Clinical and microbiological assessment in a subpopulation of young Argentine patients with severe periodontitis.

Aggressive periodontitis (AP) is the most serious entity of periodontal disease (stage III/IV, grade C periodontitis according to the latest classification, 2017). Aim: to enhance knowledge of periodontal microbiota in AP in native Argentine patients and describe the effect of a combined pharmacologicalmechanical periodontal treatment on clinical and microbiological parameters. Materials and Method: The study analyzed 42 periodontal sites in 11 patients diagnosed with AP. Clinical periodontal parameters were recorded at baseline, 45, 90 and 180 days. Microbiological samples were taken before treatment and at 180 days. PCR was used to determine presence of the periodontopathic bacteria Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf), Treponema denticola (Td), Prevotella intermedia (Pi) and Fusobacterium nucleatum (Fn). Patients underwent periodontal therapy including antibiotics (Amoxicillin 500mg + Metronidazole 250mg; 8hs/7 days), and were reevaluated at 45, 90 and 180 days. Results: Mean age was 28.4 ± 7.9 years. The initial PCR detected the following frequencies: Aa 14.3%, Pi 61.9%, Pg 71.4%, Tf 81.0%, Fn 95.2% and Td 97.6%. Baseline microbiological samples revealed significantly higher prevalence of Pg over Aa (p=0.012). Clinical parameters improved significantly after treatment (73.8% PS<5 mm; PS, NIC, SS p<0.001). At 180 days, a significant decrease in microbiological detection rates was observed (Fn, Td, Tf, Pi, Aa p<0.05). Aa was no longer detectable while Pg did not decrease significantly (p=0.052). Fn was the only study species detected in 100% (n=11:42) of residual pockets (PS≥5 mm) (p=0.053). Conclusion: In the initial samples, there was significant prevalence of Pg over Aa. Significant clinical improvement was achieved after the mechanical-pharmacological treatment, with undetectable levels of Aa, while Fn persisted in residual pockets, and Pg was present at most of the treated sites.

La periodontitis agresiva (PA) es la entidad más grave de la enfermedad periodontal (clasificación 2017: periodontitis estadio III/IV, grado C). Objetivo: mejorar el conocimiento sobre la microbiota periodontal de la PA en sujetos nativos argentinos y describir el efecto de un tratamiento mecánicofarmacológico periodontal sobre los parámetros clínicos y microbiológicos. Materiales y Método: se estudiaron 42 sitios periodontales correspondientes a 11 pacientes con PA. Los parámetros clínicos se registraron a 0, 45, 90 y 180 días. Las tomas microbiológicas se realizaron antes de iniciar el tratamiento y a los 180 días. La determinación de especies periodontopáticas (Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf), Treponema denticola (Td), Prevotella intermedia (Pi) y Fusobacterium nucleatum (Fn)) se realizó por PCR. Los pacientes iniciaron terapia básica periodontal junto con antibioticoterapia (Amoxicilina 500 mg + Metronidazol 250 mg; 8 hs/7 días) y fueron evaluados a los 45, 90 y 180 días. Resultados: la edad media fue 28,4 ± 7,9 años. Las detecciones iniciales fueron: Aa 14,3%, Pi 61,9%, Pg 71,4%, Tf 81,0%, Fn 95,2% y Td 97,6%. En las muestras iniciales la prevalencia de Pg sobre Aa fue significativamente superior (p=0,012). Los pacientes tuvieron una respuesta clínica favorable al tratamiento (73,8% PS<5 mm; PS, NIC, SS p<0,001). A 180 días, se observó una disminución estadísticamente significativa en la detección microbiana (Fn, Td, Tf, Pi, Aa p<0,05). En igual plazo, Aa no fue detectado, mientras que Pg mostró una disminución no significativa (p=0,052). Fn fue el único detectado en el 100% (n=11:42) de las bolsas periodontales residuales (PS≥5 mm) (p=0,053). Conclusión: Las muestras iniciales evidenciaron prevalencia significativa de Pg sobre Aa. El tratamiento logró una significativa mejora clínica con niveles indetectables de Aa. La persistencia de Fn en las bolsas residuales y de Pg en la mayoría de los sitios tratados, caracterizaron la muestra poblacional estudiada

