Selenosugars targeting the infective stage of Trypanosoma brucei with high selectivity.

Earlier evidences showed that diglycosyl diselenides are active against the infective stage of African trypanosomes (top hits IC50 0.5 and 1.5 µM) but poorly selective (selectivity index <10). Here we extended the study to 33 new seleno-glycoconjugates with the aim to improve potency and selectivity. Three selenoglycosides and three glycosyl selenenylsulfides displayed IC50 against bloodstream Trypanosoma brucei in the sub-µM range (IC50 0.35-0.77 µM) and four of them showed an improved selectivity (selectivity index >38-folds vs. murine and human macrohages). For the glycosyl selenylsulfides, the anti-trypanosomal activity was not significantly influenced by the nature of the moiety attached to the sulfur atom. Except for a quinoline-, and to a minor extent a nitro-derivative, the most selective hits induced a rapid (within 60 min) and marked perturbation of the LMWT-redox homeostasis. The formation of selenenylsulfide glycoconjugates with free thiols has been identified as a potential mechanism involved in this process.

Biomasa residual de industria del Cannabis, una alternativa para la obtención de productos de alto valor agregado

A medida que como sociedad vamos dando más importancia a lograr una economía circular, se hace importante encontrar fuentes renovables aptas para la producción de biocombustibles y bioquímicos. En los últimos años, diversas fuentes de biomasa lignocelulósica han sido estudiadas para estos propósitos. Dentro de estas fuentes de biomasa se encuentra el cáñamo (Cannabis sativa L.), siendo parte de una industria que ha crecido a pasos agigantados en las últimas décadas, en Colombia, desde su legalización. Específicamente, la industria del cannabis medicinal es responsable de generar una enorme cantidad de residuos en forma de los tallos de la planta, considerados un subproducto de bajo valor. En esta revisión se compila la información de diferentes estudios sobre el aprovechamiento de la fracción de polisacáridos de biomasa cáñamo, mediante transformaciones químicas y bioquímicas, para la obtención de productos de valor agregado. Se encontró que la mayoría de estudios están enfocados en la obtención de bioetanol o biogás; se encontraron también reportes de otras moléculas como ácido succínico, ácido láctico, furfural, polihidroxialcanoatos y bisaboleno. La viabilidad a nivel industrial de todos estos procesos permanece siendo una incógnita, pues los pasos de pretratamiento, hidrólisis y de conversión final utilizados suelen ser costosos. Es necesario que los estudios que realicen en el futuro se enfoquen en optimizar las condiciones de estos procesos y hacerlos verdes y así asegurar que puedan ser escalados.

As we as a society, give more importance to achieving a circular economy, it becomes important to find renewable sources suitable for the production of biofuels and biochemicals. In the last years, several different sources of lignocellulosic biomass have been studied for these purposes. One of these biomass sources is hemp (Cannabis sativa L), being part of an industry that has grown through giant steps in the last decades, in Colombia, since its legalization. Specifically, the industry of medicinal hemp is responsible for the generation of huge amounts of residues in the form of the plant stalks, considered a low value subproduct. This review compiles the information of several studies about the exploitation of the polysaccharide portion of hemp biomass through chemical and biochemical transformations, obtaining value-added products. It was found that most of these studies focus on the production of bioetanol or biogas; reports of other molecules such as succinic acid, furfural, polyhydroxyalkanoates and bisabolene were also found. Industrial viability of these processes remains a question, since pretreatment, hydrolysis and final conversion steps are usually expensive. It necessary that future studies focus on optimizing conditions of these processes as well as making them green, ensuring that they can be scaled.

Drug-like molecules with anti-trypanothione synthetase activity identified by high throughput screening.

