Genome Wide Conditional Mouse Knockout Resources.

The International Knockout Mouse Consortium (IKMC) developed high throughput gene trapping and gene targeting pipelines that produced mostly conditional mutations of more than 18,500 genes in C57BL/6N mouse embryonic stem (ES) cells which have been archived and are freely available to the research community as a frozen resource. From this unprecedented resource more than 6,000 mutant mouse strains have been produced by the IKMC and mostly the International Mouse Phenotyping Consortium (IMPC). In addition, a cre-driver resource was established including 250 inducible cre-driver mouse strains in a C57BL/6 background. Complementing the cre-driver resource, a collection of comprising 27 cre-driver rAAVs has also been produced. The resources can be easily accessed at the IKMC/IMPC web portal (www.mousephenotype.org). The IKMC/IMPC resource is a standardized reference library of mouse models with defined genetic backgrounds that enables the analysis of gene-disease associations in mice of different genetic makeup and should therefore have a major impact on biomedical research.

Soporte telemático de autogestión para pacientes con apnea obstructiva del sueño en tratamiento con CPAP: aspectos metodológicos y resultados preliminares del ensayo clinico telesas / Telematic self-management support for patients with obstructive sleep apnea under CPAP treatment: methodological aspects and preliminary results of the telesas clinical trial

Objetivo: Comprobar si un programa de telemedicina mejora el cumplimiento con CPAP, alcanzando un uso de, al menos, 4 horas al día en el 90% de los pacientes. Realizamos un estudio piloto para comprobar la viabilidad de un proyecto multicéntrico en el que perfeccionaremos dicho programa. Metodología: Pacientes con AOS severa poco sintomáticos en tratamiento con CPAP fueron randomizados a seguimiento habitual o seguimiento habitual más un programa de telemedicina durante 6 meses. Dentro de este programa, las variables de telemonitorización, la aparición de efectos secundarios y la presencia de sueño reparador eran analizadas para generar alarmas e instrucciones al paciente para la autogestión precoz de los problemas presentados con la CPAP. Resultados: 60 pacientes fueron randomizados, 33 al grupo intervención y 27 al grupo control, sin diferencias significativas en las variables basales. El 80% eran hombres con un rango de edad entre los 24 y 75 años. Solo hubo un abandono en el grupo control. Conclusiones: El uso de nuestro programa de telemedicina no ha supuesto ningún problema para los pacientes incluidos a pesar de la horquilla amplia de edad, siendo viable el desarrollo de un estudio a mayor escala con una herramienta de telemedicina perfeccionada. (AU)

Basis: poor compliance with CPAP is a problem at a clinical and research level, assuming the expected results are not achieved. The benefits of using telemedicine in obstructive sleep apnea (OSA) are inconclusive, with its positive effect on compliance being the most consistent in the literature. Objective: to check if a telemedicine program improves compliance with CPAP, reaching use of at least 4 hours a day in 90% of patients. We carried out a pilot study to verify the viability of a multicenter project in which we will perfect this program. Method: patients with severe OSA with few symptoms on CPAP treatment were randomized to usual follow-up or usual follow-up plus a telemedicine program for 6 months. Within this program, the telemonitoring variables, the appearance of side effects and the presence of restorative sleep were analyzed to generate alarms and instructions to the patient for early self-management of the problems presented with CPAP. Preliminary results: 60 patients were randomized, 33 to the intervention group and 27 to the control group, with no significant differences in the baseline variables. 80% were men with an age range between 24 and 75 years. There was only one dropout in the control group. Conclusions: the use of our telemedicine program has not posed any problems for the included patients despite the wide age range, making it feasible to develop a larger-scale study with an improved telemedicine tool. (AU)

Vegetative propagation of Plukenetia polyadenia by cuttings: effects of leaf area and indole-3-butyric acid concentration / Propagação vegetativa de Plukenetia polyadenia por estacas: efeitos de área foliar e concentração de ácido indol-3-butírico

Abstract The seeds of Plukenetia polyadenia have high levels of unsaturated fatty acids and are used as medicine and food for native people in the Peruvian and Brazilian Amazon. The objective of this study was to develop a method for vegetative propagation of Plukenetia polyadenia by rooting of cuttings. The experiment was laid out in a randomized complete block design with 12 treatments and 3 replications of 8 cuttings, in a 3 × 4 factorial arrangement. The factors were: 3 levels of leaf area (25, 50 and 75%) and 3 indole-3-butyric acid - IBA concentrations (9.84, 19.68 and 29.52mM) and a control without IBA. Data were submitted to analysis of variance and means were compared by Tukey test at 5% probability. Our results show that the use of cuttings with 50% of leaf area and treatment with 29.52mM of IBA induced high percentages of rooting (93%) and the best root formation. Vegetative propagation of Plukenetia polyadenia by cuttings will be used as a tool to conserve and propagate germplasm in breeding programs.

