Mutational screening of the TPO and DUOX2 genes in Argentinian children with congenital hypothyroidism due to thyroid dyshormonogenesis.

PURPOSE: Primary congenital hypothyroidism (CH) is the most common endocrine disease in children and one of the preventable causes of both cognitive and motor deficits. We present a genetic and bioinformatics investigation of rational clinical design in 17 Argentine patients suspected of CH due to thyroid dyshormonogenesis (TDH). METHODS: Next-Generation Sequencing approach was used to identify variants in Thyroid Peroxidase (TPO) and Dual Oxidase 2 (DUOX2) genes. A custom panel targeting 7 genes associated with TDH [(TPO), Iodothyrosine Deiodinase I (IYD), Solute Carrier Family 26 Member 4 (SLC26A4), Thyroglobulin (TG), DUOX2, Dual Oxidase Maturation Factor 2 (DUOXA2), Solute Carrier Family 5 Member 5 (SLC5A5)] and 4 associated with thyroid dysembryogenesis [PAX8, FOXE1, NKX2-1, Thyroid Stimulating Hormone Receptor (TSHR)] has been designed. Additionally, bioinformatic analysis and structural modeling were carried out to predict the disease-causing potential variants. RESULTS: Four novel variants have been identified, two in TPO: c.2749-2 A > C and c.2752_2753delAG, [p.Ser918Cysfs*62] and two variants in DUOX2 gene: c.425 C > G [p.Pro142Arg] and c.2695delC [p.Gln899Serfs*21]. Eighteen identified TPO, DUOX2 and IYD variants were previously described. We identified potentially pahogenic biallelic variants in TPO and DUOX2 in 7 and 2 patients, respectively. We also detected a potentially pathogenic monoallelic variant in TPO and DUOX2 in 7 and 1 patients respectively. CONCLUSIONS: 22 variants have been identified associated with TDH. All described novel mutations occur in domains important for protein structure and function, predicting the TDH phenotype.

Thyroid hormone synthesis continues despite biallelic thyroglobulin mutation with cell death.

Complete absence of thyroid hormone is incompatible with life in vertebrates. Thyroxine is synthesized within thyroid follicles upon iodination of thyroglobulin conveyed from the endoplasmic reticulum (ER), via the Golgi complex, to the extracellular follicular lumen. In congenital hypothyroidism from biallelic thyroglobulin mutation, thyroglobulin is misfolded and cannot advance from the ER, eliminating its secretion and triggering ER stress. Nevertheless, untreated patients somehow continue to synthesize sufficient thyroxine to yield measurable serum levels that sustain life. Here, we demonstrate that TGW2346R/W2346R humans, TGcog/cog mice, and TGrdw/rdw rats exhibited no detectable ER export of thyroglobulin, accompanied by severe thyroidal ER stress and thyroid cell death. Nevertheless, thyroxine was synthesized, and brief treatment of TGrdw/rdw rats with antithyroid drug was lethal to the animals. When untreated, remarkably, thyroxine was synthesized on the mutant thyroglobulin protein, delivered via dead thyrocytes that decompose within the follicle lumen, where they were iodinated and cannibalized by surrounding live thyrocytes. As the animals continued to grow goiters, circulating thyroxine increased. However, when TGrdw/rdw rats age, they cannot sustain goiter growth that provided the dying cells needed for ongoing thyroxine synthesis, resulting in profound hypothyroidism. These results establish a disease mechanism wherein dead thyrocytes support organismal survival.

Ehlers-Danlos Syndrome: Molecular and Clinical Characterization of TNXA/TNXB Chimeras in Congenital Adrenal Hyperplasia.

CONTEXT: The syndrome CAH-X is due to a contiguous gene deletion of CYP21A2 and TNXB resulting in TNXA/TNXB chimeras. OBJECTIVE: To analyze TNXB gene status and to clinically evaluate the Ehlers-Danlos syndrome phenotype in a large cohort of Argentine congenital adrenal hyperplasia (CAH) patients to assess the prevalence of this condition in our population. METHODS: TNXB gene analysis was performed in 66 nonrelated CAH patients that were carriers of the CYP21A2 gene deletion. A molecular strategy based on multiplex ligation-dependent probe amplification and Sanger sequencing analysis was developed allowing for the detection of different, previously described TNXA/TNXB chimeras, named CH1, CH2, and CH3. The main outcome measures were TNXB status of CAH patients that were carriers of the CYP21A2 deletion in the homozygous or heterozygous state. RESULTS: TNXA/TNXB CH1 was found in 41%, CH2 in 29%, and CH3 in 1% of nonrelated alleles carrying the CYP21A2 deletion. Thus, overall 71% of alleles were found to carry a contiguous gene deletion. Sixty-seven percent of patients analyzed had a monoallelic form and 6% a biallelic form. All patients with the biallelic form had severe skin hyperextensibility and generalized joint hypermobility. CONCLUSION: Based on the high frequency of TNXB alterations found in CYP21A2 deletion carrier alleles, we recommend evaluating TNXB status in these patients, and assessing connective tissue dysplasia, including cardiologic alterations in positive cases. The number of patients undergoing cardiological evaluation should be expanded to determine the incidence of structural and functional abnormalities in this cohort.

