Preliminary antigenic characterisation of an adult worm vomit preparation of Fasciola hepatica by infected human sera.

Fascioliasis is an emerging/re-emerging vector-borne disease with the widest known distribution. Approximately 17 million people are infected around the world, being the Andean region the most affected area. There is an important necessity to develop sensitive and specific diagnostic tools to treat patients early and to avoid complications. In this paper we evaluated the immune response of infected humans against two antigenic preparations: the total soluble extract (FhTSE) and the adult worm vomit (FhAWV) in order to identify antigenic fractions specific for Fasciola hepatica. Both preparations were processed by SDS-PAGE and Western blot with human sera with fascioliasis (F), other parasitosis and healthy individuals. In the immunoblot of FhTSE, sera F recognised 16 bands with MW between eight and 110 kDa, from which those of 8, 9, 10, 38, 45 and 57 kDa were specific. In the preparation FhAWV, sera F recognised nine bands with MW from eight to 85 kDa, from which those of 8, 12, 15 and 24 kDa were specific. Some bands of cross-reaction were evident with sera from patients with other parasitoses, more frequent with the FhTSE. Bands within the MW mentioned, particularly that of eight kDa, have been shown to be specific by others, and deserve additional characterisation for their potential use in immunodiagnosis.

[Dog (Canis familiaris) infectivity to Lutzomyia youngi in Trujillo, Venezuela]. / Infectividad del perro (Canis familiaris) para Lutzomyia youngi en Trujillo, Venezuela.

INTRODUCTION: In Trujillo, Venezuela the prevalence for American tegumentary leishmaniasis (ATL) is 38 per 100,000 inhabitants. OBJECTIVE: In a periurban, rural settlement of the capital city Trujillo, we studied the potential capability of the domestic dog (Canis familiaris) as a source of infection for Lutzomyia youngi, a phlebotomine sand fly species abundant in the study area and whose domestic vectorial activity has been proven. MATERIALS AND METHODS: Dogs with dermal lesions suggestive of ATL and parasitological confirmation of infection, were selected for xenodiagnosis by allowing sylvatic phlebotomines from a ATL free area, to feed ad libitum over each animal's entire body surface. The insects' intestinal tracts were dissected 5 days after the blood meal in order to look for flagellate forms. When these were found, parasitological identification was performed by the multiplex-PCR technique. RESULTS: Four hundred and fifty five sand flies engorged over two dogs in three different assays; promastigotes were found in 4 (0.88%) of the specimens on only one occasion. PCR identified DNA of the Leishmania Viannia subgenus. CONCLUSION: The household dog has the potential of being a domestic risk factor in the ATL transmission cycle.

Prevention of the transmission of Chagas' disease with pyrethroid-impregnated materials.

Interrupting the transmission of Chagas' disease using insecticide-treated materials could be a cost-effective option, particularly for sylvatic vectors, which enter houses at night. A randomized trial was undertaken that included all houses in two communities in regions endemic for this disease, one in Venezuela (50 houses) and one in Colombia (47 houses). After a baseline study (including a short questionnaire survey, entomologic assessment, and Chagas' disease serology), each household was randomly allocated to either the intervention group, which used pyrethroid-impregnated bed nets, or the control group, which used unimpregnated bed nets. Serologic analysis of children in the baseline study showed active transmission of Chagas' disease in the Venezuelan community (10.7% of 103 children were positive), but none in the Colombian community (0% of 100 children were positive). Vectors were sylvatic and bugs entered the houses at night in both communities. The efficacy of pyrethroids against triatomine vectors was tested in Venezuela by exposing Rhodnius prolixus to lambdacyhalothrin-impregnated fabrics and in Colombia by residual house spraying with deltamethrin. This randomized trial showed that in both countries users of impregnated bed nets were well protected from vector bites (immediate benefit). The long-term effect on the community was high vector mortality. In Venezuela, all 62 vectors detected (mainly R. robustus) died within 72 hours of contact with impregnated bed nets. In houses that used unimpregnated nets, only 24.5% (13 of 53) of the vectors died (P < 0.001). The vectors most likely came from infested palm trees and they maintained transmission of the disease in this community (28.1% of 629 R. robustus were positive for Trypanosoma cruzi). Bioassays showed that the mortality rate of R. prolixus was 100% on lambda-cyhalothrin-impregnated materials. In addition, in Colombia (the main vector was R. prolixus), the effect of repellent on vectors (driving them away from impregnated nets) was significant. Thus, users of impregnated bed nets are well protected from transmission of Chagas' disease, and vector reduction or elimination can potentially be achieved in areas infested with R. prolixus and R. robustus.