Resumo As sementes de Plukenetia polyadenia têm altos níveis de ácidos graxos insaturados e são utilizadas como medicamentos e alimentos para as pessoas nativas da Amazônia Peruana e Brasileira. O objetivo do trabalho foi desenvolver um método de propagação vegetativa de Plukenetia polyadenia por meio do enraizamento de estacas em câmeras de sub-irrigação. Foi utilizado um delineamento de blocos ao acaso com 12 tratamentos e 3 repetições de 8 estacas, e esquema fatorial 3 × 4. Os fatores foram: 3 níveis de área foliar (25, 50 e 75%) e 3 doses de ácido indol-3-butírico - AIB (9,84; 19,68 e 29,52mM) e um controle sem AIB. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. A maior taxa de enraizamento de estacas (93%) foi obtida com 29,52mM de AIB como indutor hormonal e estacas com área foliar de 50%. A propagação vegetativa de Plukenetia polyadenia por estacas será usada como ferramenta para conservar e propagar germoplasma em programas de melhoramento.

Implante de válvula de Ahmed para el manejo del glaucoma uveítico refractario: seguimiento a largo plazo / Ahmed glaucoma drainage implant surgery in the management of refractory uveitic glaucoma: Long-term follow up

OBJETIVO: Evaluar la eficacia, seguridad y complicaciones a largo plazo del implante de válvula de Ahmed en pacientes con glaucoma uveítico refractario. MÉTODOS: Revisión retrospectiva de casos consecutivos de pacientes con glaucoma uveítico refractario intervenidos mediante un implante de válvula de Ahmed entre los años 2004-2014. Las características demográficas, la agudeza visual, la presión intraocular (PIO), el número de medicamentos antiglaucomatosos y las complicaciones operatorias y postoperatorias fueron registradas. El éxito completo se definió como una PIO ≥ 5 y ≤ 18 mmHg sin medicamentos, y el éxito calificado, como una PIO ≤ 18 mmHg con uno o más medicamentos. Aquellos pacientes con un seguimiento inferior a 12 meses fueron excluidos. RESULTADOS: Veintiún pacientes (26 ojos) fueron incluidos. El seguimiento promedio postoperatorio fue de 53,5 ± 31 meses. Ocho ojos (30%) tuvieron al menos una cirugía de glaucoma fallida previamente. La PIO se redujo de una media de 30 a 14mmHg en la última visita (p < 0,001). El número de medicamentos antiglaucomatosos se redujo de una mediana de 2,9 a 1,1 en la última visita (p < 0,001). Siete ojos (27%) se calificaron como éxito completo, 13 ojos (50%) como éxito calificado y 6 ojos (23%) cumplieron el criterio de falla. La complicación postoperatoria más frecuente fue la fase hipertensiva en 12 ojos (46%). El análisis de supervivencia de Kaplan-Meier mostró una probabilidad acumulada de éxito del 65% a los 84 meses. CONCLUSIONES: La cirugía de implante de drenaje de glaucoma de Ahmed se puede considerar una opción quirúrgica eficaz y segura a largo plazo para los pacientes con glaucoma uveítico refractario

OBJECTIVE: To examine the long-term efficacy, safety and complications of Ahmed glaucoma drainage implant surgery in patients with refractory uveitic glaucoma. METHODS: Retrospective review of consecutive cases of patients with refractory uveitic glaucoma who underwent Ahmed glaucoma drainage implant surgery between 2004-2014. Demographic characteristics of the study population, visual acuity, intraocular pressure (IOP), number of antiglaucoma medications and operative and postoperative complications were recorded. Complete success was defined as IOP ≥ 5 and ≤ 18 mmHg without any medication, as qualified success if IOP ≤ 18 mmHg with one or more medications. Patients with less than 12 months of follow-up were excluded. RESULTS: 21 patients (26 eyes) were included. The mean postoperative follow-up was 53.5 ± 31 months. Eight eyes (30%) had at least one previously failed glaucoma surgery. IOP was reduced from a mean of 30.0mmHg to 14.0mmHg at the last follow-up visit (P < .001). The number of IOP-lowering medications was reduced from a median of 2.9 preoperatively to 1.1 at the last follow-up (P < .001). Overall, 7 eyes (27%) were classified as complete success, 13 eyes (50%) were considered as qualified success, and 6 eyes (23%) met the criteria for failure. The most common postoperative complication was hypertensive phase in 12 eyes (46%). Kaplan-Meier life-table analysis showed a cumulative probability of success after Ahmed glaucoma valve implantation of 65% at 84 months. CONCLUSIONS: Ahmed glaucoma drainage implant surgery may be considered a long-term effective and safety surgical option for patients with refractory uveitic glaucoma

