Exploring the Antiviral Potential of Natural Compounds against Influenza: A Combined Computational and Experimental Approach.

The influenza A virus nonstructural protein 1 (NS1), which is crucial for viral replication and immune evasion, has been identified as a significant drug target with substantial potential to contribute to the fight against influenza. The emergence of drug-resistant influenza A virus strains highlights the urgent need for novel therapeutics. This study proposes a combined theoretical criterion for the virtual screening of molecular libraries to identify candidate NS1 inhibitors. By applying the criterion to the ZINC Natural Product database, followed by ligand-based virtual screening and molecular docking, we proposed the most promising candidate as a potential NS1 inhibitor. Subsequently, the selected natural compound was experimentally evaluated, revealing measurable virus replication inhibition activity in cell culture. This approach offers a promising avenue for developing novel anti-influenza agents targeting the NS1 protein.

Development of a Fully Protective Pandemic Avian Influenza Subunit Vaccine in Insect Pupae.

In this study, we pioneered an alternative technology for manufacturing subunit influenza hemagglutinin (HA)-based vaccines. This innovative method involves harnessing the pupae of the Lepidoptera Trichoplusia ni (T. ni) as natural biofactories in combination with baculovirus vectors (using CrisBio® technology). We engineered recombinant baculoviruses encoding two versions of the HA protein (trimeric or monomeric) derived from a pandemic avian H7N1 virus A strain (A/chicken/Italy/5093/99). These were then used to infect T. ni pupae, resulting in the production of the desired recombinant antigens. The obtained HA proteins were purified using affinity chromatography, consistently yielding approximately 75 mg/L of insect extract. The vaccine antigen effectively immunized poultry, which were subsequently challenged with a virulent H7N1 avian influenza virus. Following infection, all vaccinated animals survived without displaying any clinical symptoms, while none of the mock-vaccinated control animals survived. The CrisBio®-derived antigens induced high titers of HA-specific antibodies in the vaccinated poultry, demonstrating hemagglutination inhibition activity against avian H7N1 and human H7N9 viruses. These results suggest that the CrisBio® technology platform has the potential to address major industry challenges associated with producing recombinant influenza subunit vaccines, such as enhancing production yields, scalability, and the speed of development, facilitating the global deployment of highly effective influenza vaccines.

Vías de señalización intracelular en el carcinoma escamoso infiltrante de cérvix uterino. Identificación de nuevos marcadores pronósticos / Intracellular pathways in infiltrating squamous cell carcinoma of the cervix. Identification of new prognostic markers

Antecedentes y objetivos: Los receptores de tirosincinasa están frecuentemente activados en los tumores humanos malignos. Esta activación lleva a las células a altos niveles de proliferación, migración, desdiferenciación, diseminación y resistencia a la apoptosis. Las vías de se˜nalización dependientes de la activación de los receptores de la familia ErbB/HER en las que se han descrito alteraciones son las vías RAS-RAF-ERK, PIK3-AKT, MAPK y NFKB. El estudio de la actividad de estas vías puede ayudar a identificar aquellos tumores con alta agresividad y puede informar acerca de puntos de interés con potencial terapéutico. Material y métodos: Realizamos estudio inmunohistoquímica de EGFR, p-EGFR, p38, p-ERK ½, JNK, p-AKT, p65, p50, p52, relB, c-Rel y MAPK-1 en 32 carcinomas escamosos infiltrantes de cérvix uterino en una matriz de tejidos. Resultados: Solamente la inmunoexpresión de p-ERK mostró correlación con el estadio de la enfermedad (p < 0,001) y la recidiva (p < 0,001). Además, la inmunoexpresión de MKP1 se correlacionaba inversamente con los niveles de inmunoexpresión de p-JNK (p = 0,036) y p-p38 (p = 0,011), indicando que MKP1 podría tener actividad anti-apoptótica. Esta hipótesis es reforzada por la demostración de la correlación entre la detección de MKP y la mala respuesta al tratamiento (quimioterapia y radioterapia). Conclusiones: Nuestras observaciones indican que los tumores más agresivos muestran inmunoexpresión alta de p-ERK y MKP1 y bajos niveles de p-JNK y p-p38, estos últimos favoreciendo la resistencia a la quimioterapia. La inmunoexpresión de p-ERK y MKP1 podrían usarse como factores pronósticos y dianas terapéuticas en estos tumores (AU)

