacteria phylum. Protein domain analysis and inactivation by transposon insertion showed that the protein encoded by ORF29 was responsible for the lipase activity and was named LipAAc. The purified LipAAc lipase was capable of hydrolyzing a broad range of substrates, showing the highest activity against p-nitrophenol (pNP) decanoate. The lipase was active over a pH range of 5.0-10.0 and was insensitive to divalent cations. LipAAc is moderately thermostable with optimum temperature between 50 and 60 °C and was thermally activated (80% activity increase) after 1 h incubation at 50 °C. Phylogenetic analysis suggested that the LipAAc is a member of family I of bacterial lipases and clusters with other moderately thermostable lipases of this group. Comparisons of the DNA insert of fosmid LP001 with other acidobacterial genomes and sequence database suggest that lipAAc gene has a fungal origin and was acquired by horizontal transfer.

[Agenesis of the right superior vena cava associated with total heart block]. / Agenesia de cava superior associada a bloqueio atrioventricular de 3 masculine grau.

The superior left vena cava with the absent superior vena cava is a rare abnormality, especially when associated with total heart block. We report a case of a patient in which the presence of superior left vena cava and the absence of the superior vena cava was detected during the implantation of a pacemaker for the correction of a total heart block, which led us to use a different technique for the fixation of the ventricular electrode. To confirm the supposed absence, several image exams were made showing the difficulty on the diagnosis of the described syndrome.

Spontaneous coronary dissection: case report.

The purpose of the paper is to demonstrate the case of a 62-year-old man, with spontaneous coronary dissection of the left circumflex artery, treated surgically by myocardial revascularization. The successfully accomplished surgery demonstrates, in this case, to be the only possible way of a cure.

Purification and characterization of the bifunctional uridylyltransferase and the signal transducing proteins GlnB and GlnK from Herbaspirillum seropedicae.

GlnD is a bifunctional uridylyltransferase/uridylyl-removing enzyme that has a central role in the general nitrogen regulatory system NTR. In enterobacteria, GlnD uridylylates the PII proteins GlnB and GlnK under low levels of fixed nitrogen or ammonium. Under high ammonium levels, GlnD removes UMP from these proteins (deuridylylation). The PII proteins are signal transduction elements that integrate the signals of nitrogen, carbon and energy, and transduce this information to proteins involved in nitrogen metabolism. In Herbaspirillum seropedicae, an endophytic diazotroph isolated from grasses, several genes coding for proteins involved in nitrogen metabolism have been identified and cloned, including glnB, glnK and glnD. In this work, the GlnB, GlnK and GlnD proteins of H. seropedicae were overexpressed in their native forms, purified and used to reconstitute the uridylylation system in vitro. The results show that H. seropedicae GlnD uridylylates GlnB and GlnK trimers producing the forms PII (UMP)(1), PII (UMP)(2) and PII (UMP)(3), in a reaction that requires 2-oxoglutarate and ATP, and is inhibited by glutamine. The quantification of these PII forms indicates that GlnB was more efficiently uridylylated than GlnK in the system used.

Agenesia de cava superior associada a bloqueio atrioventricular de 3º grau / Agenesis of the right superior vena cava associated with total heart block

A persistência de veia cava superior esquerda com ausência da veia cava superior é uma anomalia rara, principalmente quando associada a bloqueio atrioventricular de 3º grau. Relatamos o caso de uma paciente, na qual durante implante de marca-passo definitivo, para a correção de bloqueio atrioventricular total, foi detectada presença de veia cava superior esquerda com suspeição de ausência de veia cava superior, o que levou ao emprego de técnica diferenciada para fixação do eletrodo ventricular. Para confirmação da provável agenesia, foram realizados diversos exames complementares de imagem, demonstrando-se a dificuldade no diagnóstico da síndrome aqui descrita.

The superior left vena cava with the absent superior vena cava is a rare abnormality, especially when associated with total heart block. We report a case of a patient in which the presence of superior left vena cava and the absence of the superior vena cava was detected during the implantation of a pacemaker for the correction of a total heart block, which led us to use a different technique for the fixation of the ventricular electrode. To confirm the supposed absence, several image exams were made showing the difficulty on the diagnosis of the described syndrome.