Molecular analysis of thyroglobulin mutations found in patients with goiter and hypothyroidism.

Thyroid dyshormonogenesis due to thyroglobulin (TG) gene mutations have an estimated incidence of approximately 1 in 100,000 newborns. The clinical spectrum ranges from euthyroid to mild or severe hypothyroidism. Up to now, one hundred seventeen deleterious mutations in the TG gene have been identified and characterized. The purpose of the present study was to identify and characterize new mutations in the TG gene. We report eight patients from seven unrelated families with goiter, hypothyroidism and low levels of serum TG. All patients underwent clinical, biochemical and image evaluation. Sequencing of DNA, genotyping, as well as bioinformatics analysis were performed. Molecular analyses revealed three novel inactivating TG mutations: c.5560G>T [p.E1835*], c.7084G>C [p.A2343P] and c.7093T>C [p.W2346R], and four previously reported mutations: c.378C>A [p.Y107*], c.886C>T [p.R277*], c.1351C>T [p.R432*] and c.7007G>A [p.R2317Q]. Two patients carried homozygous mutations (p.R277*/p.R277*, p.W2346R/p.W2346R), four were compound heterozygous mutations (p.Y107*/p.R277* (two unrelated patients), p.R432*/p.A2343P, p.Y107*/p.R2317Q) and two siblings from another family had a single p.E1835* mutated allele. Additionally, we include the analysis of 48 patients from 31 unrelated families with TG mutations identified in our present and previous studies. Our observation shows that mutations in both TG alleles were found in 27 families (9 as homozygote and 18 as heterozygote compound), whereas in the remaining four families only one mutated allele was detected. The majority of the detected mutations occur in exons 4, 7, 38 and 40. 28 different mutations were identified, 33 of the 96 TG alleles encoded the change p.R277*. In conclusion, our results confirm the genetic heterogeneity of TG defects and the pathophysiological importance of the predicted TG misfolding and therefore thyroid hormone formation as a consequence of truncated TG proteins and/or missense mutations located within its ACHE-like domain.

Guía de manejo de la Insuficiencia suprarrenal aguda / Acute adrenal insufficiency management guide

Las glándulas suprarrenales son la fuente de secreción de tres clases de hormonas esteroideas: los glucocorticoides, los mineralocorticoides y los andrógenos. La insuficiencia suprarrenal (IS) es la incapacidad de las adrenales para mantener una secreción hormonal adecuada, no sólo en situación basal, sino también durante el estrés. La primera causa es la interrupción de los tratamientos prolongados con glucocorticoide exógenos. La utilización de glucocorticoides, de manera prolongada produce una inhibición del eje hipotálamo hipofisiario adrenal, la cual se mantiene luego de la suspensión del tratamiento por un período aproximado de 1 año. Todos los pacientes deben recibir instrucción sobre el uso de glucocorticoides adicionales a dosis específicas durante situaciones de estrés

Adrenal glands are the main source of three different types of steroid hormones: glucocorticoids, mineralocorticoids and androgens. Adrenal insufficiency is the inability of adrenal glands to maintain adequate hormonal secretion, not only at baseline, but also during stress. The main cause is the interruption of exogenous glucocorticoids chronic treatment. Chronic use of glucocorticoids inhibits hypothalamic pituitary adrenal axis. This inhibition could persist for approximately one year after treatment suspension. Patients should receive instructions for the use of specific doses of glucocorticoids in stressful situations

Steroid 21-hydroxylase gene mutational spectrum in 454 Argentinean patients: genotype-phenotype correlation in a large cohort of patients with congenital adrenal hyperplasia.