Infecciones maláricas en individuos asintomáticos en la población indígena Jivi, Amazonas, Venezuela / Asymptomatic malaria infection in the indigenous Jivi population, Amazonas state, Venezuela

Se evaluó la presencia de infecciones maláricas en individuos asintomáticos en la población Jivi de Puente Parhueña. El estudio fue de tipo prospectivo en tres momentos. El diagnóstico parasitológico se realizó mediante el examen convencional de gota gruesa y extendido (GGE) y la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El diagnóstico por microscopia indicó 2% (5/261) de láminas positivas en Abril, 1% (3/274) en Septiembre y 4% (5/135) en Diciembre. La PCR para Plasmodium spp., fue 46% (26/57) en abril, 49% (28/57) en Septiembre y 35% (20/57) en Diciembre. En los tres momentos predominó la presencia de P. vivax. La prueba de ELISA demostró 72% (41/57) seroreactivos en Abril, 53% (30/57) en Septiembre y 60% (34/57) en Diciembre. En Puente Parhueña habitan individuos con infecciones maláricas asintomáticos, con persistencia de anticuerpos antimalaricos, que probablemente representan un reservorio de gametocitos dentro de la comunidad.

The study was carried out to determine the present malaria infection in the asymptomatic Jivi people of Puente Parhueña. The study was prospective over three periods of time. The parasitological diagnoses were from thick and thin blood smears (GGE) and polymerase chain reaction (PCR). The antibody search was performed by ELISA. Microscopy of the slides detected the following positive results: 2% (2/261) April, 1% (3/274) September and 4% (5/135) December. Detection of Plasmodium by PCR was 46% (26/57) in April, 49% (28/57) in September y 35% (20/57) in December. Plasmodium vivax infected individuals predominated during these 3 times. Positives for ELISA were 72% (41/57) in April, 53% (30/57) September and 60% (34/57) December. The study demonstrated that people living in Puente Parhueña presented asymptomatic malaria infection with malaria antibodies persistence which likely represents a gametocyte potential reservoir for infection among the population.

Intestinal parasitic infection and associated symptoms in children attending day care centres in Trujillo, Venezuela.

OBJECTIVES: To examine the presence of intestinal protozoan and helminth infections and their association with clinical signs and symptoms in children in Trujillo, Venezuela. METHODS: Conventional microscopic methods (thick-smear, saline and iodine solutions) were used to identify parasites in stool samples of 301 children attending day care centres. A subgroup of 45 children was evaluated clinically and parasitologically five times during a 1-month period using conventional methods and the Kinyoun acid-fast stain for Cryptosporidium identification. RESULTS: The point prevalence of protozoan infections was 21% for Giardia duodenalis, 1.0% for Entamoeba histolytica/dispar, 4% for Entamoeba coli, 16% for Blastocystis hominis, and 89% for Cryptosporidium parvum. Prevalence of helminth infection was 11% for Ascaris lumbricoides, 10% for Trichuris trichiura, 0.3% for Strongyloides stercoralis, and 1.3% for Hymenolepis nana. Over a 1-month time frame, new infections were observed at a rate of 11% for G. duodenalis, 4% for E. histolytica/dispar, 7% for A. lumbricoides, 11% for T. trichiura, 0% for S. stercoralis, and 2% for H. nana. Intestinal symptoms (diarrhoea, vomiting, gas, stomach pain, and loss of appetite) were associated with presence of one or more of C. parvum or B. hominis organisms in stool samples. CONCLUSIONS: Intestinal parasitic infections contribute significantly to the enteric disease burden experienced by this group of children. The organisms most strongly implicated by this study are common and difficult-to-treat protozoan pathogens.