Dissecção coronariana espontânea: relato de caso / Spontaneous coronary dissection: case report

O objetivo do trabalho é demonstrar o caso de um homem de 62 anos, com quadro de dissecção coronariana espontânea, localizada em 1/3 inicial de coronária circunflexa esquerda, tratado cirurgicamente com revascularização miocárdica. A operação realizada com sucesso demonstra, nesse caso, ser o único meio possível de cura.

The purpose of the paper is to demonstrate the case of a 62-year-old man, with spontaneous coronary dissection of the left circumflex artery, treated surgically by myocardial revascularization. The successfully accomplished surgery demonstrates, in this case, to be the only possible way of a cure.

O Modelo Recife em Defesa da Vida e a aposta na Atenção Básica à Saúde como estratégia de organização da rede de saúde: política, subjetividade e invenção de práticas / The Recife Model for Life Defense and the utilization of Primary Health Care as a health system organization strategy: policy, subjectivity and creation of practices

O presente artigo tem como objetivo apresentar a narrativa sobre o Modelo Recife em Defesa da Vida, a partir da Atenção Básica à Saúde. Apresenta as diretrizes do modelo, os dispositivos e arranjos institucionais priorizados na Atenção Básica e coloca em análise o processo de gestão para reformulação das práticas na saúde. A narrativa acontece a partir da apresentação e discussão da experiência, apresentação do processo e análise dos resultados. Apresenta também os referenciais teórico-políticos que orientaramos processo de implantação dos dispositivos, bem como a aposta no processo avaliativo e análise da política de saúde no município. Trata-se de uma aposta na produção de saúde e na produção de sujeitos no SUS, afirmando sua sustentabilidade política e sanitária..

The purpose of this study is to present the narrative regarding the Recife Model for Life Defense, which is based on the Primary Health Care. It presents the model guidelines and institutional determinations and arrangements founded on the Basic Attention and analyzes the management process to reformulate health practices. The narrative presents and discusses the experience, process and result analysis. It also shows the theoretical and political references that guided the implementation process of all determinations, as well as the utilization of the evaluation process and health policy analysis in the city. It is an incentive to promote health and produce subjects under the Unified Health System, affirming its political and sanitary sustainability..

O modelo de atenção e gestão em Recife: a dupla tarefa da produção de saúde e da produção de sujeitos no Sistema Único de Saúde / The management and attention model in the city of Recife: the double task of the health and individuals production in the National Health System

Partindo das diretrizes de atenção e gestão no município de Recife, várias ações foram disparadas. Por um lado, considera-se que uma diretriz essencial para a reconstrução do modo de governar nas instituições em saúde refere-se ao reconhecimento explícito de que todo coletivo organizado para a produção cumpre duplo papel. De outro lado, considera-se que a diretriz de reorganização da atenção e gestão, precisa incluir os sujeitos reais que vivem e trabalham nos territórios sendo consideradas somente cidades e ambientes saudáveis, preenchidos por gente. Assim, a atenção básica, urgência e emergência, especializada e hospitalar estão sendo mudadas com arranjos e dispositivos baseados nessas diretrizes.

From the guidelines of attention and management in the county of Recife, several actions were discharged. On one hand, it is considered that na essential guideline for the reconstruction of the way of governing, in health institutions, refers to the explicit acknowledgement that all the general organized for the production performs a double role. On the other hand, it shall be considered that, the reorganization guideline of attention and management, needs to include the real individuals who live and work in these territories, considering only the cities and healthy environments, file with people. Thus, basic, urgent, emergent, specialized and hospital attention are being changed with arrangements and devices bases in these guidelines.

Transplante cardíaco em Campo Grande - MS: reduçäo significativa de lesäo coronária pós transplante: relato de caso / Cardiac transplantation in Campo Grande - MS: significative reduction of coronary artery lesion after cardiac transplantation: case report

No Serviço de Cirurgia Cardíaca da Santa Casa de Campo Grande/MS - foi realizado, em 23 de setembro de 1994, um transplante cardíaco ortotópico no paciente C.A.D., 27 anos, portador de miocardiopatia dilatada idiopática, o qual transcorreu sem anormalidades. O paciente recebeu alta da UTI com 7 dias e alta hospitalar no 40§ dia de pós-operatório, recebendo ciclosporina, azatioprina e prednisona para manutençäo do enxerto, captopril, furosemida e aspirina. Apresentou no 1§ ano de seguimento 2 episódios de rejeiçäo, leve e moderada, sendo modificada a posologia dos imunossupressores. Em setembro de 1995, nos exames de seguimento, foi detectada, na coronariografia, lesäo obstrutiva de 50 por cento em artéria coronária direita. Decidiu-se modificar a terapêutica do paciente, iniciando diltiazen substituindo o captopril, e associando-se complexo vitamínico (betacaroteno, C e E) mais selênio, na tentativa de evitar progressäo da lesäo obstrutiva. Foi também realizada orientaçäo dietética por nutricionista. Após 12 meses com a nova terpêutica, a coronariografia mostrou reduçäo significativa da lesäo obstrutiva em artéria coronária direita. Durante todo o período de seguimento o paciente apresentou níveis normais no lipidograma. Hoje o paciente encontra-se no terceiro ano de seguimento, assintomático e tendo suas atividades habituais sem intercorrências.