OBJECTIVE: To report genotype-phenotype correlation in a large cohort of patients. CONTEXT: Study of the CYP21A2 gene in 866 unrelated chromosomes of 21-hydroxylase deficiency in Argentinean patients with classic and nonclassic (NC) forms of congenital adrenal hyperplasia (CAH). METHODS: Eleven most common mutations were analysed by allele-specific polymerase chain reaction, restriction fragment length polymorphism (RFLP) or southern blot analysis. Gene sequencing was performed when no mutation was detected in one allele or the genotype-phenotype correlation was lacking. RESULTS: The 11-most-common-mutation screening allowed for the detection of 88·1% of affected alleles (80·3% in the NC and 95·2% in the classic forms). p.V281L, IVS2-13A/C>G (In2) and gene deletions and large gene conversions were the most prevalent mutations. In2 (35·2%) in salt wasting (SW), p.I172N (37·3%) in simple virilizing and p.V281L (54·1%) in NC CAH were the most prevalent mutations within the clinical forms. In 7/15 p.P30L mutation alleles, a chimeric CYP21A1P/CYP21A2 gene [PromCYP21A1P; p.P30L] was detected, while 6/15 represented a single-nucleotide substitution, and in 2/15 linkage with mutations, p.[P30L; V281L] and [p.P30L; IVS2-13A/C > G; p.Q318X] was found. In two SW patients, a novel nonsense mutation, p.Q41X, was observed. In three p.V281L mutation patients, the phenotype was more severe than predicted by genotype. Sequence analysis revealed an intronic alteration in the allele carrying the p.V281L mutation [IVS2 + 5G > A; p.V281L]. An aberrant splicing in this p.V281L mutated allele explains the clinical phenotype. CONCLUSIONS: A high percentage of CYP21A2 affected alleles is detected by the 11-mutation screening study. Genotype-phenotype correlation was high, but when the phenotype is more severe than predicted by genotype, presence of two alterations in one allele should be ruled out.

Síndrome de la Silla Turca Vacía con Panhipopituitarismo y diabetes insípida / Syndrome chear empty with panhypopituatarism and insipidus diabetes

Presentamos el caso de una niña de 1 año y 6 meses con baja talla, obesidad, panhipopituitarismo, diabetes insípida y trastornos visuales que en el examen postmortem mostró atrofia cerebral secundaria a una encefalopatía difusa, frecuentes neuronas calcificadas en corteza cerebral, núcleos de la base y, particularmente, en el hipotálamo, nervios ópticos con moderada atrofia, tallo hipofisario filiforme y silla turca vacía con hipófisis en el dorso de la concavidad. Se discute la probable patogenia de los hallazgos anatomopatológicos en el contexto de la literatura pertinente

Síndrome de la Silla Turca Vacía con Panhipopituitarismo y diabetes insípida / Syndrome chear empty with panhypopituatarism and insipidus diabetes

Presentamos el caso de una niña de 1 año y 6 meses con baja talla, obesidad, panhipopituitarismo, diabetes insípida y trastornos visuales que en el examen postmortem mostró atrofia cerebral secundaria a una encefalopatía difusa, frecuentes neuronas calcificadas en corteza cerebral, núcleos de la base y, particularmente, en el hipotálamo, nervios ópticos con moderada atrofia, tallo hipofisario filiforme y silla turca vacía con hipófisis en el dorso de la concavidad. Se discute la probable patogenia de los hallazgos anatomopatológicos en el contexto de la literatura pertinente

Evaluación de la maduración ósea y el crecimiento en niñas con pubertad precoz central tratadas con análogos de la hormona liberadora de gonadotrofinas / Evaluation of bone maturity and growth in girls with central preciocious puberty treated with gonadotropin - releasing hormone analogues

Introducción.El tratamiento con análogos de hormona liberadora de gonadotrofinas(aGnRH)en niñas con pubertad precoz central permite detener la progresión puberal,con discutidos beneficios sobre el crecimiento.Objetivos.Evaluar la maduración ósea y el crecimiento en un grupo de pacientes durante el tratamiento y después de él, y la edad de aparición de la menarca.Población, material y métodos.Se evaluaron 23 niñas tratadas con aGnRH(aceto de tritorelina 75-100 ug/kg intramuscular cada 28 días)Criterios de inclusión:telarca antes de los 8 años,velocidad de crecimiento mayor al percentilo 90,edad ósea acelerada,cociente entre concentraciones máximas de LH y FSH superior a 0,66 resonancia nuclear magnética cerebral normal y un año mas de tratamiento cumplido.Resultados.La talla aumento significativamente desde la primera consulta hasta los 6 meses de tratamiento y hasta los 12 meses disminuyó significativamente.La velocidad de crecimiento disminuyó significativamente entre los 6 y 12 meses de tratamiento.El cociente entre las diferencias de las edades oseas y las edades cronologicas entre el inicio de tratamiento y la primera consulta fue de 1,5(R:0,5-4,4)resultando luego inferior a 1.La edad de la menarca fue de 11,1 años(R:9,9-11,9)con un tiempo medio desde la suspensión de un año(R:0,25-1,9 a)Conclusiones.La progresión de la maduración ósea y la velocidad de crecimiento disminuyeron con el tratamiento.El indice de masa corporal aumentó durante los primeros 6 meses de tratamiento,manteniéndose estable durante el seguimiento

