Validación de un ELISA para la cuantificación de las impurezas proteicas de la cepa hospedera en el principio activo de la vacuna recombinante cubana contra la hepatitis B / Validation of an ELISA for the quantification of protein impurities from host strain on the active principle of the Cuban recombinant vaccine against hepatitis B

Se validó un inmunoensayo tipo sandwich de doble anticuerpo para cuantificar las impurezas proteicas de la cepa hospedera que pueden estar presentes en el principio activo de la vacuna cubana contra la hepatitis B. Seprepararon los reactivos biológicos empleados en el ELISA. Las proteínas de la cepa hospedera se obtuvieron bajo las mismas condiciones que el proceso de producción de la proteína recombinante hasta un paso de semipurificación o purificación primaria. Los antisueros dirigidos contra las proteínas de la cepa hospedera segeneraron en conejos por un proceso de inmunización en cascada. Para la validación se analizaron los siguientesparámetros: linealidad, límite de detección y cuantificación, exactitud, rango y precisión. El ensayo establecido resultó específico, con una exactitud entre 89 por ciento y 109 por ciento para todos los tampones estudiados; se demostró un ajuste parabólico y un rango de trabajo entre 0,63 y 1,25 ng/mL, la repetibilidad y la precisión intermedia mostraron coeficientes de variación inferiores al 10 y 20 por ciento respectivamente(AU)

be present in the active pharmaceutical ingredient of Cuban vaccine against hepatitis B. All biological reagentsused in the ELISA were prepared and characterized. The proteins from the host strain were obtained under thesame conditions as the production process of the recombinant protein until a purification or primary emipurificationstep. The antisera addressed against those proteins were generated in rabbits by an immunization process incascade. For validation the parameters analyzed were: linearity, limit of detection and quantification, accuracy,range and precision. The established assay was specific, and the calculated accuracy was from 89 por ciento to 109por ciento for all studied buffers. A parabolic fit and a working range from 0.63 to 1,25 ng/mL were emonstrated. The repeatability and intermediate precision showed variation coefficients below 10 por ciento and 20 por ciento respectively(AU)

Establecimiento y validación de un ensayo inmunoenzimático tipo ELISA, empleado en el control de calidad del Interferón alfa 2b humano recombinante / Establishment and validation of an ELISA-type immunoenzymatic assay, used for quality control of human recombinant alpha-2b Interferon

Se estableció y validó un ELISA para la cuantificación del Interferón alfa 2b humano recombinante en el Ingrediente Farmacéutico Activo, definiéndose los criterios de validez del ensayo y basado en el cumplimiento de las Buenas Prácticas de Laboratorio. Se evaluaron los parámetros de: linealidad, especificidad, exactitud, rango, precisión y robustez. El ensayo establecido resultó específico, con una exactitud entre 84,3 por ciento y 102,4 por ciento, se demostró un ajuste cuadrßtico y un rango de trabajo entre 1 y 10 ng/mL; la repetibilidad y la precisión intermedia mostraron coeficientes de variación inferiores al 10 por ciento y 20 por ciento respectivamente, y se comprobó la robustez del método con respecto al efecto borde y la estabilidad de las soluciones(AU)

An ELISA for quantification of human recombinant alpha-2b Interferon in the Active Pharmaceutical Ingredient (API) was established and validated, and the validity criteria for the assay were defined, based on Good Laboratory Practices compliance. The following parameters were evaluated: linearity, specificity, accuracy, range, precision and robustness. The assay was specific, with accuracy from 84,3 to 102,4 percent, a quadratic adjustment and a working range from 1 to 10 ng/mL, repetibility and intermediate precision with coefficients of variation lower than 10 percent and 20 percent respectively, and robustness confirmed in relation to the edge effect and the stability of solutions(AU)

Establecimiento de un material de referencia para interferón gamma humano recombinante / Establishment of a reference material for human recombinant gamma interferon

Se caracterizó el lote de interferón gamma utilizado como material de referencia por diferentes técnicas analíticas y se demostró mediante los diferentes análisis de varianza realizados para cada una de las técnicas ensayadas, que el lote cumple con lo aceptado para ser usado como material de referencia. El estudio de homogeneidad realizado por la técnica de cromatografía líquida de alta eficacia en fase reversa demostró que el material de referencia posee el grado de homogeneidad requerido para su uso. El lote es estable por 2 años a – 70 °C, según estudios previos realizados a los lotes de producción de materia prima activa de interferón gamma humano recombinante

Establecimiento de un material de referencia para interferón gamma humano recombinante / Establishment of a reference material for human recombinant gamma interferon

Se caracterizó el lote de interferón gamma utilizado como material de referencia por diferentes técnicas analíticas y se demostró mediante los diferentes análisis de varianza realizados para cada una de las técnicas ensayadas, que el lote cumple con lo aceptado para ser usado como material de referencia. El estudio de homogeneidad realizado por la técnica de cromatografía líquida de alta eficacia en fase reversa demostró que el material de referencia posee el grado de homogeneidad requerido para su uso. El lote es estable por 2 años a 70 °C, según estudios previos realizados a los lotes de producción de materia prima activa de interferón gamma humano recombinante(AU)