Remodelaçäo cirúrgica da valva aórtica / Surgical remodeling of the aortic valve

OBJETIVO: Os autores analisam os resultados por eles obtidos com a utilizaçäo de técnica específica para a preservaçäo da valva aórtica. CASUíSTICA E MÉTODOS: Esse método consiste no emprego habitual da circulaçäo extracorpórea com uso de hipotermia moderada e infusäo de soluçäo cardioplégica nos óstios coronários. Realiza-se ressecçäo da válvula näo coronariana e une-se as comissuras correspondentes utilizando-se fio de Mersilene 2-0 ancorado em feltro de teflon, tornando a valva "bivalvulada". Procede-se por fim à aortorrafia convencional. Foram operados 15 pacientes, 9 do sexo masculino. A idade variou entre 12 e 78 anos. Quatro pacientes tinham diagnóstico de insuficiência aórtica isolada, 2 com dupla disfunçäo aórtica associada à insuficiência coronária, 2 com doença da aorta ascendente, 4 com insuficiência aórtica e mitral, 1 com dupla disfunçäo aórtica e mitral, e 2 com insuficiência aórtica e insuficiência coronária. RESULTADOS: Em 12 pacientes näo houve insuficiência aórtica residual pós-operatória, e em 3 identificou-se insuficiência aórtica leve ou moderada. Três pacientes foram reoperados no pós-operatório tardio devido a insuficiência aórtica, tendo sido substituída a valva aórtica em 2. Quatro pacientes foram submetidos a estudo hemodinâmico e em 1 deles havia gradiente supravalvar de 20 mmHg. Nos outros 3 pacientes, o gradiente sistólico transvalvar foi de 0, 9 e 12 mmHg, respectivamente. Os 11 pacientes restantes foram avaliados somente através de ecocardiografia, a qual näo demonstrou estenose. Näo houve óbito imediato e houve 1 óbito tardio, após reoperaçäo. Quatorze pacientes tiveram melhora da classe funcional, tanto imediata quanto tardiamente, e foram acompanhados durante período entre 30 dias e 24 meses, encontrando-se em classe funcional I ou II (NYHA). CONCLUSÄO: Os autores acreditam que o método seja uma alternativa para o tratamento cirúrgico conservador da doença valvar aórtica

Fístula arteriovenosa coronário-pulmonar: tratamento cirúrgico / Coronary-pulmonary arteriovenous fistula: surgical treatment

Fístulas arteriovenosas coronárias pertencem a um grupo de lesöes cardíacas de difícil diagnóstico, por näo apresentarem sintomas; quando suspeitadas de ocasionar o quadro clínico de um paciente, ou descobertas em exame de rotina, devem ser pesquisadas para o tratamento adequado. É relatado o caso de homem de 65 anos de idade, com história de precordialgia súbita, evoluindo para IAM de parede inferior, cuja investigaçäo revelou a presença de fístulas de artérias coronárias direita e esquerda para tronco pulmonar. Após tratamento clínico seguido da operaçäo, demonstrou resultados satisfatórios.

Programa de saúde ambiental de Recife (PE) / Recife (Pe)`s environmental health program

Relata-se o processo de implantação do Programa de saúde Ambiental da Secretaria de Saúde de Recife (Pernambuco), com uma nova estratégia guiada pelos principios de universalidade, equidade, integralidade e descentralização. Descreve-se a situação de saúde e as principais condições sanitárias do municipio, com a definição de àreas de risco e o cálculo das necessidades sociais em saúde. Também são descritos o modo de organização e as principais medidas e ações implementadas pelo programa. Trata-se de um bom exemplo de como são definidas as prioridades e a programação de saúde ambiental em um municipio metropolitano de grande porte