Trypanothione synthetase (TryS) catalyses the synthesis of N1,N8-bis(glutathionyl)spermidine (trypanothione), which is the main low molecular mass thiol supporting several redox functions in trypanosomatids. TryS attracts attention as molecular target for drug development against pathogens causing severe and fatal diseases in mammals. A drug discovery campaign aimed to identify and characterise new inhibitors of TryS with promising biological activity was conducted. A large compound library (n = 51,624), most of them bearing drug-like properties, was primarily screened against TryS from Trypanosoma brucei (TbTryS). With a true-hit rate of 0.056%, several of the TbTryS hits (IC50 from 1.2 to 36 µM) also targeted the homologue enzyme from Leishmania infantum and Trypanosoma cruzi (IC50 values from 2.6 to 40 µM). Calmidazolium chloride and Ebselen stand out for their multi-species anti-TryS activity at low µM concentrations (IC50 from 2.6 to 13.8 µM). The moieties carboxy piperidine amide and amide methyl thiazole phenyl were identified as novel TbTryS inhibitor scaffolds. Several of the TryS hits presented one-digit µM EC50 against T. cruzi and L. donovani amastigotes but proved cytotoxic against the human osteosarcoma and macrophage host cells (selectivity index ≤ 3). In contrast, seven hits showed a significantly higher selectivity against T. b. brucei (selectivity index from 11 to 182). Non-invasive redox assays confirmed that Ebselen, a multi-TryS inhibitor, induces an intracellular oxidative milieu in bloodstream T. b. brucei. Kinetic and mass spectrometry analysis revealed that Ebselen is a slow-binding inhibitor that modifies irreversible a highly conserved cysteine residue from the TryS's synthetase domain. The most potent TbTryS inhibitor (a singleton containing an adamantine moiety) exerted a non-covalent, non-competitive (with any of the substrates) inhibition of the enzyme. These data feed the drug discovery pipeline for trypanosomatids with novel and valuable information on chemical entities with drug potential.

Novel distamycin analogues that block the cell cycle of African trypanosomes with high selectivity and potency.

Polyamides-based compounds related to the Streptomycetal distamycin and netropsin are potent cytostatic molecules that bind to AT-rich regions of the minor groove of the DNA, hence interfering with DNA replication and transcription. Recently, derivatives belonging to this scaffold have been reported to halt the proliferation of deadly African trypanosomes by different and unrelated mechanisms. Here we describe the synthesis and preliminary characterization of the anti-trypanosomal mode of action of new potent and selective distamycin analogues. Two tri-heterocyclic derivatives containing a central N-methyl pyrrole ring (16 and 17) displayed high activity (EC50 < 20 nM) and selectivity (selectivity index >5000 with respect to mammalian macrophages) against the infective form of T. brucei. Both compounds caused cell cycle arrest by blocking the replication of the mitochondrial DNA but without affecting its integrity. This mode of action clearly differs from that reported for classical minor groove binder (MGB) drugs, which induce the degradation of the mitochondrial DNA. In line with this, in vitro assays suggest that 16 and 17 have a comparatively lower affinity for different template DNAs than the MGB drug diminazene. Therapeutic efficacy studies and stability assays suggest that the pharmacological properties of the hits should be optimized. The compounds can be rated as excellent scaffolds for the design of highly potent and selective anti-T. brucei agents.

Lipasas en síntesis de polímeros: avances y contribución a la química verde de polímeros / Lipases in polymer synthesis: advantages and its contribution to green polymer chemistry

RESUMEN Las lipasas han sido usadas en las últimas décadas como catalizadores eficientes en la síntesis enzimática de polímeros y gracias a características como alta selectividad, reciclabilidad, inocuidad y fácil separación/purificación se han convertido en una herramienta importante en el campo de los polímeros. En este trabajo se recopilan los desarrollos más importantes en el área y a su vez se muestra la tendencia actual de este campo de investigación.

ABSTRACT Lipases have been used in last decades as efficient catalysts in enzimatic polymer chemistry, thanks to its high selectivity, recyclabil-ity, safety and easy recovery/ separation, lipases have become in an important tool in polymer field. In this paper we compile the most important achievements in the enzimatic polymer chemistry and, at the same, time we show the current trend in this field of research.

Umbilical Myiasis by Cochliomyia hominivorax in an Infant in Colombia.

Myasis is the infestation by fly larvae (Diptera) in live vertebrates including humans. Myasis has been reported most commonly in tropical and subtropical areas around the world with poor sanitation and presence of cattle. Neonatal umbilical myiasis is an important cause of death in bovines and produces major economic losses in the livestock industry. However, its presentation in humans is rare, with a few cases reported worldwide. Moreover, umbilical myasis can be life-treating due to the risk of larvae migration to deeper tissues of the abdomen, omphalitis, and sepsis. We describe the case of a 7-day-old infant admitted to the hospital due to umbilical cord myiasis. In total, 55 larvae were removed from the wound and identified as Cochliomyia hominivorax. The patient recovered satisfactorily after treatment with ivermectin and amoxicillin. A literature search was performed in Pubmed, Medline, Lilacs and Google Scholar, with 64 cases of myasis by C. hominivorax being reviewed. Oral cavity, wounds, scalp and natural orifices are the main affected anatomical areas. Risk factors include the extremes of age, male sex, poor hygiene, alcohol and drug use, cancer, and mental disability. Programs for human myiasis prevention and surveillance are needed in neotropical areas where living conditions make it difficult to implement control strategies.