Preliminary antigenic characterisation of an adult worm vomit preparation of Fasciola hepatica by infected human sera

Fascioliasis is an emerging/re-emerging vector-borne disease with the widest known distribution. Approximately 17 million people are infected around the world, being the Andean region the most affected area. There is an important necessity to develop sensitive and specific diagnostic tools to treat patients early and to avoid complications. In this paper we evaluated the immune response of infected humans against two antigenic preparations: the total soluble extract (FhTSE) and the adult worm vomit (FhAWV) in order to identify antigenic fractions specific for Fasciola hepatica. Both preparations were processed by SDS-PAGE and Western blot with human sera with fascioliasis (F), other parasitosis and healthy individuals. In the immunoblot of FhTSE, sera F recognised 16 bands with MW between eight and 110 kDa, from which those of 8, 9, 10, 38, 45 and 57 kDa were specific. In the preparation FhAWV, sera F recognised nine bands with MW from eight to 85 kDa, from which those of 8, 12, 15 and 24 kDa were specific. Some bands of cross-reaction were evident with sera from patients with other parasitoses, more frequent with the FhTSE. Bands within the MW mentioned, particularly that of eight kDa, have been shown to be specific by others, and deserve additional characterisation for their potential use in immunodiagnosis.

Fasciolíase é uma doença emergente/re-emergente transmitida por vetores com a distribuição sabidamente mais ampla. Existem aproximadamente 17 milhões de pessoas infectadas em todo mundo, sendo a região andina a área mais afetada. Há uma necessidade importante para desenvolver ferramentas diagnósticas sensíveis e específicas para tratar cedo os pacientes e para evitar complicações. Neste trabalho avaliamos a resposta imune de seres humanos infectados comparando a duas preparações antigênicas: o extrato solúvel total (FhTSE) e o vômito (FhAWV) do verme adulto a fim de identificar as frações antigênicas específicas para Fasciola hepatica. Ambas as preparações foram processadas por SDS-PAGE e Western blot com os soros humanos de portadores de fasciolíase (F), outras parasitoses e indivíduos saudáveis. No immunoblot de FhTSE, os soros F reconheceram 16 faixas com PM entre 8 e 110 kDa, das quais as de 8, 9, 10, 38, 45 e 57 kDa foram específicas. Na preparação de FhAWV, os soros F reconheceram 9 faixas com PM entre 8 e 85 kDa, das quais as de 8, 12, 15 e 24 kDa foram específicas. Algumas faixas com reação cruzada foram evidentes com os soros dos pacientes com outras parasitoses, mais freqüentes com o FhTSE. As faixas dentro do PM mencionado, particularmente aquela de 8 kDa, mostraram ser específicas por outros autores, e merecem a caracterização adicional para seu uso potencial no diagnóstico imunológico.

Dog ( Canis familiaris) infectivity to Lutzomyia youngi in Trujillo, Venezuela / Infectividad del perro ( Canis familiaris) para Lutzomyia youngi en Trujillo, Venezuela

Introducción. En Trujillo, Venezuela, la prevalencia de leishmaniasis tegumentaria americana (LTA) es de 38 por 100.000 habitantes. Objetivo. En una localidad periurbana, rural, de la ciudad capital, estudiamos a los perros caseros ( Canis familiaris) para investigar mediante la técnica de xenodiagnóstico la eventual capacidad para infectar a Lutzomyia youngi, especie flebotomina con actividad vectorial intradomiciliaria comprobada y abundante en el área de estudio. Materiales y métodos. Los perros con lesiones sugestivas de LTA, parasitológicamente diagnosticados, fueron seleccionados para el xenodiagnóstico permitiendo a flebótomos silvestres de una zona libre de LTA alimentarse ad libitum sobre toda la superficie corporal de cada animal, y evidenciar, en disecciones efectuadas a los 5 días post-ingesta, la posible presencia de flagelados en sus tractos digestivos, en cuyo caso, fueron evaluados por la técnica PCR-Multiplex para determinar la identidad del parásito. Resultados. Un total de 455 flebótomos se ingurgitaron sobre dos perros en tres evaluaciones distintas; en una única ocasión, se observaron promastigotes en 4 (0,88 por ciento) insectos, cuya identificación molecular reveló pertenecían al subgénero Viannia. Conclusión. El perro casero constituye un potencial factor de riesgo intradomiciliario en el ciclo de la LTA.

