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1.
Cell ; 184(2): 323-333.e9, 2021 01 21.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-33306959

RESUMEN

The December 2019 outbreak of a novel respiratory virus, SARS-CoV-2, has become an ongoing global pandemic due in part to the challenge of identifying symptomatic, asymptomatic, and pre-symptomatic carriers of the virus. CRISPR diagnostics can augment gold-standard PCR-based testing if they can be made rapid, portable, and accurate. Here, we report the development of an amplification-free CRISPR-Cas13a assay for direct detection of SARS-CoV-2 from nasal swab RNA that can be read with a mobile phone microscope. The assay achieved ∼100 copies/µL sensitivity in under 30 min of measurement time and accurately detected pre-extracted RNA from a set of positive clinical samples in under 5 min. We combined crRNAs targeting SARS-CoV-2 RNA to improve sensitivity and specificity and directly quantified viral load using enzyme kinetics. Integrated with a reader device based on a mobile phone, this assay has the potential to enable rapid, low-cost, point-of-care screening for SARS-CoV-2.


Asunto(s)
Prueba de Ácido Nucleico para COVID-19/métodos , Teléfono Celular/instrumentación , Imagen Óptica/métodos , ARN Viral/análisis , Carga Viral/métodos , Animales , Prueba de Ácido Nucleico para COVID-19/economía , Prueba de Ácido Nucleico para COVID-19/instrumentación , Sistemas CRISPR-Cas , Línea Celular , Proteínas de la Nucleocápside de Coronavirus/genética , Humanos , Nasofaringe/virología , Imagen Óptica/instrumentación , Fosfoproteínas/genética , Pruebas en el Punto de Atención , Interferencia de ARN , ARN Viral/genética , Sensibilidad y Especificidad , Carga Viral/economía , Carga Viral/instrumentación
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