Clinical and microbiological assessment in a subpopulation of young Argentine patients with severe periodontitis / Periodontitis severa en jóvenes argentinos. Evaluación clínica y microbiológica en jóvenes argentinos con periodontitis severa

ABSTRACT Aggressive periodontitis (AP) is the most serious entity of periodontal disease (stage III/IV, grade C periodontitis according to the latest classification, 2017). Aim: to enhance knowledge of periodontal microbiota in AP in native Argentine patients and describe the effect of a combined pharmacological-mechanicalperiodontal treatment on clinical and microbiological parameters. Materials andMethod: The study analyzed 42 periodontal sites in 11 patients diagnosed with AP. Clinical periodontal parameters were recorded at baseline, 45, 90 and 180 days. Microbiological samples were taken before treatment and at 180 days. PCR was used to determine presence of the periodontopathic bacteria Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf), Treponema denticola (Td), Prevotella intermedia (Pi) and Fusobacterium nucleatum (Fn). Patients underwent periodontal therapy including antibiotics (Amoxicillin 500mg + Metronidazole 250mg; 8hs/7 days), and were reevaluated at 45, 90 and 180 days. Results: Mean age was 28.4 ± 7.9 years. The initial PCR detected the following frequencies: Aa 14.3%, Pi 61.9%, Pg 71.4%, Tf 81.0%, Fn 95.2% and Td 97.6%. Baseline microbiological samples revealed significantly higher prevalence of Pg over Aa (p=0.012). Clinical parameters improved significantly after treatment (73.8% PS<5 mm; PS, NIC, SS p<0.001). At 180 days, a significant decrease in microbiological detection rates was observed (Fn, Td, Tf, Pi, Aa p<0.05). Aa was no longer detectable while Pg did not decrease significantly (p=0.052). Fn was the only study species detected in 100% (n=11:42) of residual pockets (PS>5 mm) (p=0.053). Conclusion: In the initial samples, there was significant prevalence of Pg over Aa. Significant clinical improvement was achieved after the mechanical-pharmacological treatment, with undetectable levels ofAa, while Fn persisted in residual pockets, and Pg was present at most of the treated sites.

RESUMEN La periodontitis agresiva (PA) es la entidad más grave de la enfermedad periodontal (clasificación 2017: periodontitis estadio III/IV, grado C). Objetivo: mejorar el conocimiento sobre la microbiota periodontal de la PA en sujetos nativos argentinos y describir el efecto de un tratamiento mecánico-farmacológico periodontal sobre los parámetros clínicos y microbiológicos. Materiales y Método: se estudiaron 42 sitios periodontales correspondientes a 11 pacientes con PA. Los parámetros clínicos se registraron a 0, 45, 90 y 180 días. Las tomas microbiológicas se realizaron antes de iniciar el tratamiento y a los 180 días. La determinación de especies periodontopáticas (Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf, Treponema denticola (Td), Prevotella intermedia (Pi) y Fusobacterium nucleatum (Fn)) se realizó por PCR. Los pacientes iniciaron terapia básica periodontal junto con antibioticoterapia (Amoxicilina 500 mg + Metronidazol 250 mg; 8 hs/7 días) y fueron evaluados a los 45, 90 y 180 días. Resultados: la edad media fue 28,4 ± 7,9 años. Las detecciones iniciales fueron: Aa 14,3%, Pi 61,9%, Pg 71,4%, Tf 81,0%, Fn 95,2% y Td 97,6%. En las muestras iniciales la prevalencia de Pg sobre Aa fue significativamente superior (p=0,012). Los pacientes tuvieron una respuesta clínica favorable al tratamiento (73,8% PS<5 mm; PS, NIC, SS p<0,001). A 180 días, se observó una disminución estadísticamente significativa en la detección microbiana (Fn, Td, Tf, Pi, Aa p<0,05). En igual plazo, Aa no fue detectado, mientras que Pg mostró una disminución no significativa (p=0,052). Fn fue el único detectado en el 100% (n=11:42) de las bolsas periodontales residuales (PS>5 mm) (p=0,053). Conclusión: Las muestras iniciales evidenciaron prevalencia significativa de Pg sobre Aa. El tratamiento logró una significativa mejora clínica con niveles indetectables de Aa. La persistencia de Fn en las bolsas residuales y de Pg en la mayoría de los sitios tratados, caracterizaron la muestra poblacional estudiada.