Introduction. In Trujillo, Venezuela the prevalence for American tegumentary leishmaniasis (ATL) is 38 per 100.000 inhabitants. Objective. In a periurban, rural settlement of the capital city Trujillo, we studied the potential capability of the domestic dog (Canis familiaris) as a source of infection for Lutzomyia youngi, a phlebotomine sand fly species abundant in the study area and whose domestic vectorial activity has been proven. Materials and methods. Dogs with dermal lesions suggestive of ATL and parasitological confirmation of infection, were selected for xenodiagnosis by allowing sylvatic phlebotomines from a ATL free area, to feed ad libitum over each animal´s entire body surface. The insects´ intestinal tracts were dissected 5 days after the blood meal in order to look for flagellate forms. When these were found, parasitological identification was performed by the multiplex-PCR technique.Results. Four hundred and fifty five sand flies engorged over two dogs in three different assays; promastigotes were found in 4 (0.88%) of the specimens on only one occasion. PCR identified DNA of the Leishmania Viannia subgenus. Conclusion. The household dog has the potential of being a domestic risk factor in the ATL transmission cycle.

El "Status" taxonomico de leishmania garnhami, indicado por su patron de desarrollo en el Vector / The taxonomic status of leishmania garnhami, indicated by its development pattern in the vector

Bajo condiciones experimentales, se estabelece el de desarrollo primario de Leishmania garnhami em su vector Lutzomyia townsendi, siguiendo disecciones diarias entre el Iro y 12mo dia post-imnfección. Se demuestra que L. garnhami puede lograr el estabelecimiento inicial de la infección en cualquiera de las regiones del intestino y en los túbulos de Malpighi del insecto vector. Un comportamiento similar fue observado en ejemplares de Lu. longipalpis. Se discute la susceptibilidad de Lu. townsendi a las infecciones por L. mexicana, L. braziliensis y L. garnhami. Se concluye que L. garnhami, a juzgar por su comportamiento en el vector, debe considerarse distinta a las especies del complejo L.mexicana y que su patrón de desarrollo difiere del de las especies de la Sección Suprapylaria, ya que invaden el triângulo pilórico, y del de la Peripylaria por su invasión a los túbulos de Malpighi

Brote familiar de fascioliasis en Venezuela / Family outbreak of fascioliasis in Venezuela

De los 9 casos de fascioliasis humana registrados en Venezuela, 4 han sido publicados en los últimos 10 años, siendo 2 de éstos procedentes de la región andina. El riesgo de endemicidad frecuente en bovinos y la condición clínica de una niña de 14 años, con malestar abdominal, vómitos, eosino filia y antecedentes de ingestión abundante de berros, motivó realizar un estudio en su lugar de procedencia (Timotes, Edo. Mérida), para conocer la exposición de la comunidad al riesgo de infección. Se evaluaron 65 personas, a quienes se les realizó historia clínica, con consentimiento previa información, toma de muestras de sangre, exámenes de heces (n=37) y ecografía abdominal (n=33). Se practicó ELISA con extracto soluble de adultos de Fasciola hepatica (ELISA-AFhES), resultando 9 personas positivas. Se practicó “Western blot” (WB) a todos los sueros positivos en ELISA, de los cuales 5 reconocieron moléculas específicas de 9, 14, 27 y 65 kDa, lo que constituye un patrón de positividad al WB. Los cuatro sueros restantes, con débil reactividad al ELISA, no reconocieron estas moléculas. Por estudios coprológicos se encontraron Entamoeba coli, Entamoeba histolytica/dispar, Blastocystis hominis, Giardia lamblia, Endolimax nana y Ascaris lumbricoides. Tres de las 5 personas positivas por ELISA-AFhES y WB-AFhES resultaron con huevos de Fasciola hepatica en las heces. Los 5 pasos positivos corresponden a niñas de una familia, todas hermanas, cuyos padres resultaron sin infección, a pesar de que todos ingieren berros y ensaladas con productos de la región. El presente estudio constituye el primer reporte de transmisión a humanos en una población de un área bien delimitada en la región andina venezolana.