Factores de riesgo de mortalidad tras intervención quirúrgica de fractura de cadera osteoporótica en pacientes mayores / Risk factors for mortality after surgery of osteoporotic hip fracture in patients over 65 years of age

Objetivo. Valorar desde una perspectiva clínica y con variables fácilmente identificables aquellos factores que influyen en la supervivencia de los pacientes ingresados en una unidad asistencial diseñada para el tratamiento integral de pacientes con fractura de cadera, tras ser intervenidos quirúrgicamente. Material y método. Estudio prospectivo de una cohorte de pacientes (n=202) de edad igual o mayor de 65 años con fractura de cadera de bajo impacto, intervenidos quirúrgicamente en un hospital terciario, que analizó la mortalidad a 90 días, 1 y 2años tras la intervención con relación a variables demográficas, clínicas, analíticas y de funcionalidad. Resultados. Los factores de riesgo independientes de mortalidad en los 3periodos analizados fueron la edad (p=0,047; 0,016 y 0,000 a 90 días, 1 y 2 años, respectivamente) y el bajo índice de Barthel (p=0,014; 0,005 y 0,004 a 90 días, 1 y 2 años respectivamente). Sin embargo, el sexo masculino (p=004) y el riesgo para anestesia (p=0,011) resultaron ser solo factores de riesgo independientes de mortalidad a los 2años de la intervención quirúrgica. Discusión y conclusión. Tanto a corto plazo (30 días) como hasta los 2 años de la intervención quirúrgica por fractura de cadera los mayores condicionantes de mortalidad fueron la edad y la dependencia. Ambos son parámetros fácilmente medibles que permiten identificar a pacientes susceptibles de mala evolución desde el ingreso y que podrían beneficiarse de una atención más exhaustiva (AU)

Objective. To evaluate, from a clinical perspective, and with easily identifiable variables, those factors that influence the survival of patients admitted to a care unit designed for the comprehensive treatment of patients with hip fracture after being surgically treated. Material and methods. A prospective study was conducted on a cohort of patients (n=202) aged 65 years or older with a low impact hip fracture, who were surgically intervened in a tertiary hospital. An analysis was performed to determine mortality at 90 days, and at one and 2years after surgery using demographic, clinical, analytical, and functional variables. Results. The independent risk factors of mortality in the 3periods analysed were age (P=.047, P=.016, and P=.000 at 90 days, 1, and 2 years, respectively) and a low Barthel index (P=.014, P=.005, and P=.004 to 90 days, 1, and 2 years, respectively). Male sex (P=.004) and a high risk for anaesthesia (P=.011) were only independent risk factors of mortality at 2years after surgery. Discussion and conclusion. Age and dependency were the major determining factors of mortality at 30 days, 1, and 2 years after surgery for hip fracture. Both are easily measurable to identify patients susceptible to poor outcomes, and could benefit from a more thorough care plan (AU)

Efectividad y seguridad a largo plazo del bypass gástrico en “Y” de Rouxy de la banda gástrica: revisión sistemática / Long-term efficacy and safety of Roux-en-Y gastric bypass and gastric

Antecedentes: La cirugía bariátrica se ha incrementado sustancialmente en los últimos años. Sin embargo, existen controversias sobre la efectividad y seguridad a largo plazo. Objetivo: Evaluar la efectividad y seguridad a largo plazo del bypass gástrico en Y de Roux (BGRY) y de la banda gástrica (Band). Metodología: Se realizó una búsqueda de estudios clínicos aleatorizados y de cohorte, que utilizaron el BGRY y la Band , con seguimiento de > 48 meses, con descripción de pérdida de peso, complicaciones y mortalidad. Resultados: Cuatro trabajos aleatorizados y un estudio prospectivo cumplieron con los criterios de inclusión. La pérdida de peso promedio fue mayor con el BGRY (27%-39%) que con la Band (13%-35%). El índice de complicaciones es alto con ambos procedimientos. El índice de reoperaciones es más alto con la Band. Conclusiones: Los resultados observados en esta revisión no son suficientes para generalizar la efectividad y seguridad de la cirugía bariátrica en diferentes sistemas sanitarios (AU)

