RESUMO
Melanoxylon brauna (Fabaceae - Caesalpinioideae) is an endemic and valuable hardwood tree species in the Brazilian Atlantic rainforest; it is comparable to African ebony wood. We tested three protocols of DNA extraction based on the citrimonium bromide (CTAB) method and evaluated the quantity, purity and integrity of the DNA. We also determined whether these procedures interfere with PCR amplification in order to develop a protocol for M. brauna. We found that the quality and integrity of DNA were improved with the use of proteinase K in the extraction buffer and by modifications in the centrifugation speed. The lowest concentration of DNA was obtained with Doyle and Doyle's protocol (5.42 ng/µL). Ferreira and Grattapaglia's protocol modified for M. brauna provided the most DNA (36.89 ng/µL) and the highest quality DNA (purity ratio of 1.80 nm). The original Ferreira and Grattapaglia protocol provided 13.42 ng/µL DNA; however, the purity ratio (1.44 nm) indicates protein contamination. PCR results showed that Ferreira and Grattapaglia's protocol modified for M. brauna gave satisfactory quantity and purity of DNA for molecular studies.
Assuntos
DNA de Plantas/genética , DNA de Plantas/isolamento & purificação , Fabaceae/genética , Folhas de Planta/genética , Repetições de Microssatélites/genéticaRESUMO
Nucleotide sequence analyses of the SH gene of 18 mumps virus isolates collected in the 2006-2007 parotitis epidemic in the state of São Paulo identified a new genotype, designated genotype M. This new designation fulfills all the parameters required to define a new mumps virus genotype. The parameters were established by an expert panel in collaboration with the World Health Organization (WHO) in 2005. This information will enhance the mumps virus surveillance program both at the national and global levels.
Assuntos
Vírus da Caxumba/classificação , Vírus da Caxumba/genética , Caxumba/virologia , Adolescente , Adulto , Sequência de Aminoácidos , Brasil/epidemiologia , Criança , Pré-Escolar , Feminino , Genótipo , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Dados de Sequência Molecular , Caxumba/epidemiologia , Vírus da Caxumba/isolamento & purificação , RNA Viral/genética , Análise de Sequência de DNA , Proteínas ViraisRESUMO
No presente trabalho foi descrita a comparação da aplicabilidade das metodologias preconizadas na Farmacopéia Brasileira (1988) para a determinação de água em drogas vegetais. Foi realizada, ainda, a validação da determinação de água em analisador de umidade. As matérias-primas vegetais analisadas foram Calendula officinalis L. (calêndula), Foeniculum vulgare Miller (funcho), Maytenus ilicifolia Mart. ex. Reissek (espinheira-santa) e Passiflora alata Curtis (maracujá). A análise dos resultados obtidos mostrou que há diferenças estatisticamente significativas (p < 0,05) entre as metodologias "Determinação de água por destilação azeotrópica" e "Determinação de água em drogas vegetais" em estufa, assim como, entre a "Determinação da perda por dessecação" para as drogas vegetais calêndula e funcho. No entanto, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (p < 0,05) entre as duas metodologias de secagem em estufa. Quanto à validação da determinação de água em analisador de umidade, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (p<0,05) entre os resultados das análises em analisador de umidade e os obtidos através da "Determinação da perda por dessecação". Além disso, não foram verificadas diferenças estatisticamente significativas (p < 0,05) para as análises referentes à repetibilidade, precisão intermediária e reprodutibilidade da técnica, o que comprova a exatidão e a precisão da metodologia proposta.
A comparison of the Brazilian pharmacopeial methodologies for water determination in plant raw materials is presented for the following species: Calendula officinalis, Foeniculum vulgare, Maytenus ilicifolia e Passiflora alata. In addition, the validation of water determination by infrared drying was carried out for these species. The results obtained using the azeotropic distillation method (Brazilian Pharmacopoeia - "Determination of Water by Azeotropic Distillation") were significantly different (p<0.05) than those obtained using two different gravimetric methods (Brazilian Pharmacopoeia - "Determination of Water in Vegetable Drugs" and "Determination of loss on Drying"). However, no significant statistical difference was observed between the two gravimetric methodologies. After optimization of operating conditions, the results of water determination by infrared drying were not significantly different than those obtained using the loss on drying pharmaceutical method. Also, no statistically significant differences were observed for repeatability, intermediate precision and reproducibility of the method, demonstrating the accuracy and precision of the proposed methodology.