Evaluación de la maduración ósea y el crecimiento en niñas con pubertad precoz central tratadas con análogos de la hormona liberadora de gonadotrofinas / Evaluation of bone maturity and growth in girls with central preciocious puberty treated with gonadotropin - releasing hormone analogues

Introducción.El tratamiento con análogos de hormona liberadora de gonadotrofinas(aGnRH)en niñas con pubertad precoz central permite detener la progresión puberal,con discutidos beneficios sobre el crecimiento.Objetivos.Evaluar la maduración ósea y el crecimiento en un grupo de pacientes durante el tratamiento y después de él, y la edad de aparición de la menarca.Población, material y métodos.Se evaluaron 23 niñas tratadas con aGnRH(aceto de tritorelina 75-100 ug/kg intramuscular cada 28 días)Criterios de inclusión:telarca antes de los 8 años,velocidad de crecimiento mayor al percentilo 90,edad ósea acelerada,cociente entre concentraciones máximas de LH y FSH superior a 0,66 resonancia nuclear magnética cerebral normal y un año mas de tratamiento cumplido.Resultados.La talla aumento significativamente desde la primera consulta hasta los 6 meses de tratamiento y hasta los 12 meses disminuyó significativamente.La velocidad de crecimiento disminuyó significativamente entre los 6 y 12 meses de tratamiento.El cociente entre las diferencias de las edades oseas y las edades cronologicas entre el inicio de tratamiento y la primera consulta fue de 1,5(R:0,5-4,4)resultando luego inferior a 1.La edad de la menarca fue de 11,1 años(R:9,9-11,9)con un tiempo medio desde la suspensión de un año(R:0,25-1,9 a)Conclusiones.La progresión de la maduración ósea y la velocidad de crecimiento disminuyeron con el tratamiento.El indice de masa corporal aumentó durante los primeros 6 meses de tratamiento,manteniéndose estable durante el seguimiento

Crecimiento y dosis de hidrocortisona oral en pacientes con hiperplasia suprarrenal congénita forma perdedora de sal / Growth and oral hydrocortisone dose in patients with salt wasting congenital adrenal hyperplasia

Introducción.La hiperplasia suprarenal congénita por déficit de 21-hidroxilasa en su forma perdedora de sal y su tratamiento pueden comprometer el crecimiento.El objetivo del trabajo fue evaluar el crecimiento de un grupo de pacientes con esta enfermedad y su relación con la dosis de hidrocortisona oral utilizada durante los primeros 5 años de vida.Maerial y métodos,En 14 pacientes controlados en el Hospital de Niños de La Plata se registraron en el momento del diagnóstico y anualmente durante su seguimiento hasta los 5 años de edad,el promedio de desvió estándar deedad cronológica,talla en puntaje de desvió estándar (PDE)y dosis de hidrocortisona oral.Resultados.Entre la consulta del diagnóstico y la del año de vida,el valor medio de la diferencia de talla fue -0,57ñ0,82(P=0,023)y el de la diferencia de dosis fue 14,54 ñ4,56 mg/m al cuadrado/día(p=0,000)La dosis de hidrocortisona utilizada desde el año hasta los 5 años de edad fue en promedio de 17,58 mg/m al cuadrado/día.La talla se mantuvo entre -1,17 PDE al año y-0,66 PDE a los 5 años.Conclusiones:el deterioro de la talla entre el diagnóstico y el primer año de vida concidio con la dosis más alta de hidrocortisona durante el primer año de vida en el tratamiento de esta enfermedad

Crecimiento y dosis de hidrocortisona oral en pacientes con hiperplasia suprarrenal congénita forma perdedora de sal / Growth and oral hydrocortisone dose in patients with salt wasting congenital adrenal hyperplasia