Background: Bariatric surgery has increased substantially in the last years. However, there are controversies of the long-term efficacy and safety. Objective: To evaluate the long-term efficacy and safety of Roux-en-Y gastric bypass (BGRY) and gastric banding (Band) in randomized controlled trials and cohort studies. Methods: We searched for randomized controlled trials and cohort studies of BGRY and Band, with a follow-up > 48 months, with description of weight loss, complications and mortality. Results: Four randomized trials and one cohort study met the inclusion criteria. Mean weight loss was greater with BGRY (27%-39%) than with Band (13%-35%). In both procedures the complication rate is high. Second operation rate is higher with Band. Conclusions: The outcomes observed from this revision are not sufficient to generalize the efficacy and safety of bariatric surgery to population attended at different health care systems (AU)

PET/TC con 18F-FDG en la valoración de pacientes con sospecha de síndrome paraneoplásico neurológico / 18F-FDG PET/CT in the evaluation of patients suspected of paraneoplastic neurological syndrome

Objetivo. Definir el impacto diagnóstico de la PET/TC con 18F-FDG en función de las características clínicas del síndrome paraneoplásico neurológico (SPN). Material y métodos. Estudio retrospectivo multicéntrico y longitudinal de pacientes con sospecha de SPN. El cuadro clínico se clasificó en síndrome clásico (SC) o no clásico (SNC). Tras el seguimiento se estableció el diagnóstico de SPN definitivo o posible. Los cuadros que no encajaron en ninguna de las categorías previas se catalogaron como no clasificables. Se analizó el estado de los anticuerpos onconeuronales. La PET/TC se clasificó en positiva o negativa para la detección de malignidad. Se determinó la relación entre los hallazgos PET/TC y el diagnóstico final. Se analizaron las diferencias entre variables (Chi cuadrado de Pearson) y la relación entre el resultado de la PET/TC y el diagnóstico definitivo. Resultados. Se analizaron 64 pacientes. El 30% de los cuadros clínicos se catalogaron como SC y el 42% como SNC. Tras el seguimiento el 20% se clasificó en SPN posible y el 16% en definitivo. El 13% de los pacientes tenía anticuerpos onconeuronales positivos. El hecho de poseer un SPN definitivo se relacionó con un resultado positivo de la PET/TC (p = 0,08). Se demostró relación significativa entre la positividad de los anticuerpos y el diagnóstico final de proceso neoplásico (p = 0,04). La PET/TC fue eficaz en la correcta localización tumoral en 5/7 casos con cáncer invasivo. Conclusiones. La PET-TC mostró un mayor porcentaje de resultados positivos en pacientes con diagnóstico de SPN definitivo. A pesar de la baja prevalencia de malignidad en nuestra serie, la PET/TC detectó malignidad en una significativa proporción de pacientes con cáncer invasivo (AU)

Objective. This study aimed to determine the diagnostic impact of 18F-FDG PET/CT based on the clinical features of paraneoplastic neurological syndrome (PNS). Material and methods. Multicenter retrospective and longitudinal study of patients with suspicion of PNS. The clinical picture was classified into classic (CS) and non-classic syndrome (NCS). After the follow-up, the definitive or possible diagnosis of PNS was established. The pictures that did not match any of the previous criteria were categorized as non-classifiable. The state of the onco-neural antibodies was studied. The PET/CT was classified as positive or negative for the detection of malignancy. The relationship between PET/CT findings and the final diagnosis was determined. The differences between variables (Pearson test X2) and the relationship between the results of the PET/CT and the final diagnosis were analyzed. Results. A total of 64 patients were analyzed, classifying 30% as CS and 42% as NCS. After the follow-up, 20% and 16% of subjects were diagnosed as possible and definitive PNS, respectively. Positive onco-neural antibodies were found in 13% of the patients. A definitive diagnosis of PNS was associated with a positive PET/CT (P = .08). A significant relation between antibodies expression and final diagnosis of neoplasia (P = .04) was demonstrated. The PET/CT correctly localized malignancy in 5/7 cases of invasive cancer. Conclusions. The PET/CT showed a higher percentage of positive results in patients with definitive diagnosis of PNS. Despite the low prevalence of malignancy in our series, the PET/CT detected malignancy in a significant proportion of patients with invasive cancer (AU)