Miocarditis en Pediatría / Myocarditis in Paediatrics

Resumen La miocarditis es una enfermedad inflamatoria del músculo cardiaco no asociada a anormalidades valvulares y en ausencia de enfermedad isquémica. Su prevalencia e incidencia se desconocen, ya que se presenta de manera subaguda o con síntomas iniciales inespecíficos. Su fisiopatología consta de tres fases: aguda (< 3 días-daño miocárdico mediado por acción directa del virus), subaguda (4-14 días-el daño miocárdico resulta de una disregulación de la respuesta autoinmune del huésped) y crónica (> 15 días-aclaramiento viral insuficiente y perpetuación del proceso inflamatorio, que conduce a remodelamiento cardiaco y falla cardiaca). Como agente etiológico más frecuente se describe el Parvovirus B19 y el herpes virus humano 6. Entre las manifestaciones clínicas: dolor torácico, arritmias, en lactantes (letargo, taquipnea, dificultad respiratoria leve, etc.), puede iniciar con pródromo viral, disfunción ventricular o muerte súbita. Tiene cuatro posibles presentaciones clínicas: asintomático, miocarditis aguda, fulminante o miocardiopatía crónica dilatada. El electrocardiograma detecta anormalidades entre el 93 al 100%; la resonancia magnética nuclear cardiovascular con gadolinio es de mayor uso, principalmente en la biopsia endomiocárdica. El tratamiento se basa en la monitorización hemodinámica del paciente, la evaluación de la necesidad de diuréticos, inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, betabloqueadores no selectivos, soporte inotrópico, antiarrítmicos o, en casos severos, el requerimiento de soporte mecánico cardiovascular. Se evalúa el uso de inmunoglobulina y, de manera controversial, el de inmunosupresor y antiviral. El pronóstico es variable y depende de factores inherentes al ambiente y al huésped. Se realizó una revisión actualizada de la literatura.

Abstract Myocarditis is an inflammatory disease of the heart muscle unrelated to valvular abnormalities and ischaemic disease. The prevalence and incidence are unknown since it is presented sub-acutely or with non-specific initial symptoms. Its pathophysiology consists of three phases: acute <3 days-myocardial damage mediated by direct action a virus), sub-acute (4-14 days-the myocardial damage is due to a dysregulation of an autoimmune host response), and chronic (>15 days - insufficient viral clearance and perpetuation of the inflammatory process, which leads to cardiac remodelling and heart failure). Parvovirus B19 and human herpesvirus 6 have been described as the most common aetiological agents. The clinical signs include, chest pain, arrhythmias, and in infants (lethargy, tachypnoea, mild shortness of breath, etc.) It can start with a viral prodrome, ventricular dysfunction, or sudden death. There are four possibilities of clinical presentation: asymptomatic, acute myocarditis, fulminant or dilated chronic cardiomyopathy. The electrocardiogram detects between 93%-100% of abnormalities. Cardiovascular nuclear magnetic resonance with gadolinium is the most used, mainly in endomyocardial biopsy. Treatment is based on the haemodynamic monitoring of the patient, the evaluation of the need for diuretics, angiotensin converting enzyme inhibitors, non-selective beta-blockers, inotropic support, anti-arrhythmic drugs or, in severe cases, and the need for mechanical cardiovascular support. The use of immunoglobulin has been evaluated, and there is controversy over the use of immunosuppressives and antivirals. The prognosis is variable and depends on factors inherent to the environment and the host. An updated review of the literature is presented.

Diglycosyl diselenides alter redox homeostasis and glucose consumption of infective African trypanosomes.