Síntesis de un complejo antimonial pentavalente (ulamina) y su aplicación experimental para el tratamiento de leishmaniasis cutánea localizada en Venezuela / Synthesis of a pentavalent antimonial complex (ulamina) and its experimental application for treatment of lacalized cutaneous leishmaniasis in Venezuela

La urgente necesidad social y ética de dar tratamiento médico satisfactorio a numerosos pacientes con leishmaniasis cutánea localizada, urbana, en el estado Trujillo de Venezuela, sin complicaciones mucosas entre mas de 2000 casos estudiados desde 1984, nos ha conducido a la síntesis y utilización perilesional de un complejo antimonial pentavalente con glucamina (ULAMINA). Se resume el procedimiento para la preparación de ULAMINA y se compara su composición en especies de antimonio, concentración de cloruros, densidad, pH y osmolaridad con muestra de tres patentados comerciales importados, con resultados análogos. Se reportan resultados clínicos satisfactorios en el tratamiento perilesional de 858 pacientes con ULAMINA, con un 5% de casos que abandonaron el tratamiento sin la cicatrización de sus lesiones.

Los 45 años del Boletín... Vigencia de la gesta antimalárica! / 45 Years of the Boletin de Malariología... Validity of the Antimalaric Feat!

Hace 20 años el Dr. Lacenio Guerrero tuvo la sobresaliente iniciativa de reeditar Tijeretazos sobre la Malaria, que habian sido editados por el Dr. Arnoldo Gabaldon, a partir de 1938 y hasta 1946. Aquella publicación de la División de Malariología, a diferencia de otras publicaciones periódicas para difundir científicos, lo que fue para desarrollar el programa de educación a distancia que impulsara la más formidable gesta colectiva, filantrópica y trascendente, con el control de la transmisión de malaria en 460.000 km2 del territorio rural endémico de Venezuela, conduciendo ello, a partir de entonces, a duplicar con excesos el período de esperanza de vida de los venezolanos

Caracteres extrínsecos e intrínsecos de Leishmania garnhami Scorza et al., 1979 y su ubicación taxonómica / Extrinsic and intrinsic characters of Leishmania garnhami Scorza et al., 1979 and its taxonomic localization

Se revisan y comparan los caracteres extrínsecos e intrísecos de Leishmania garnhami Scorza et al. 1979, con los de L. mexicana y L. braziliensis, prestándose particular atención a la morfología de los amastigotos, al desarrollo de las lesiones en hámsteres y su evolución en flebótomos, además de estudios sobre patrones isoenzimáticos y caracterización de factores de excreción. Estas comparaciones sugieren que L. garnhami no se comporta como L. mexicana o L. braziliensis y que por lo tanto, constituye o representa un nuevo tipo o grupo de parásitos del continente suramericano

Cambios epidemiológicos de la leishmaniasis tegumentaria en Venezuela / Epidemiological changes of the tegumentary leishmaniasis in Venezuela

La aparición de casos humanos de leishmaniasis cutánea entre la población urbana de las tierras bajas de la región andina venezolana señala firmes alteraciones en la epidemiología de esta enfermedad. El muy común marsupial Didelphis marsupialis, que invade frecuentemente los domicilios suburbanos, se ha encontrado naturalmente infectado por Leishmania braziliensis y, además, el flebótomo Lutzomyia townsendi, conocido vector en la region invade igualmente los mismos domicilios desde la vegetación natural peridomiciliar. Estos factores bióticos, combinados con la permanente invasión y utilización de antiguas plantaciones de café, en estas localidades, son responsables de esta nueva situación epidemiológica. Los procesos que están dando origen a estos fenómenos son discutidos en este trabajo

Información ecológica sobre phlebotominae de Venezuela / Ecological information over phlebotomus of Venezuela

Se revisa información reciente sobre flebótomos antropofílicos de Venezuela comenzando con los trabajos del profesor F. Pifano, prestando particular atención a un flebótomo perteneciente al grupo "verrucarum" y sus relaciones con la endemicidad de la leshmaniasis cutánea. Se hace especial mención a los cinco pasos propuestos por el profesor F. Biangi para estudiar la transmisión de esta enfermedad

La epidemiología de la leishmaniasis tegumentaria en Venezuela: situación actual / Cutaneous leishmaniasis epidemiology in Venezuela: present situation