Caracterización del nivel de dependencia al alcohol entre habitantes de la Ciudad de México

resumen está disponible en el texto completo

Summary: The dynamic and scope of the consumption of alcoholic beverages, in Mexico, have been known by household surveys, since the last third of the last century. Nowadays those surveys describe alcohol use as one of the main public health tasks nationwide, due not only to its consequences but also to the damage on the different areas of individual's everyday life. A number of indicators have been highlighted by the first survey on 1988, such as teetotalism rates, the alcohol consumers proportion, age of first use, and problems associated with alcohol consumption. As a public health problem, alcohol consumption represents high costs to health institutions because of the problems related to the consumption. So, it requires undertaking certain actions that would be deal with this problem on primary and structural attention, as well as in the individual susceptibility as prevention, or attention levels, diagnosis and treatment. All actions to face this problem are practically impossible in the absence of instruments to establish differential diagnosis between heavy drinking and alcohol dependence. Along the study of alcoholism, have been distinguished two issues to establish differential diagnosis. First is a traditional version of dependence diagnosis by DSM criterions, defined as disadaptative pattern of alcohol consumption that produces significant malaise, expressed trough one year long. The second diagnosis issue quantifies the individual differences of physical, psychological and social damage degrees, caused by the alcohol consumption. From this, appears the motion of Multiple Alcoholism Syndrome. From this last point of view, The Alcohol Use Inventary by Skinner, Horn and Wanberg (1983), is compose by 147 items self administrated, clusted in 24 scales. Time latter, as of many researches done by this research group, aroused The Multiple-syndrome Alcohol Model as The Alcohol Use Inventary simplified version, used as a useful differential diagnosis questionnaire in alcoholics. There for, last version has been done many researches that agree on characterize the alcohol use inventory as screening questionnaire useful to detect problematic drinking to implement primary intervention. Those authors suggest the use of this questionnaire at different stages and populations, with different cut points. Antecedent's use of the questionnaire in Mexico, by Ayala et al., made the adapted version, however, researches seems to be not enough to know the validity of diagnostic instruments on ethanol dependence. The Alcohol Dependence Scale (ADS) consider the dependence as a continuum of four levels, depending on the damage degree associated with alcohol consumption, on the different areas of physical, intellectual, social and psychiatric functioning. In the questionnaire 1 is the minimum cut point for dependence diagnostic and 48 as the highest point, this rank lets differentiate with respect to low dependence, moderate dependence, substantial dependence and severe dependence. This article pretends to diffuse the EDS's validity on inhabitants in Mexico City. As methodology, a case design and 1:1 paired controls were used by age and marital status. Through a not intentioned sampling by quotas were selected 240 men of 18 to 50 years old. The cases group was integrated by 120 individuals that voluntarily sought treatment at the Center of Assistance for the Alcoholic and Relatives (CAAF) from June, 1998 to June, 2000. All cases comply with DSM-IV alcohol dependence criterion; they reported the last consumption at one month before the beginning of the research and with basic school as scholar level. In the control group were 120 volunteers that request treatment to CAAF from June, 1998 to June, 2000. They did not comply with alcohol dependence criterion. As gold standard, was considered the DSM-IV criteria to sensibility, specificity and predictive values; the factorial structure and internal consistency of the scale are indicated. Socio-demographic data indicated 34 years old as sample average, just over the half had a partner at the time of the study; the predominant education level was secondary school (35%). In the cases the 86% covered 6 to 7 criteria for ethanol dependence in the DSM-IV; the predominant dependence level was moderate at 37%, while 53% of the control group had no evidence of dependence. The heterogeneity test showed significant statistics differences on dependence levels in cases and controls (t=23, df=238 and p=0.00). The ADS displays overall internal consistency of 0.96, based on the Cronbach Reliability Coefficient, a higher level of consistency than that reported in previous studies. With a factorial analysis by varimax rotation and maximum likelihood extraction, revealed the presence of three factors with 56.5% of variance explained: intoxication (48.3%), abstinence (5.6%) and delirium tremens. In the application manual, the authors specify 13/14 as values to use the DAS as a diagnosis questionnaire, and 9 for a screening instrument. While other authors suggest less cut points 13/14 to 2/3 to reduce the false-negative; however, on Mexico City inhabitants, such cut points were inappropriate. The most suitable cut point to detect a significant dependence on clinical was at 8 points, with 96% sensitivity, 98% specificity and a 94% likelihood of making correct diagnoses. These findings show that DAS is a suitable screening instrument for using on Mexico City inhabitants. We suggest including items to evaluate social area or any other scale to complement the ADS.