With the aim to develop compounds able to target multiple metabolic pathways and, thus, to lower the chances of drug resistance, we investigated the anti-trypanosomal activity and selectivity of a series of symmetric diglycosyl diselenides and disulfides. Of 18 compounds tested the fully acetylated forms of di-ß-D-glucopyranosyl and di-ß-D-galactopyranosyl diselenides (13 and 15, respectively) displayed strong growth inhibition against the bloodstream stage of African trypanosomes (EC50 0.54 µM for 13 and 1.49 µM for 15) although with rather low selectivity (SI < 10 assayed with murine macrophages). Nonacetylated versions of the same sugar diselenides proved to be, however, much less efficient or completely inactive to suppress trypanosome growth. Significantly, the galactosyl (15), and to a minor extent the glucosyl (13), derivative inhibited glucose catabolism but not its uptake. Both compounds induced redox unbalance in the pathogen. In vitro NMR analysis indicated that diglycosyl diselenides react with glutathione, under physiological conditions, via formation of selenenylsulfide bonds. Our results suggest that non-specific cellular targets as well as actors of the glucose and the redox metabolism of the parasite may be affected. These molecules are therefore promising leads for the development of novel multitarget antitrypanosomal agents.

In vitro activity and mode of action of distamycin analogues against African trypanosomes.

Distamycin, a natural polyamide containing three heterocycle rings with a polar end, has inspired several groups to prepare synthetic analogues, which proved to have anti-trypanosomal and anti-tumoral activity. We describe the synthesis of bi and tri thiazoles amides that harbor different substitutions at their ends and the evaluation of their anti-Trypanosoma brucei activity. The most active compound 10b showed better biological activity (EC50 310 nM and selectivity index 16) than the control drug nifurtimox (EC50 15 µM and selectivity index 10). Studies on the mode of action show that the parasiticidal activity of 10b originates from disruption of lysosomal homeostasis, which is followed by release of redox active iron, an increase in oxidizing species and collapse of cell membrane integrity. In this respect, our study suggests that non-charged lipophylic distamycins destabilize cell membranes.

Carcinoma broncogénico e insuficiencia respiratoria; electrofulguración del tumor, traqueobroncoplastia e implante de prótesis de urgencia / Bronchogenic carcinoma and respiratory insufficiency; tumor electrofulguration, tracheobronchoplasty and urgent stent placement

El cáncer de pulmón, de los más frecuentes y de muy alta mortalidad, en el departamento de Risaralda, Colombia presenta tasas por encima de 10 muertes por 100.000 habitantes.En fases iniciales la enfermedad no produce síntomas o son inespecíficos; cuando produce síntomas, usualmente está en una etapa avanzada. La disnea se presenta cuando la lesión tumoral compromete las vías respiratorias centrales y de acuerdo al grado de obstrucción, generalmente cuando es mayor a 50 porciento, que la hace grave. Se presenta el caso de un paciente que ingresa por cuadro clínico de insuficiencia respiratoria aguda secundaria a obstrucción traqueobronquial crítica por compromiso intraluminal de tumor broncogénico, de tipo escamocelular mal diferenciado; se realizó broncoscopia rígida, electrofulguración del tumor, citoreducción (“debulking”) mecánica, traqueo-broncoplastia e implante de prótesis traqueo-carino-brónquica (stent en Y) con resolución del cuadro agudo de manera inmediata posterior al procedimiento; posteriormente recibió quimioterapia con cisplatino / gemcitabine y radioterapia.

Lung cancer, one of the most frequent and with very high mortality, in the stateof Risaralda, Colombia, has rates above 10 deaths per 100.000 people.In early stages, disease doesn't produce symptoms or are nonspecific; whenproduce symptoms, usually is in advance stage.Dyspnea appears when tumor compromise central airway and depends onsevere obstruction, generally more than 50%, which makes it serious.Lung cancer presents a case of patient with acute respiratory insufficiency due tocritical trachea obstruction by bronchogenic tumor intraluminal commitmenttype, poorly differentiated squamous; at this stage it has been made rigidbronchoscopy, tumor with electrofulguration, mechanic debunking, tracheabronchoplasty and It takes immediate acute illness resolution; later he receivedcisplatin / gemcitabin chemotherapy and radiotherapy.