Microbiological study of the subgingival biofilm in HIV+/HAART patients at a specialized dental service / Estudio microbiológico del biofilm subgingival de pacientes VIH+ bajo TARGA en un servicio dental especializado

ABSTRACT The aim of this study was to describe the microbiological profile of HIV patients under highly active antiretroviral treatment (HAART). This crosssectional study comprised 32 HIV patients with periodontal disease (PD) who had been under HAART for more than 6 months. Information about the patients' medical history was obtained from clinical records. Clinical dental examination was performed by a calibrated researcher using standard dental instruments to determine probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), and bleeding on probing (BOP). A total 4,765 periodontal sites were evaluated, 125 of which were also studied microbiologically. Subgingival biofilm samples were obtained using sterile paper points; one set was used for microbiological culture studies and the other for endpoint PCR. Statistical analysis was performed using KruskalWallis and posthoc DunnBonferroni contrast tests. All participants were on HAART at the time of the study, and 90.6% had a viral load below 50 copies/mm3. Prevalence of periodontally active sites was low in the study population. Microbiological studies: Black pigmented anaerobic bacteria and fusiform CFU counts were significantly higher in samples from sites with BOP and PD ≥4mm (p 0.020 and p 0.005, respectively). Molecular Assays: Detection of Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) and Treponema denticola (p 0.015) was significantly more frequent at sites with BOP and PD ≥4mm. Conclusions: The patients living with HIV/AIDS under HAART studied here had low prevalence of clinical periodontal disease signs. However, significant detection of P. gingivalis, T. denticola, and T. forsythia in periodontal active sites, and the involvement of these microorganisms as potential HIV reactivators, show the importance of creating awareness among dental health professionals of the need for close dental and periodontal monitoring in HIV patients.

RESUMEN El objetivo de este estudio fue describir el perfil microbiológico del biofilm subgingival de los pacientes con VIH bajo tratamiento antirretroviral de alta actividad (TARGA). El estudio comprendió a 32 pacientes VIH seropositivos con enfermedad periodontal (EP) que se encontraran en tratamiento con TARGA por más de 6 meses. Los antecedentes médicos de los pacientes se obtuvieron de las historias clínicas. El examen clínico instrumental (profun didad de sondaje (PS), nivel de inserción clínico (NIC) y sangrado al sondaje (SS)) fue realizado con instrumental odontológico estándar por un investigador calibrado. De este modo, se evaluaron un total de 4.765 sitios periodontales de los cuales 125 fueron estudiados microbiológicamente. Las muestras de biope lícula subgingival se obtuvieron empleando conos de papel estéril. Las muestras se emplearon en estudios microbiológicos y moleculares por PCR de punto final. El análisis estadístico se realizó según KruskalWallis y pruebas de contrastes posthoc de DunnBonferroni. El 90,6% de la población en estudio presentó carga viral inferior a 50 copias/mm3. La prevalencia de sitios periodontales activos fue baja (1%). Los recuentos de bacterias anaerobias estrictas pigmentadas de negro y fusiformes fueron significativamente más altos en muestras de sitios periodontales con SS positivo y PS ≥4 mm (p 0.020 y p 0.005). La detección molecular de Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) y Treponema denticola (p 0.015) fue significativamente mayor en los sitios con SS y PS ≥4mm. La prevalencia del 1% de enfermedad periodontal en el grupo de pacientes estudiados fue menor a la esperada, sin embargo; la detección significativa de P. gingivalis, T. denticola y T. forsythia en sitios periodontales activos y su potencial participación como agentes reactivadores del VIH, nos alerta de la importancia de crear conciencia en los profesionales de la salud (médicos y odontólogos) acerca de la necesidad de un monitoreo minucioso del estado periodontal de pacientes con características semejantes a las descriptas en la muestra poblacional estudiada.