Background: Tyrosine-kinase receptors are frequently activated in malignant human tumours. This activation results in high levels of proliferation, migration, dedifferentiation, dissemination and resistance to apoptosis of the tumour cells. Alterations in the following signalling pathways related to ErbB/HER: RAS-RAF-ERK, PIK3-AKT, MAPK, and NFKB have been described. Studying these signaling pathways could help identify more aggressive tumours and thus provide information about potential changes in therapy. Material and methods: We performed an immunohistochemical study of EGFR, p-EGFR, p38, p-ERK ½, JNK, p-AKT, p65, p50, p52, relB, c-Rel and MAPK-1 in 32 infiltrating squamous cell carcinomas of the uterine cervix using a tissue array. Results: Only p-ERK immunoexpression correlated with the stage of the disease (P < .001) and the relapse (P < .001). Furthermore, the MKP1 immunoexpression inversely correlated with the immunoexpression of p-JNK (P = .036) and p-p38 (P = .011) levels, thereby indicating that MKP1 could exert anti-apoptotic activity. This hypothesis has been further reinforced by the recently reported correlation between MKP detection and poor response to treatment (chemo- and radiotherapy) (AU)

Lectura automatizada de citología de orina: estudio retrospectivo preliminar / Automated cytology readings of urine: a preliminary retrospective study

La lectura automatizada de citología basada en ThinPrep® es una evidente ayuda para el citotécnico y para el patólogo, al identificar campos de interés para ser evaluados. Algunos autores han demostrado la utilidad de la citología líquida ThinPrep® como sustitución del citospin en citología de orina, pero existe muy escasa información acerca de su utilidad. Objetivo. Evaluar la utilidad de la lectura automática de citología, en citología de orina. Material y métodos. Estudio retrospectivo de 180 extensiones de orina. Procesamiento según protocolo con plataforma ThinPrep®, tinción automatizada con teñidor Leica®, lectura manual de la extensión y diagnóstico. Lectura automatizada de citología utilizando Imager® y posterior revisión por los citotécnicos. Resultados. Los resultados fueron clasificados como positivos, negativos, atipia o polioma. La coincidencia diagnóstica fue del 83,9% (Kappa; IC 95%: 0,713 [0,619-0,807]). Todos los casos positivos fueron detectados por el sistema automático. De los 118 casos interpretados previamente como negativos, 97 (82%) fueron reinterpretados como tales. Ningún caso informado previamente como negativo fue interpretado como positivo. La sensibilidad y el valor predictivo negativo del Imager® para la detección de carcinoma en esta serie son del 100%. La especificidad es del 98%, y el valor predictivo positivo, del 91%. El citotécnico revisó 75 de las 180 laminillas (41,7%), la mayoría por atipias (89,6%) y negativos (32,3%). Conclusiones. El uso del Imager® como pre-cribado podría ayudar en la interpretación de la citología de orina. El porcentaje de casos que no precisan de revisión completa podría aumentar con la experiencia del citotécnico (AU)

ThinPrep® Imager system reading method of liquid-based cytology is currently a very helpful tool for both the cytotechnologist and the pathologist. Some authors have shown the usefulness of liquid-based cytology ThinPrep® as a replacement of the citospin in urine cytology. However, there is very little information about its usefulness. Objective. To evaluate the utility of reading urine cytology using ThinPrep® Imager System. Material and methods. A retrospective study of 180 urine cytology smears was carried out. Processing was done according to ThinPrep® platform protocol, automated staining with stainer Leica® and manual reading of the slide and diagnosis, followed by automated reading of cytology using Imager®. Review by cytotechnologists. Results. The results were classified as positive, negative, atypia or polioma. Diagnostic coincidence was 83.9% (Kappa; 95% IC, 0.713 [0,619-0,807]). All positive cases were detected by the automated system. Of the 118 cases previously interpreted as negative, 97 (82%) were reinterpreted as such. None previously reported as negative were interpreted as positive in the study with Imager®. Sensitivity as well as negative predictive value of the Imager® for the detection of carcinoma in this series are 100%. The specificity is 98% and the positive predictive value is 91%. The cytotechnologist reviewed 75/180 slides (41.7%), mostly with atypia (89.6%) or negative (32,3%). Conclusions. The use of the Imager® as a pre-screening method could help in the interpretation of urine cytology and a useful tool for the cytotechnologist. The percentage of cases that do not require complete revision could increase with the experience of the cytotechnologist (AU)

Estudio comparativo de la determinación de HPV entre HC2 y Cervista™ / Comparative study of HC2 and Cervista™ for the detection of HPV