Comparison of some behavioral and physiological feeding parameters of Triatoma infestans klug, 1834 and Mepraia spinolai porter, 1934, vectors of chagas disease in Chile

There are two vectors of Chagas disease in Chile: Triatoma infestans and Mepraia spinolai. We studied the feeding behavior of these species, looking for differences which could possibly explain the low impact of the latter species on Chagas disease. Both species used thermal cues to locate their feeding source and consumed a similar volume of blood which was inversely related to the body weight before the meal and directly related to the time between meals. The average time between bites were 6.24 and 10.74 days. The average bite of M. spinolai lasted 9.68 min, significantly shorter than the 19.46 min for T. infestans. Furthermore, while T. infestans always defecated on the host, this behavior was observed in M. spinolai in only one case of 27 (3.7 per cent). The delay between the bites and defecation was very long in M. spinolai and short in T. infestans. These differences may affect the reduced efficiency of transmission of Chagas infection by M. spinolai.

Incidencia de los trastornos de personalidad en esquizofrenia: relación con variables clínicas y sociodemográficas / No disponible

Se da una alta incidencia de los trastornos de personalidaden esquizofrenia, aunque los estudios realizadosno han encontrado una prevalencia clara de ningún trastornoen concreto. Tampoco se han llegado a conclusionesclaras sobre la relación entre los trastornos de personalidady los síntomas positivos y negativos. Estetrabajo valora la presencia de trastornos de personalidaden una muestra de 107 pacientes, y su relación convariables clínicas y sociodemográficas. Los resultadosobtenidos indican que un alto porcentaje de pacientestiene asociado algún trastorno de personalidad. Los trastornosmás frecuentes fueron los trastornos esquizoide,fóbico, dependiente, compulsivo y esquizotípico. Estostrastornos se relacionaron con síntomas positivos ynegativos. No se halló ninguna relación significativacon las variables sociodemográficas. Estos datos sonconsistentes con resultados previos, y plantean la necesidadde desarrollar programas de intervención específicospara pacientes con esquizofrenia con comorbilidadde trastornos de personalidad

There is a high incidence of personality disorders inschizophrenia, although studies don’t find a clear prevalenceof any specific diagnosis. Relationship betweenthese disorders and positive and negative symptoms isnot conclusive. The aim of this paper is to evaluate theprevalence of personality disorders in a sample of 107schizophrenic outpatients, and its relationship with clinicaland demographic variables. Results showed a highprevalence of personality disorders in schizophrenia.The most frequent personality disorders were schizoid,avoidant, dependent, compulsive and schizotypal.These disorders showed relationship with positive andnegative symptoms. No relationship with demographicvariables were found. These results are consistent withprevious findings, and indicate the desirability of developingspecific programs of rehabilitation for patients with schizophrenia and co-morbid personality disorders (AU)

Patterns and variability in electrophoretic polypeptide profiles of human saliva in a healthy population

Electrophoretic polypeptide profiles of normal human saliva differ markedly between different reports. Since both methodological variations and polymorphism may explain these differences, in this study we aimed to establish whether or not the salivary electrophoretic polypeptide profiles of subjects from a healthy population share discrete molecular features. To this end, parotid, submandibular/sublingual and whole salivas were collected separately from each of 40 young and 34 elderly clinically healthy adults and processed for SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and Coomassie blue staining. Each type of glandular saliva displayed a different group of invariant (i.e. present in every subject) electrophoretic polypeptide bands while whole saliva showed a profile that reflected mostly the combined contribution of the major salivary glands. Some minor variant (i.e. absent in some subjects) bands were identified in each type of saliva. Regarding those interindividual variations, no ageor sex-dependence was appreciated. Altogether, these results demonstrate the occurrence of distinctive electrophoretic polypeptide patterns, in addition to some minor variations, for each type of normal saliva, thus providing a background for further populational studies on salivary polypeptide profiles (AU)