Microbiological study of the subgingival biofilm in HIV+/HAART patients at a specialized dental service.

The aim of this study was to describe the microbiological profile of HIV patients under highly active antiretroviral treatment (HAART). This crosssectional study comprised 32 HIV patients with periodontal disease (PD) who had been under HAART for more than 6 months. Information about the patients' medical history was obtained from clinical records. Clinical dental examination was performed by a calibrated researcher using standard dental instruments to determine probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), and bleeding on probing (BOP). A total 4,765 periodontal sites were evaluated, 125 of which were also studied microbiologically. Subgingival biofilm samples were obtained using sterile paper points; one set was used for microbiological culture studies and the other for endpoint PCR. Statistical analysis was performed using KruskalWallis and posthoc DunnBonferroni contrast tests. All participants were on HAART at the time of the study, and 90.6% had a viral load below 50 copies / mm3. Prevalence of periodontally active sites was low in the study population. Microbiological studies: Black pigmented anaerobic bacteria and fusiform CFU counts were significantly higher in samples from sites with BOP and PD ≥4mm (p 0.020 and p 0.005, respectively). Molecular Assays: Detection of Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) and Treponema denticola (p 0.015) was significantly more frequent at sites with BOP and PD ≥4mm. Conclusions: The patients living with HIV/AIDS under HAART studied here had low prevalence of clinical periodontal disease signs. However, significant detection of P. gingivalis, T. denticola, and T. forsythia in periodontal active sites, and the involvement of these microorganisms as potential HIV reactivators, show the importance of creating awareness among dental health professionals of the need for close dental and periodontal monitoring in HIV patients.

El objetivo de este estudio fue describir el perfil microbiológico del biofilm subgingival de los pacientes con VIH bajo tratamiento antirretroviral de alta actividad (TARGA). El estudio comprendió a 32 pacientes VIH seropositivos con enfermedad periodontal (EP) que se encontraran en tratamiento con TARGA por más de 6 meses. Los antecedentes médicos de los pacientes se obtuvieron de las historias clínicas. El examen clínico instrumental (profun didad de sondaje (PS), nivel de inserción clínico (NIC) y sangrado al sondaje (SS)) fue realizado con instrumental odontológico estándar por un investigador calibrado. De este modo, se evaluaron un total de 4.765 sitios periodontales de los cuales 125 fueron estudiados microbiológicamente. Las muestras de biope lícula subgingival se obtuvieron empleando conos de papel estéril. Las muestras se emplearon en estudios microbiológicos y moleculares por PCR de punto final. El análisis estadístico se realizó según KruskalWallis y pruebas de contrastes posthoc de DunnBonferroni. El 90,6% de la población en estudio presentó carga viral inferior a 50 copias/mm3. La prevalencia de sitios periodontales activos fue baja (1%). Los recuentos de bacterias anaerobias estrictas pigmentadas de negro y fusiformes fueron significativamente más altos en muestras de sitios periodontales con SS positivo y PS ≥4 mm (p 0.020 y p 0.005). La detección molecular de Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) y Treponema denticola (p 0.015) fue significativamente mayor en los sitios con SS y PS ≥4mm. La prevalencia del 1% de enfermedad periodontal en el grupo de pacientes estudiados fue menor a la esperada, sin embargo; la detección significativa de P. gingivalis, T. denticola y T. forsythia en sitios periodontales activos y su potencial participación como agentes reactivadores del VIH, nos alerta de la importancia de crear conciencia en los profesionales de la salud (médicos y odontólogos) acerca de la necesidad de un monitoreo minucioso del estado periodontal de pacientes con características semejantes a las descriptas en la muestra poblacional estudiada.

Endodontic microorganism susceptibility by direct contact test.