Antecedentes. La determinación del virus del papiloma humano (VPH) en muestras ginecológicas es en la actualidad un elemento clave para la toma de decisiones en patología cervical. El método más contrastado clínicamente es la captura de híbridos de segunda generación (HC2). Métodos. Estudio comparativo de los resultados obtenidos, mediante HC2 y Cervista™, para la detección de VPH de alto riesgo (VPH-AR) en muestras ginecológicas. Resultado. La comparación de resultados muestra una concordancia del 96,4%, con una sensibilidad de Cervista™ para CIN2+ del 98,3% y una especificidad del 98,4%. Conclusiones. Creemos que Cervista™ es un buen método para la detección de VPH-AR, aplicable tanto en el cribado como en la clínica(AU)

Introduction. HPV detection in gynaecological samples currently provides key data in cervical pathology for diagnostic and management decisions. At present HC2 is the most clinically proven method for this purpose. Methods. Comparative study of HPV-HR detection between HC2 and Cervista™. Results. The concordance between the two methods is 96.4%. The sensitivity of Cervista™ for CIN2+ is 98.3% and specificity exceeds 98.4%. Conclusions. We conclude that Cervista™ is an appropriate method for the detection of HPV-HR in gynecological samples for screening and clinical purposes(AU)

La carga viral no es un factor pronóstico en LSIL / Viral load is not a prognostic factor in LSIL

Objetivo. Estudiar el valor de la carga viral para predecir la persistencia y/o la progresión en LSIL. Diseño del estudio. Estudio prospectivo. Todos los casos diagnosticados como LSIL en el año 2006, y seguidos a los 6, 12 y 24 meses después del diagnóstico. Método. Citología líquida (ThinPrep®, Hologic, Malborough, MA, EE. UU.) para realizar el estudio citológico. Test de captura de híbridos (HCII-HR, Quiagen, Hilden, Alemania), utilizando el test para determinar la presencia de VPH de alto riesgo. Resultados. De los 102 casos, 87 fueron HPV positivos (85,3%). La persistencia o progresión se observó en el 54% de los casos en el primer control, en el 42,4% en el segundo control y en el 33,3% en el tercer control. No se demostró lesión en el seguimiento en el 46% de los casos en el primer control, en el 57% de los casos en el segundo control y en el 66,7% de los casos en el tercer control. Diecinueve casos progresaron a HSIL: 11 detectados en el primer control, 6 en el segundo y 2 en el tercero. La sensibilidad para HSIL nunca superó el 89%, con una especificidad siempre menor del 40%. Conclusiones. La determinación de la carga viral mediante HC2 en LSIL no es útil para predecir su comportamiento(AU)

Objective. To study the HPV viral load (VL) in the prediction of the persistence and/or progression in LSIL cases. Study design. Prospective study. 102 consecutive cases diagnosed as LSIL in 2006 with follow-ups at 6, 12 and 24 months subsequent to diagnosis. Method. Liquid based cytology (ThinPrep®, Hologic, Malborough, MA, USA), for the cytological study. Hybrid Captute II Test (HCII-HR, Quiagen, Hilden, Germany), for the determination of the presence or absence of High-Risk HPV. Results. 87 of the 102 cases studied were HR-HPV positive (85.3%). The presence or progression was detected in 54%, 42% and 33.35% of the cases in the first, second and third controls respectively. No lesion was demonstrated in 46%, 57% and 66.7% of the cases at first, second and third controls respectively. 19 cases progressed to HSIL; 11 of which were detected on the first control, 6 on the second and 2 on the third. The sensitivity of the VL for detecting HSIL never exceeded 89%, with a specificity always inferior to 40%. Conclusion. The VL determined by the HC2 method is not a useful indicator of prognosis in the follow-up of LSIL cases(AU)

Síndrome de Meigs y peritonitis esclerosante: una asociación poco frecuente / Meigs’ syndrome and sclerosing peritonitis: an uncommon association

Los tecomas ováricos son tumores estromales relativamente frecuentes que ocasionalmente pueden asociarse con derrame pleural. Los tecomas pueden presentar focos de luteinización y en estos casos se pueden asociar a peritonitis esclerosante. Esta entidad es muy poco frecuente, presenta características histopatológicas propias y clínica heterogénea. Se presenta el caso de una mujer posmenopáusica con dificultad respiratoria y un tumor anexial con sospecha clínica de cáncer ovárico metastásico cuyo estudio anatomopatológico evidenció un tecoma luteinizante con peritonitis esclerosante. Debido a la asociación de una masa ovárica junto a las manifestaciones clínicas que causaba la peritonitis esclerosante es relativamente usual que el diagnóstico de presunción sea de tumor maligno. Todo ello hace importante conocer la entidad, cuya fisiopatología y tratamiento no están consensuados (AU)