Arco aórtico derecho circunflejo retroesofágico con ligamento arterioso izquierdo: una variedad infrecuente de anillo vascular completo / Circumflex retroesophageal right aortic arch with left arterial ligament: an infrequent variety of complete vascular ring

Los anillos vasculares pertenecen a un grupo de anomalías congénitas de los arcos aórticos en los que la tráquea y el esófago, o ambos, están completamente rodeados por estructuras vasculares. Con frecuencia pueden causar obstrucción y, en consecuencia, alteración de la deglución y dificultad respiratoria, por lo cual deben incluirse en el diagnóstico diferencial de obstrucción de la vía aérea superior. El diagnóstico temprano y la liberación quirúrgica oportuna de la obstrucción de la vía aérea y del esófago, o ambos, pueden mejorar los síntomas en la mayoría de casos. Esta afección debe sospecharse y evaluarse en lactantes o niños pequeños con síntomas respiratorios recurrentes como tos crónica, estridor y sibilancias o, lo que es menos común, con síntomas relacionados con alteración de la deglución. A continuación se ilustra el caso de un niño de seis años con problemas de deglución crónicos y desnutrición a quién se le realizó un diagnóstico incidental del arco aórtico derecho circunflejo retroesofágico con ligamento arterioso izquierdo corregido mediante cirugía.

Vascular rings are a group of congenital anomalies of the aortic arches in which the trachea and esophagus, or both, are completely surrounded by vascular structures. Often, they can cause obstruction and consequently impaired swallowing and respiratory distress, so they must be included in the differential diagnosis of obstruction of the upper airway. Early diagnosis and timely surgical release of obstruction of the airway and esophagus, or both, may improve symptoms in the majority of cases. This condition must be suspected and evaluated in infants or young children with recurrent respiratory symptoms such as chronic cough, stridor, wheezing or, less commonly, with symptoms related to impaired swallowing. We illustrate the case of a six-year-old child with chronic swallowing problems and malnutrition who underwent an incidental diagnosis of circumflex retroesophageal right aortic arch with left ligamentum arteriosum corrected by surgery.

Aneurisma de la vena de Galeno como causa de falla cardíaca / Galen’s vein aneurysm as cause of heart failure

Se presenta el caso de un recién nacido que ingresa a cuidado intensivo con un cuadro de falla cardiaca de difícil manejo con ductus arterioso de gran tamaño, a quien se le realizó cierre quirúrgico del mismo y pese a ello persistía con clínica de falla cardiaca que no mejoraba con tratamiento médico. Se hizo un hallazgo incidental de un aneurisma de la vena de Galeno de gran tamaño.El aneurisma de la vena de Galeno es una patología congénita poco frecuente que se origina de un defecto en la fusión de las venas cerebrales internas, debido a la baja resistencia produce un cuadro de falla cardiaca de alto gasto.Los defectos de gran tamaño pueden contener entre 50 porciento a 60 porciento del gasto cardiaco.Se debe sospechar aneurisma en todo recién nacido o lactante menor con cuadro de falla cardíaca y dilatación de cavidades derechas sin evidencia de anomalía cardíaca estructural.

Evolucion y resultados de dos tecnicas quirurgicas para correcion de la d-transposicion de grandes vasos / Evolution and result of two corrective surgiral techniques of d-traspotition of the great arteries

La d-transposición de grandes vasos (d-TGV)es una cardiopatía congénita cianosante frecuente en el período neonatal. Hay dos técnicas quirúrgicas correctivas: el switch atrial (Mustard o Senning) y el switch arterial (Jatene). El objetivo general fue determinar el comportamiento epidemiológico del diagnóstico y manejo médico quirúrgico empleado mediante un análisis estadístico empleando métodos no paramétricos. Treinta y cuatro pacientes fueron incluidos. Se correlacionaron con la literatura mundial las variables demográficas del diagnóstico clínico y estudios paraclínicos como el electrocardiograma y la radiografía de tórax. El ecocardiograma, clasificó la enfermedad y aportó información acerca de la magnitud de los cortocircuitos así como la asociación de malformaciones intracardíacas. El tratamiento prequirúrgico incluyó rashkind, oxigenación, diuréticos e inotrópicos. Se emplearon las dos técnicas quirúrgicas en el 50 por ciento de los casos cada una. Hubo diferencia en la edad de consulta y tratamiento definitivo. Se evidenció falla moderada a severa en el crecimiento. El tiempo de perfusión se incrementó notablemente para el grupo sometido a Jatene existiendo una relación directamente proporcional con la letalidad posquirúrgica inmediata. Se estableció asociación como determinante de morbimortalidad entre el efecto muerte con el menor peso (R:R 3.75), la desnutrición (R:R 1.8), las malformaciones asociadas (R:R 1.3) y el mayor tiempo de perfusión (R:R5.0). Las complicaciones postoperatorias se relacionaron con la función ventricular y los trastornos de ritmo o conducción. Hubo necesidad de reintervenir ocasionalmente para revisar o tratar una complicación. La tasa de letalidad global fue inferior al 15 por ciento para la técnica Mustard y del 50 por ciento para Jatene con una disminución hasta del 28 por ciento en los últimos tres años. Las dos técnicas quirúrgicas empleadas para corregir la d-transposición de grandes vasos comparadas tienen indicaciones precisas determinadas por la morfo-físiología de la enfermedad y el momento de la corrección definitiva