The aim of this study was to evaluate in vitro the duration of the antimicrobial effect of endodontic sealers by means of the Direct Contact Test. The sealers tested were: Endomethasone - Septodont, Endomethasone C-Septodont, Endion-Voco, Diaket-ESPE, Pulp Canal Sealer-SybronEndo, and AH26-Dentsply DeTrey. The endodontopathic microorganisms (MO) confronted were: Staphylococcus aureus (Sa), Candida albicans (Ca), Enterococcus faecalis (Ef), Prevotella intermedia (Pi), Porphyromonas gingivalis (Pg) and Fusobacterium nucleatum (Fn). Test specimens of each sealer were prepared and placed on the surface of agar plates that had been inoculated with each MO, and after predetermined periods, transfers were made from the contact area between the test specimen and the cultured agar and from the area that had not been in contact with the test specimens (control). The results were read as presence/absence of microbial growth and analyzed statistically using the Kruskal-Wallis test. It was concluded that the structural features and virulence of endodontopathic microorganisms determine their response to the sealers, independently of the time during which sealers act and the mechanism by which the antiseptic reaches the microorganism, which in this case was by direct contact.

Antimicrobial effect in vitro of chlorhexidine and calcium hydroxide impregnated gutta-percha points.

UNLABELLED: The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of points containing antiseptics used for temporary obturation in endodontics. Points containing calcium hydroxide (Roeko and Hygienic), and chlorhexidine (Roeko) were tested and gutta-percha points served as control (Meta Dental Corp.). The following microorganisms were studied: Streptococcus mutans (Sm), Enterococcus faecalis (Ef), Staphylococcus aureus (Sta), Candida albicans (Ca), Fusobacterium nucleatum (Fn) ATCC 25586, Porphyromonas gingivalis (Pg) ATCC 33277, and Prevotella intermedia (Pi) ATCC 25611. The experiments were organized in three stages: 1st stage: one point of each kind was placed on agar plates previously seeded with microorganisms. 2nd stage: Another group of points was immersed in broth for 24 hours and placed on the seeded agar. Samples were then incubated at 37 degrees in the conditions of oxygen and for the time required by each microorganism. The zones of bacterial inhibition around each point were measured. The pH values of the broths were recorded. 3rd stage: the immersion broths were inoculated with suspensions of microorganisms, incubated, seeded on plates by dissemination and incubated. CFU counts were performed. RESULTS: points containing chlorhexidine showed inhibition zones with every microorganism in the 1st stage and, in the 2nd stage, with most of the microorganisms studied, except for Fn and Pi. Calcium hydroxide containing points did not inhibit any of the microorganisms assessed. Broth pH values did not exhibit any changes. CFU counts of the broths in which chlorhexidine points had been immersed showed total inhibition for all the microorganisms. The differences between materials were statistically significant (p<0.05) (ANOVA). In the conditions of this study, chlorhexidine-containing points proved to be effective against most of the tested strains.

Antimicrobial effect in vitro of chlorhexidine and calcium hydroxide impregnated gutta-percha points

El objetivo de este trabajo fue evaluar "in vitro" la actividad antimicrobiana de conos antisépticos para obturación temporaria frente a microorganismos endodontopáticos. Fueron empleados conos con hidróxido de calcio (Roeko(R) e Hygienic (H)) con clorhexidina (Roeko) y conos de gutapercha como testigos. Los microorganismos estudiados fueron Streptococcus mutans (Sm), Enterococcus faecalis (Ef), Staphylococcus aureus Sta), Candida albicans (Ca) (ATCC 3153), Fusobacterium nucleatum (Fn)(ATCC 25586), Porphyromonas gingivalis (Pg)(ATCC 33277) y Prevotella intermedia (Pi)(ATCC 25611). La experiencia se dividió en tres etapas: 1º etapa: un cono de cada tipo se colocó sobre la superficie de placas de agar previamente sembradas con una suspensión homologada de cada microorganismo. 2º etapa: un cono de cada tipo fue sumergido prevo a su utilización en 2 ml de caldo durante 24 horas. Luego, se retiraron los conos y se los depositó sobre placas de agar previamente sembradas igual que en la 1º etapa. Todas las placas fueron incubadas de acuerdo a los requerimientos de oxígeno y tiempo de cada microorganismo. Los resultados se registraron a través de la extensión de los halos de inhibición microbiana observada. Se midió el pH de los caldos con tiras indicadoras de pH (Merck) rango 0-14, previo a la inmersión de los conos y después de retirarlos. 3º etapa: los caldos que contuvieron los conos se inocularon en suspensiones de los microorganismos en estudio, transcurrido el tiempo de incubación, 20 ul de los caldos se sembraron en cajas de Petri, se incubaron y se realizó el recuento de unidades formadoras de colonias (UFC). Resultados: los conos con clorhexidina presentaron halos de inhibición en la 1º etapa con todos los microorganismos probados y en la 2º etapa con Sm, Ef, Ca, Sta y Pg. Los conos con hidróxido de calcio, tanto Hygienic como Roeko, no produjeron halos de inhibición con ninguna de las cepas probadas. El pH de los caldos no se modificó. En el recuento de UFC los conos con clorhexidina produjeron inhibición total para todas las cepas. Se encontró efecto significativo para material (p<0.05)(ANOVA). Puede concluirse que bajo las condiciones del presente estudio, los conos que contienen clorhexidina son los más efectivos sobre los microorganismos probados