Ovarian thecomas are relatively frequent stromal tumors that can occasionally be associated with pleural effusion. Thecomas may contain luteinized foci, and in these cases, can be associated with sclerosing peritonitis. This is a rare, clinically diverse, entity, with its own histopathologic features. We report the case of a postmenopausal woman with respiratory symptoms, bilateral adnexal tumors and suspected metastasizing ovarian cancer, which histopathological study revealed to be a luteinized thecoma associated with sclerosing peritonitis. Due to the clinical manifestations derived from the sclerosing peritonitis and the abdominal mass, a presumptive diagnosis of malignant tumor is quite common. Familiarity with this entity is therefore important. There is no consensus on its physiopathology and treatment (AU)

Citología en medio líquido (Thin Prep Pap Test). Un año de experiencia / Liquid-based cytology (Thin Prep Pap Test). A one-year experience

Objetivos: Evaluar nuestra experiencia en citología en medio líquido (Thin Prep Pap Test) durante un año, evaluando el seguimiento de las pacientes diagnosticadas. Comparar estos datos con nuestros resultados obtenidos previamente con citología convencional. Sujetos y métodos: Se realizaron 11.150 citologías cervicovaginales, 8.086 convencionales y 3.064 en medio líquido (Thin Prep Pap Test) y se evaluaron los resultados. Se efectuó un seguimiento de las pacientes y una evaluación de éste en los casos diagnosticados como células escamosas atípicas de significado incierto y como lesión escamosa intraepitelial de bajo grado. Resultados: Los resultados obtenidos demuestran un incremento de los diagnósticos en todas las categorías, si bien sólo de forma estadísticamente significativa si evaluamos los resultados en conjunto, no por separado. En cuanto al seguimiento, los resultados son similares en la citología convencional y en el Thin Prep. Conclusiones: La citología en medio líquido incrementa de forma más o menos significativa la detección de las lesiones cervicales preneoplásicas y, por tanto, mejora el rendimiento de la citología cervicovaginal

Objectives: To describe our experience of liquid-based cytology (Thin Prep Pap Test) over a 1-year period by evaluating the follow-up of patients with an abnormal result and to compare the results obtained with the Thin Prep Pap Test with those previously obtained with conventional cytology. Subjects and methods: The results of 11,150 cervico-vaginal pap tests (8,086 conventional tests and 3,064 liquid-based tests [Thin Prep]) were evaluated. The follow-up of patients with a diagnosis of atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS) and low-grade squamous intraepithelial lesion (LSIL) was evaluated. Results: Diagnosis of abnormal results in all categories increased, although this increase was only statistically significant when the results were evaluated as a whole. The results of follow-up were similar with both methods. Conclusions: Liquid-based cytology (Thin Prep Pap Test) substantially increases the detection of preneoplastic cervical lesions and consequently improves the yield of cervico-vaginal cytology

ASCUS sobre células metaplásicas. Significado pronóstico de los cambios citológicos / ASCUS-metaplasic cells. Prognostic significance of celular changes

La predicción de la evolución del ASCUS sigue siendo un tema controvertido. En un intentode hallar aspectos citológicos que permitan predecir dicha evolución hemos evaluado 5 detallescitológicos en células escamosas inmaduras con características de ASCUS sugestivo de lesiónescamosa de alto grado. Ninguno de los detalles evaluados ha mostrado valor predictivo respectoa la evolución de la lesión

Follow-up of patients diagnosed as having ASCUS have no predictable morphological data.We have evaluated 5 aspects of ASCUS affecting immature squamous cells to find out whetherthese details have predictive value. None of these data have statistical significance related tofollow-up of the patients examined

ASCUS sobre células metaplásicas Significado pronóstico de los cambios citológicos / ASCUS-metaplasic cells. Prognostic significance of celular changes

La predicción de la evolución del ASCUS sigue siendo un tema controvertido. En un intento de hallar aspectos citológicos que permitan predecir dicha evolución hemos evaluado 5 detalles citológicos en células escamosas inmaduras con características de ASCUS sugestivo de lesión escamosa de alto grado. Ninguno de los detalles evaluados ha mostrado valor predictivo respecto a la evolución de la lesión

Follow-up of patients diagnosed as having ASCUS have no predictable morphological data. We have evaluated 5 aspects of ASCUS affecting immature squamous cells to find out whether these details have predictive value. None of these data have statistical significance related to follow-up of the patients examined