Se puntualizan los tres términos de la cadena epidemiológica de la leishmaniasis tegumentarias en Venezuela: parásitos, reservorios y transmisores; poniéndose énfasis en la dinámica epidemiológica de estas infecciones y su tendencia a evolucionar desde focos selvaticos a situaciones endémicas suburbanas

Protocolo para investigación epidemiológica de leishmaniasis tegumentaria en Venezuela / Epidemiologic research protocol of the cutaneous leishmaniasis in Venezuela

Tomando en cuenta la experiencia del autor, biólogo y parasitólogo, se discuten las problematicas de las endemias parasitarias metaxénicas de Venezuela, enfatizando la importancia de los leishmaniasis tegumentarias. Se formula un protocolo para el estudio epidemiológico de los focos naturales de leishmaniasis tegumentaria

La leishmaniasis tegumentaria venezolana: problemática contemporánea en el Estado Trujillo / The cutaneos leishmaniasis in venezuela:recent problems in the Trujillo State

Se hace un recuento suscinto sobre los factores históricos, sociales, económicos y y epidemiológicos que han condicionado la tranformación de la enzotía leishmánica en una antropozoonozis rural y periurbana, particularmente en la región de los Andes Venezolanos con énfasis en la ciudad de trujillo. Se proponen soluciones para el tratamiento de los casos y el control de reservorios y vectores

Protección personal con un repelente natural contra Lutzomyia youngi, vector de leishmaniasis cútanea urbana en Venezuela / Personal protection with the natural repellent by lutzomyia youngi cutaneus leishmaniasis vector in venezuela

Ante la actividad hematogáfica intradomociiar de Lutzmyiayoungi, principal transmisor de leishmaniasis cutáneo urbana de trujillo, Venezuela, se ensaya el uso de repelentes como protectores personales. Se compra la actividad del aceite de limón obtenido por los autores con la del citronellal y eldett, tanto en experincias de laboratorios como de campo. L actividad protectoraen el laboratorio fue de 70, 63y33 para el aceite esencial, el deet y el citronellal respectivamente. La dosis efectiva media (DE50) para el aceite esencial fue de 7,46ug/cm² de piel con efecto similar al deet. Los coeficientes de protección en condiciones de campo, usando tres voluntarios, fueron de 84,8 para el aceite esencial y 3,7 para el deet

Control de Lutzomyia en el área endémica venezolana de leishmaniasis tegumentaria / Lutzomyia youngi in the venezuelan endemic area of tegumentary leishmaniasis

La incidencia relativamente alta de leishmaniasis cutánea en ambientes urbanos y suburbanos de la ciudad de trujillo, en Venezuela, condujo a un ensayo de cinco insecticidas diferentes contra lutzomyia (= L.townsendi), vector en la localidad. Infructuosos fueron los resultados, en condiciones de laboratorio, empleando el estuche de ensayo recomendado por la OMS para cuantificar la susceptibilidad de los flebótomos ya que, por su tamaño escapan a travéz del dispositivo de deslizamiento e intercambio. Desarrollamos nuestro propio equipo que describimos. Los flebótomos fueron altamente susceptibles al DDT y al Lindano para dosis latales (DL 100) de 0,25 g/m2 y ,mostraron moderada resistencia al Dieldrin (DL 100: 2,0 g/m2) y al Propoxur (DL60: 2,5 g/m2). Experimentos de campo en un área de 700 m2 dentro de un cafetal, usando equipo swing-fog con DDT en el gas-oil al 2%redujo drásticamente la población de flebótomos desde 65 hasta manos de 1 por m2, nebulizando 0,75 litros de solución de insecticida

DDT acuosa contra Lutzomya youngi en cafetales del estado Trujillo, Venezuela / DDT in a detergent acuosa by lutzomyia youngi in a coffea cropping localities of Trujillo state

DDT a 5%suspendida en una solución acuosa de detergente a 0,1%puede ser nebulizado con un rociador convencional para reducir la población de un flebótomo vector de leishmaniasis cutánea (L. young) en un cafetal de zona endémica desde 70 m2 hasta 6 por m2, asperjando 78 g de insecticida en 15 I de agua por hectárea. El uso de esta técnica operacional podría, en manos de la iniciativa campesina caficultoria, reducir la incidencia de esta enfermedad tan asociada a la caficultura