Los perfiles electroforéticos de la saliva humana normal publicados presentan marcadas diferencias. Puesto que estas diferencias podrían deberse a polimorfismo poblacional o a variaciones metodológicas, en el presente estudio pretendemos determinar si los perfiles polipeptídicos electroforéticos salivales de una población sana comparten rasgos moleculares. Con este propósito, se colectó saliva parotídea, saliva submandibular/sublingual y saliva total de 40 sujetos adultos jóvenes y 34 sujetos adultos mayores, clínicamente sanos. Las muestras de saliva fueron sometidas a fraccionamiento electroforético en geles de poliacrilamida-SDS y reveladas por tinción con azul de Coomassie. Cada tipo de saliva glandular presentó un grupo característico de bandas polipeptídicas invariables (presentes en todos los sujetos). En la saliva total se pudo observar un perfil que reflejaba principalmente la contribución proteica de las glándulas salivales mayores. En todos los tipos salivales analizados, se pudo observar algunos polipéptidos variables (ausentes en algunos sujetos). Estas variaciones interindividuales no se relacionaron con el sexo o la edad de los individuos. El conjunto de los resultados demuestra la existencia de patrones polipeptídicos distintivos para cada tipo salival junto con la presencia de algunos pocos rasgos variantes en condiciones de normalidad, lo que podría servir de base en futuros estudios poblacionales sobre perfiles polipeptídicos salivales (AU)

La glándula pineal como transductor neuroendocrino / Pineal gland as a neuroendocrine transductors

La glándula pineal de los mamíferos funciona como una interfase neuroendocrina, transformando los cambios de luz ambiental en un mensaje hormonal: la síntesis y liberación nocturna de melatonina. La noradrenalina, liberada desde las terminaciones nerviosas simpáticas procedentes del ganglio cervical superior, interactúa con los receptores - y 1-noradrenérgicos situados en la membrana del pinealocito, iniciando una serie de acontecimientos que culminan en la síntesis de melatonina. La estimulación del receptor activa la adenilato ciclasa, produciendo un rápido incremento en los valores intracelulares de adenosín monofosfato complementario (AMPc), la activación de una proteína cinasa dependiente de AMPc y la fosforilación del factor de transcripción CREB. La interacción del CREB fosforilado con las secuencias específicas en el ADN induce la expresión de la serotonina N-acetil transferasa (SNAT), enzima que cataliza el paso limitante en la síntesis de melatonina. El CREB fosforilado también activa la expresión de una proteína represora que bloquea la transcripción de la SNAT. El receptor 1 potencia la respuesta noradrenérgica activando una proteína cinasa dependiente de Ca+2 y de la hidrólisis de fosfatidilinositol. Además del control nervioso, se ha demostrado que la biosíntesis de melatonina se ve afectada por las oscilaciones de los valores circulantes de esteroides gonadales. En células pineales, las hormonas sexuales regulan directamente la respuesta a la estimulación adrenérgica y, de forma recíproca, la noradrenalina regula la cinética del receptor de estrógenos. En otras áreas del sistema nervioso se han descrito interacciones similares entre hormonas y neurotransmisores, lo que podría representar un mecanismo básico en los procesos de integración neuroendocrina a escala celular. La glándula pineal constituye un modelo extremadamente útil para la disección de los componentes de tales mecanismos (AU)

Estudio de la reproducibilidad de la técnica de medición de óxido nítrico en aire exhalado en sujetos sanos / Reproducibility of a technique for measuring nitric oxide in exhaled air in healthy subjects

El óxido nítrico exhalado (NOe) ha quedado establecido como el primer marcador no invasivo de inflamación en las vías aéreas. Las cifras de NOe publicadas ponen de manifiesto una gran variabilidad, y en ocasiones estas diferencias son debidas a la técnica de medición empleada.OBJETIVO: Determinar la reproducibilidad de la técnica utilizada por nuestro grupo y si la concentración de NOe obtenida está sometida a variaciones dependientes de características antropométricas y dieta.MÉTODO: Estudiamos a 20 sujetos sanos (10 varones y 10 mujeres) con una edad media de 28,21 años. A todos se les realizaron mediciones seriadas de NOe en ayunas (N1), 30 min tras la ingestión de verduras (N2) y 30 min tras la ingesta de carne/pescado (N3). Cada valor (N1, N2, N3) era la media aritmética de tres mediciones consecutivas separadas 10 min entre sí. Medimos el NOe por método directo de quimioluminiscencia con flujo controlado descartando el aire del espacio muerto y con generación de presión en cavidad oral suficiente para cerrar el paladar blando (analizador Eco Physics CLD 77AM). RESULTADOS: Obtuvimos una concentración media ñ desviación estándar (DE) para N1 de 3,40 ñ 1,30 ppb; para N2 de 4,03 ñ 1,00 ppb y para N3 de 3,71 ñ 1,05 ppb. Las diferencias observadas entre estas tres determinaciones no fueron estadísticamente significativas (p > 0,05). Las mediciones seriadas (separadas 10 min) realizadas tampoco evidenciaron cambios significativos entre las mismas. Al estudiar la influencia del sexo sobre el NOe, encontramos que en ayunas la concentración media ñ DE en las mujeres era de 3,13 ñ 0,41 ppb y en los varones 3,72 ñ 0,31 ppb sin que estas diferencias fueran significativas. Por último, estudiamos la influencia del índice de masa corporal (IMC) en el NOe, sin encontrar diferencias significativas entre los sujetos con IMC 25 (n = 15) y aquellos con IMC > 25 (n = 5).CONCLUSIONES: La técnica empleada por nuestro grupo es reproducible y las concentraciones obtenidas de NOe son independientes de la dieta, sexo e IMC. (AU)

