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1.
Nat Commun ; 12(1): 4375, 2021 07 16.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-34272366

RESUMEN

DNMDP and related compounds, or velcrins, induce complex formation between the phosphodiesterase PDE3A and the SLFN12 protein, leading to a cytotoxic response in cancer cells that express elevated levels of both proteins. The mechanisms by which velcrins induce complex formation, and how the PDE3A-SLFN12 complex causes cancer cell death, are not fully understood. Here, we show that PDE3A and SLFN12 form a heterotetramer stabilized by binding of DNMDP. Interactions between the C-terminal alpha helix of SLFN12 and residues near the active site of PDE3A are required for complex formation, and are further stabilized by interactions between SLFN12 and DNMDP. Moreover, we demonstrate that SLFN12 is an RNase, that PDE3A binding increases SLFN12 RNase activity, and that SLFN12 RNase activity is required for DNMDP response. This new mechanistic understanding will facilitate development of velcrin compounds into new cancer therapies.


Asunto(s)
Fosfodiesterasas de Nucleótidos Cíclicos Tipo 3/química , Péptidos y Proteínas de Señalización Intracelular/química , Piridazinas/química , Adenosina Monofosfato/química , Rastreo Diferencial de Calorimetría , Dominio Catalítico , Supervivencia Celular/efectos de los fármacos , Supervivencia Celular/genética , Microscopía por Crioelectrón , Fosfodiesterasas de Nucleótidos Cíclicos Tipo 3/genética , Endorribonucleasas/química , Células HEK293 , Células HeLa , Humanos , Péptidos y Proteínas de Señalización Intracelular/genética , Cinética , Espectrometría de Masas , Complejos Multienzimáticos/ultraestructura , Mutación , Unión Proteica , Conformación Proteica en Hélice alfa , Multimerización de Proteína , Piridazinas/farmacología , Proteínas Recombinantes , Tetrahidroisoquinolinas/química
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