Introducción.La hiperplasia suprarenal congénita por déficit de 21-hidroxilasa en su forma perdedora de sal y su tratamiento pueden comprometer el crecimiento.El objetivo del trabajo fue evaluar el crecimiento de un grupo de pacientes con esta enfermedad y su relación con la dosis de hidrocortisona oral utilizada durante los primeros 5 años de vida.Maerial y métodos,En 14 pacientes controlados en el Hospital de Niños de La Plata se registraron en el momento del diagnóstico y anualmente durante su seguimiento hasta los 5 años de edad,el promedio de desvió estándar deedad cronológica,talla en puntaje de desvió estándar (PDE)y dosis de hidrocortisona oral.Resultados.Entre la consulta del diagnóstico y la del año de vida,el valor medio de la diferencia de talla fue -0,57ñ0,82(P=0,023)y el de la diferencia de dosis fue 14,54 ñ4,56 mg/m al cuadrado/día(p=0,000)La dosis de hidrocortisona utilizada desde el año hasta los 5 años de edad fue en promedio de 17,58 mg/m al cuadrado/día.La talla se mantuvo entre -1,17 PDE al año y-0,66 PDE a los 5 años.Conclusiones:el deterioro de la talla entre el diagnóstico y el primer año de vida concidio con la dosis más alta de hidrocortisona durante el primer año de vida en el tratamiento de esta enfermedad

Telarca precoz: una revisión / Precocious Thelarche: a review

Introducción.La telarca precoz(TP)afección habitualmente benigna,suele ser el primero signo de pubertas precoz verdadera(PP)o de pseudopubertad precoz.Material y métodos.Se revisaron 135 historias clínicas deunilateralidad o bilateralidad,distribución etaria,exposición a estrógenos exógenos,presencia de imágenes quísticas ováricas y evolución.Resultados.El 49 por ciento presentó antecedentes de expocición a estrógenos,fue bilateral en el 72 por ciento,hallándose imágenes quísticas ovárica en 4 de las 24 pacientes evaluadas.Se observó una distribución bimodal de las edades,definiéndose dos grupos de 1,4 años y 6,8 años de edad promedio,respectivamente.En este último se concentró el mayor número de retornos,mientras las niñas menores de un año realizaron una sola consulta.Coincidentemente en el segundo grupo de edad están todos los caso que evolucionaron a PP(9 por ciento)

Telarca precoz: una revisión / Precocious Thelarche: a review

Introducción.La telarca precoz(TP)afección habitualmente benigna,suele ser el primero signo de pubertas precoz verdadera(PP)o de pseudopubertad precoz.Material y métodos.Se revisaron 135 historias clínicas deunilateralidad o bilateralidad,distribución etaria,exposición a estrógenos exógenos,presencia de imágenes quísticas ováricas y evolución.Resultados.El 49 por ciento presentó antecedentes de expocición a estrógenos,fue bilateral en el 72 por ciento,hallándose imágenes quísticas ovárica en 4 de las 24 pacientes evaluadas.Se observó una distribución bimodal de las edades,definiéndose dos grupos de 1,4 años y 6,8 años de edad promedio,respectivamente.En este último se concentró el mayor número de retornos,mientras las niñas menores de un año realizaron una sola consulta.Coincidentemente en el segundo grupo de edad están todos los caso que evolucionaron a PP(9 por ciento)

Indice nutricional pronóstico para situaciones de alto riesgo: su evaluación en cirugía pediátrica / Prognostic nutritional index in high rish situations: its evaluation in pediatric surgery

Se estudiaron 70 pacientes portadores de cardiopatías congénitas mediante diferentes parámetros nutriconales: antropometría, "test" cutáneo de hipersensibilid retardad, conteo de linfocitos, proteínas plasmáticas (prealbúmina, albúmina y transferrina). Se esableció el nivel de asociación de los parámetros nutricionales y la morbimortalidad post-operatoria. La mejor asociación fue demostrada a través del "test" cutáneo de hipersensibilidad retardada

Indice nutricional pronóstico para situaciones de alto riesgo: su evaluación en cirugía pediátrica / Prognostic nutritional index in high rish situations: its evaluation in pediatric surgery

Se estudiaron 70 pacientes portadores de cardiopatías congénitas mediante diferentes parámetros nutriconales: antropometría, "test" cutáneo de hipersensibilid retardad, conteo de linfocitos, proteínas plasmáticas (prealbúmina, albúmina y transferrina). Se esableció el nivel de asociación de los parámetros nutricionales y la morbimortalidad post-operatoria. La mejor asociación fue demostrada a través del "test" cutáneo de hipersensibilidad retardada (AU)