RESUMEN
Chronic hepatitis C virus (HCV) infection is a leading cause of liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC) worldwide. The HCV capside core is a multifunctional protein with regulatory functions that affects transcription and cell growth in vitro and in vivo. Here, we show that both HCV genotype 1a and 3 core proteins activate MEK1 and Erk1/2 MAP kinases and that the costitutive expression of the HCV core results in a high basal activity of Raf1 and MAP/kinase/kinase, as determined by endogenous Raf1 in vitro kinase assay and immunodetection of hyperphosphorylated Erk1 and Erk2 even after a serum starvation. Moreover, the activation of both Erk1/2 and the downstream transcription factor Elk-1 in response to the mitogenic stimulus EGF is significantly prolonged. The sustained response to EGF in cells expressing the HCV core occurs despite a normal induction of the MAP phosphatases MKP regulatory feedback and is likely due to the costitutive activation of Raf-1 activity. The ability of HCV core proteins to directly activate the MAP kinase cascade and to prolong its activity in response to mitogenic stimuli may contribute to the neoplastic transformation of HCV infected liver cells.
Asunto(s)
Quinasa 1 de Quinasa de Quinasa MAP , Sistema de Señalización de MAP Quinasas/fisiología , Proteínas Quinasas Activadas por Mitógenos/metabolismo , Proteínas Proto-Oncogénicas c-raf/metabolismo , Proteínas del Núcleo Viral/fisiología , Activación Enzimática , Genotipo , Hepacivirus/genética , Humanos , Proteína Quinasa 1 Activada por Mitógenos/metabolismo , Proteína Quinasa 1 Activada por Mitógenos/fisiología , Proteína Quinasa 3 Activada por Mitógenos , Proteínas Quinasas Activadas por Mitógenos/fisiología , Proteínas Serina-Treonina Quinasas/metabolismo , Proteínas Serina-Treonina Quinasas/fisiología , Proteínas Proto-Oncogénicas c-raf/fisiología , Proteínas del Núcleo Viral/biosíntesis , Proteínas del Núcleo Viral/genéticaRESUMEN
The p53-inducible gene PC3 (TIS21, BTG2) is endowed with antiproliferative activity. Here we report that expression of PC3 in cycling cells induced accumulation of hypophosphorylated, growth-inhibitory forms of pRb and led to G(1) arrest. This latter was not observed in cells with genetic disruption of the Rb gene, indicating that the PC3-mediated G(1) arrest was Rb dependent. Furthermore, (i) the arrest of G(1)-S transition exerted by PC3 was completely rescued by coexpression of cyclin D1 but not by that of cyclin A or E; (ii) expression of PC3 caused a significant down-regulation of cyclin D1 protein levels, also in Rb-defective cells, accompanied by inhibition of CDK4 activity in vivo; and (iii) the removal from the PC3 molecule of residues 50 to 68, a conserved domain of the PC3/BTG/Tob gene family, which we term GR, led to a loss of the inhibition of proliferation as well as of the down-regulation of cyclin D1 levels. These data point to cyclin D1 down-regulation as the main factor responsible for the growth inhibition by PC3. Such an effect was associated with a decrease of cyclin D1 transcript and of cyclin D1 promoter activity, whereas no effect of PC3 was observed on cyclin D1 protein stability. Taken together, these findings indicate that PC3 impairs G(1)-S transition by inhibiting pRb function in consequence of a reduction of cyclin D1 levels and that PC3 acts, either directly or indirectly, as a transcriptional regulator of cyclin D1.