Antimicrobial effect in vitro of chlorhexidine and calcium hydroxide impregnated gutta-percha points

El objetivo de este trabajo fue evaluar "in vitro" la actividad antimicrobiana de conos antisépticos para obturación temporaria frente a microorganismos endodontopáticos. Fueron empleados conos con hidróxido de calcio (Roeko(R) e Hygienic (H)) con clorhexidina (Roeko) y conos de gutapercha como testigos. Los microorganismos estudiados fueron Streptococcus mutans (Sm), Enterococcus faecalis (Ef), Staphylococcus aureus Sta), Candida albicans (Ca) (ATCC 3153), Fusobacterium nucleatum (Fn)(ATCC 25586), Porphyromonas gingivalis (Pg)(ATCC 33277) y Prevotella intermedia (Pi)(ATCC 25611). La experiencia se dividió en tres etapas: 1º etapa: un cono de cada tipo se colocó sobre la superficie de placas de agar previamente sembradas con una suspensión homologada de cada microorganismo. 2º etapa: un cono de cada tipo fue sumergido prevo a su utilización en 2 ml de caldo durante 24 horas.

Antimicrobial effect in vitro of chlorhexidine and calcium hydroxide impregnated gutta-percha points.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of points containing antiseptics used for temporary obturation in endodontics. Points containing calcium hydroxide (Roeko and Hygienic), and chlorhexidine (Roeko) were tested and gutta-percha points served as control (Meta Dental Corp.). The following microorganisms were studied: Streptococcus mutans (Sm), Enterococcus faecalis (Ef), Staphylococcus aureus (Sta), Candida albicans (Ca), Fusobacterium nucleatum (Fn) ATCC 25586, Porphyromonas gingivalis (Pg) ATCC 33277, and Prevotella intermedia (Pi) ATCC 25611. The experiments were organized in three stages: 1st stage: one point of each kind was placed on agar plates previously seeded with microorganisms. 2nd stage: Another group of points was immersed in broth for 24 hours and placed on the seeded agar. Samples were then incubated at 37 degrees in the conditions of oxygen and for the time required by each microorganism. The zones of bacterial inhibition around each point were measured. The pH values of the broths were recorded. 3rd stage: the immersion broths were inoculated with suspensions of microorganisms, incubated, seeded on plates by dissemination and incubated. CFU counts were performed. RESULTS: points containing chlorhexidine showed inhibition zones with every microorganism in the 1st stage and, in the 2nd stage, with most of the microorganisms studied, except for Fn and Pi. Calcium hydroxide containing points did not inhibit any of the microorganisms assessed. Broth pH values did not exhibit any changes. CFU counts of the broths in which chlorhexidine points had been immersed showed total inhibition for all the microorganisms. The differences between materials were statistically significant (p<0.05) (ANOVA). In the conditions of this study, chlorhexidine-containing points proved to be effective against most of the tested strains.