RESUMO
HLA-G desempeña un papel tolerogénico en la interfase maternofetal.En programas de reproducción asistida, en los que se cultivan embrionesin vitro, ha cobrado interés la detección de las isoformas solubles deesta molécula (sHLA-G) en el medio en el que se han crecido los embriones.Aunque la determinación es compleja, tiene interés por su aparenterelación con la idoneidad de dichos embriones. En el presente trabajo,se ha puesto a punto un ensayo ELISA amplificado para medir sHLA-Ga las concentraciones esperables en dichos sobrenadantes. Como modelocomparativo se ha utilizado el cultivo a dilución límite de la línea de coriocarcinomaJEG-3. Con el ELISA desarrollado se han analizado retrospectivamente111 sobrenadantes recogidos a las 44-48 horas de efectuadafecundación mediante inyección intracitoplasmática del espermatozoide,y los datos se han correlacionado con los resultados reproductivos dedichos embriones. En 22 de los sobrenadantes (19.8%) se ha detectadosHLA-G. No se ha encontrado relación entre los niveles de sHLA-G y elgrado morfológico de los embriones. Los resultados reproductivos de losembriones de morfología normal que fueron transferidos al útero de laspacientes (2-3 por caso) fueron los siguientes: en el grupo de mujeres querecibió únicamente embriones sHLA-G negativos, las tasas de embarazoe implantación fueron, respectivamente, 29% (4 embarazos/14 mujeres)y 14% (5 sacos gestacionales/35 embriones transferidos). Por contra,en el grupo que recibió al menos un embrión sHLA-G positivo, las tasasde embarazo e implantación subieron al 60% (3 / 5) y 29% (4/14) respectivamente.En conclusión, es posible cuantificar niveles de sHLA-G ensobrenadantes de embriones y los resultados obtenidos sugieren asociacióncon la probabilidad de embarazo. La detección de sHLA-G, por tanto,podría ser un buen complemento de la selección morfológica de embrionesútil para incrementar la tasa de implantación y reducir la de embarazosmúltiples
HLA-G plays a tolerogenic function at the maternal-fetal interface.Detection of the soluble isoforms of HLA-G (sHLA-G) in culture mediumderived from embryos grown in vitro, although technically complex,has gained interest in assisted reproduction programs because of an apparentrelationship with embryo competence. Here, an amplified ELISA wasdesigned to measure sHLA-G at the concentrations expected in embryosupernatants using a limiting-dilution assay of the choriocarcinoma JEG-3 cell line as a surrogate model. With this ELISA approach, 111 singleembryo culture supernatants, collected 44-48 hours after intracytoplasmicsperm injection, were retrospectively analysed and levels correlatedwith pregnancy results. The presence of sHLA-G was demonstrated in 22(19.8%) of the embryo cultures. There was no relationship between sHLAGlevels and grading of embryo morphology. The reproductive outcomeof the morphologically normal embryos that were transferred to thewomen uterus (2-3 per patient) was as follows: in the group of women inwhich all transferred embryos were sHLA-G negative, the pregnancy andimplantation rates were 29% (4 pregnancies/14 women) and 14% (5 gestationalsacs/35 embryos transferred), respectively. In contrast, in thegroup in which the embryo transfers included at least one sHLA-G positivethe pregnancy and implantation rates increased to 60% (3/5) and29% (4/14) respectively. In conclusion, sHLA-G levels in preimplantationembryo supernatants can be quantified and results suggest positive associationwith pregnancy likelihood. sHLA-G detection seems to be usefulto complement morphology in selecting good quality embryos for increasingimplantation rates and reducing multiple gestations