Lesiones respiratorias y alteraciones en el material del lavado pulmonar en ratones expuestos a la inhalación de basuco / Respiratory injury and alterations in the broncoalveolar lavage in mice exposed to basuco inhalation

Desde 1970, por su menor costo, se ha popularizado el uso de formas intermedias, menos purificadas de cocaína (base de cocaína), especialmente para ser fumadas. Sólo existen informes aislados de manifestaciónes patológicas respiratorias asociadas con fumar base de cocaína, se desarrolló el presente estudio para tratar de caracterizar mejor las lesiones que en el pulmón origina la inhalación de basuco. Se utilizaron dos grupo de veintidos ratones; uno se expuso a basuco y el otro sirvió como control. La dosis de basuco se calculó de acuerdo con la cantidad promedio utilizada por un consumidor diariamente. Se sacrificaron paulatinamente durante un año; se realizó lavado pulmonar y los pulmones fueron extraídos, insuflados y fijados en formol para ser procesados completamente. Los hallazgos de los ratones control fueron normales. En el grupo expuesto, la bronquiolitis linfoplasmocitaria fué el hallazgo más común (44 por ciento), seguido por la neumonitis intersticial (22 por ciento), inflamación linfocitica perivascular (22 por ciento) y bronquiolitis folicular (17 por ciento). La distribución citológica diferencial de los lavados broncoalveolares se correlacionó con los hallazgos histopatológicos. Se demuestra con claridad que la inhalación de basuco induce cambios histopatológicos en el pulmón de ratón, así como en el recuento citológico diferencial del lavado broncoalveolar.

Lesiones pulmonares y lavado broncoalveolar en ratones expuestos a la inhalación de base de cocaina (Basuco) / Respiratory pathologic manifestations of cocaine inhalation in mice

Desde 1970 por su menor costo, se ha popularizado el uso de formas intermedias, menos purificadas de cocaína (base de cocaína), especialmente por inhalación de cigarrillos; de acuerdo a la región recibe diversos nombres: en USA se conoce como Crack, en nuestro medio como basuco. Sólo existen informes aislados de manifestaciones patológicas respiratorias asociadas con fumar base de cocaína, por lo que se desarrolló el presente estudio para tratar de caracterizar mejor las lesiones que en el pulmón origina la inhalación de basuco. Se utilizaron dos grupos de 22 ratones blancos; uno se expuso a basuco y el otro sirvió como control. La dosis de basuco se calculó de acuerdo con la cantidad promedio utilizada por un consumidor habitual. Se sacrificaron paulatinamente durante un año; se realizó lavado broncoalveolar y los pulmones fueron extraídos, insuflados en formol para ser procesados completamente. Los hallazgos histopatológicos y los recuentos celulares de los lavados broncoalveolares de los controles fueron normales. En el grupo expuesto la bronquiolitis linfoplasmocitaria fué el hallazgo más común (44 por ciento), seguido porla neumonitis intersticial (22 por ciento), inflamación linfocítica perivascular (22 por ciento) y bronquiolitis folicular (17 por ciento). También se observó hemorragia alveolar, bronquiolitis obliterante y neumonía descamativa. La distribución citológica diferencial de los lavados broncoalveolares se correlacionó con los hallazgos histopatológicos. Se demuestra con claridad que la inhalación de basuco induce cambios histopatológicos en el pulmón de ratón así como en el recuento citológico diferencial del lavado broncoalveolar, lo que justifica la realización de investigaciones en grupos humanos expuestos