Asunto(s)
Ácido Aspártico Endopeptidasas/genética , Ciclo Celular/genética , Ciclina D1/genética , Proteína de Retinoblastoma/genética , Proteína p53 Supresora de Tumor/genética , Células 3T3 , Animales , Fase G1/genética , Regulación de la Expresión Génica , Ratones , Proproteína Convertasas , Fase S/genética , Transcripción GenéticaRESUMEN
Se presenta el seguimiento comparativo a largo plazo (entre 5 y 15 años) de 2 procedimientos terapéuticos de la necrosis aséptica (NA) incipiente de la cabeza femoral en el adulto. Fueron comparados 2 métodos, uno realizado entre mediados de los años 60 hasta mediados de los años 70, el bloqueo metafisario descrito por M. Napolitano y N. Bloise de Napolitano, y el otro, que realizamos a partir de mediados de los años 70, las perforaciones múltiples (forage), preconizadas por Arlet y Ficat. Se estudiaron 14 caderas tratadas con el bloqueo metafisario y 42 tratadas con perforaciones múltiples (core decompression de los autores norteamericanos) y se comparó a ambos grupos con 6 caderas diagnosticadas con punción bajo TAC, todos los casos en estadio O, 1 o 2a de la clasificación de Arlet y Ficat. La comparación se realizó, por la discrepancia entre los métodos diagnósticos y puntuaciones clasificatorias de época, exclusivamente en base al parámetro de la necesidad de un segundo procedimiento para tratar la NA. Los resultados fueron: grupo bloqueos: no requirieron otro tratamiento el 21,42 por ciento de los pacientes a los 12,5 años de efectuado el bloqueo, mientras que requirieron tratamiento (osteotomía, reemplazo total de cadera [RTC] ) el grupo forage: no requirieron otro tratamiento el 16,66 por ciento de los pacientes a los 11,5 años y sí lo requirieron el 83,33 por ciento de los pacientes a los 5,8 años de la intervención ; grupo control: el 100 por ciento de los pacientes de este grupo fue tratado con RTC dentro de los 4,8 años de seguimiento. Se efectúan consideraciones acerca de la validez de estos resultados y se concluye que, en cierta forma, fue más efectivo el bloqueo que las perforaciones, siendo ambos efectivos frente al grupo control
Asunto(s)
Adulto , Cadera , Necrosis de la Cabeza Femoral/terapia , ArgentinaRESUMEN
Se presenta el seguimiento comparativo a largo plazo (entre 5 y 15 años) de 2 procedimientos terapéuticos de la necrosis aséptica (NA) incipiente de la cabeza femoral en el adulto. Fueron comparados 2 métodos, uno realizado entre mediados de los años 60 hasta mediados de los años 70, el bloqueo metafisario descrito por M. Napolitano y N. Bloise de Napolitano, y el otro, que realizamos a partir de mediados de los años 70, las perforaciones múltiples (forage), preconizadas por Arlet y Ficat. Se estudiaron 14 caderas tratadas con el bloqueo metafisario y 42 tratadas con perforaciones múltiples (core decompression de los autores norteamericanos) y se comparó a ambos grupos con 6 caderas diagnosticadas con punción bajo TAC, todos los casos en estadio O, 1 o 2a de la clasificación de Arlet y Ficat. La comparación se realizó, por la discrepancia entre los métodos diagnósticos y puntuaciones clasificatorias de época, exclusivamente en base al parámetro de la necesidad de un segundo procedimiento para tratar la NA. Los resultados fueron: grupo bloqueos: no requirieron otro tratamiento el 21,42 por ciento de los pacientes a los 12,5 años de efectuado el bloqueo, mientras que requirieron tratamiento (osteotomía, reemplazo total de cadera [RTC] ) el grupo forage: no requirieron otro tratamiento el 16,66 por ciento de los pacientes a los 11,5 años y sí lo requirieron el 83,33 por ciento de los pacientes a los 5,8 años de la intervención ; grupo control: el 100 por ciento de los pacientes de este grupo fue tratado con RTC dentro de los 4,8 años de seguimiento. Se efectúan consideraciones acerca de la validez de estos resultados y se concluye que, en cierta forma, fue más efectivo el bloqueo que las perforaciones, siendo ambos efectivos frente al grupo control