Caracterización citofluorométrica de dos anticuerpos monoclonales específicos de epítopos polimórficos de moléculas HLA de clase I: 30.13.38 (anti-A2, A68, A69) y 29.30.6 (Anti-Bw6) / Cytofluorometric characterisation of two monoclonal antibodies recognising polymorphic epitopes of HLA class I molecules: 30.13.38 (anti-A*02, A*68 and A*69) and 29.30.6 (anti-Bw6)

Hemos caracterizado mediante citometría de flujo los anticuerpos monoclonales frente a moléculas HLA de clase I 30.13.38 y 29.30.6. Nuestros datos previos sobre su reactividad, obtenidos mediante citotoxicidad dependiente de complemento, indicaban que estos anticuerpos eran específicos de HLA-A2+A28, y del epítopo Bw6 portado por algunas moléculas HLA-B, respectivamente. Los experimentos de citometría de flujo mostraron que 30.13.38 reacciona con todos los alelos A*02, A*68 y A*69 disponibles en nuestro laboratorio: A*0201, *0204, *0205, *0207, *0211, *6801, *6802, and *6901. De acuerdo con estos datos, el epítopo diana más probable de 30.13.38 es TTKH (142-145). Por otra parte, el anticuerpo 29.30.6 tiñó con alta intensidad todas las células que expresan alelos con la secuencia asociada a Bw6 ESLRNLRG (76-83). Además, 29.30.6 reconoció con menor afinidad las variantes de esa secuencia que aparecen en B*7301 (VGLRNLRG), B*4601 (VSLRNLRG) y múltiples alelos HLA-C. No obstante, la afinidad de la interacción con estas variantes está por debajo o cerca del umbral de sensibilidad de la tipificación serológica (AU)

Ensayo diagnóstico para IgE humana por ultramicroELISA empleando anticuerpos monoclonales / Diagnostic assay for human IgE by ultramicroELISA using monoclonal antibodies

La cuantificación de las concentraciones séricas de la inmunoglobulina E (IgE), tiene gran importancia diagnóstica en las enfermedades alérgicas. En Cuba existe, desde 1987, un programa nacional de diagnóstico de esta entidad, que emplea como elemento tecnológico fundamental un sistema ultramicroELISA (UME), tipo sandwich con anticuerpos policlonales, anti IgE. La introducción de anticuerpos monoclonales (AcM) en estos procedimientos puede proporcionar ventajas, especialmente lo que se refiere a especificidad, y producción de los reactivos. Nosotros hemos obtenido hibridomas secretores de AcM contra IgE, mediante la fusión del mieloma P3/x63.Ag8.653, con linfocitos esplénicos de ratones inmunizados con una preparación purificada de IgE humana monoclonal. Los 10 AcM obtenidos, parecen reconocer determinantes antigénicos alotípicos de la cadena * humana. El CP-IgE.1 (IgG2a) se estudió a mayor profundidad con anticuerpo de captura y revelado, en UME. Se demostró que este AcM puede sustituir efectivamente al anticuerpo policlonal de recubrimiento y puede ser empleado también como segundo anticuerpo en esta técnica. Se evaluó el funcionamiento de un UME con el CB-IgE. En la fase sólida y un anticuerpo policlonal de revelado en la cuantificación de IgE a partir de muestras de pacientes, obteniéndose 100 % de coincidencia diagnóstica con el UME policlonal, y repetibilidad y reproducibilidad adecuadas