Detection and molecular characterization of chicken astrovirus associated with chicks that have an unusual condition known as "white chicks" in Brazil.

Chicken astrovirus (CAstV) is one of many viruses related to enteric diseases in poultry that are associated with Runting-Stunting Syndrome (RSS), which affects young chickens. CAstV was also recently associated with an unusual condition in chicks called "white chicks." Some hatcheries in certain states of Brazil have reported several incubation problems, mortality, and the presence of chicks with white plumages over the past several months. These chicks were termed locally as "white chicks." The present work investigated 30 chicks with this unusual condition using a multidisciplinary approach. Postmortem examination of each chick showed enlarged livers and intestines that were full of liquid and gas (30/30). The pancreas, kidneys, and spleen were pale (30/30). The other organs did not show any macroscopic alterations. CAstV, chicken parvovirus (ChPV), avian nephritis virus (ANV), avian rotavirus (ARtV), avian reovirus (AReoV), infectious bronchitis virus (IBV), and fowl adenovirus group I (FAdV-1) were tested in the intestines, pancreas, proventriculus, gizzard, liver, spleen, bursa, kidneys, thymus, lung, heart, brain, and yolk sac in each chick. All organs and yolk sacs were positive for CAstV in different titres and negative for the other tested viruses. The partial molecular characterization of the ORF 1b gene of CAstV using 28 sequences revealed a high similarity of the nucleotides and amino acids with sequences of CAstV from North America, Europe, and Asia, and our CAstV sequences clustered into a unique group that was separate from the other sequences. These results demonstrated that CAstV was associated with the white chick condition in Brazil. The virus was distributed in most organs, including the brain and yolk sac. These results suggest that the virus could be transmitted vertically. The molecular characterization also revealed that the CAstV associated with white chick condition was molecularly related to other CAstV sequences found worldwide.

Prognostic Value of ADAMTS Proteases and Their Substrates in Epithelial Ovarian Cancer

Background: ADAMTS are metalloproteases with disintegrin and thrombospondin motifs. They are secreted proteases playing a role in biological processes such as inflammation, angiogenesis, and urogenital development. ADAMTS have specific substrates, such as the proteoglycans (PG) versican, aggrecan, and brevican. Despite data indicating a role of ADAMTS in tumor invasion and metastases, effects played by these molecules in cancer progression are still controversial. In ovarian cancer, the importance of ADAMTS gene mutations was recently described and related to chemotherapy outcome. Objective: To analyze protein levels of ADAMTS-1, -4, and -5, and TIMP-3 in human ovarian cancer classified as benign, borderline, or malignant. We also assessed the expression of the ADAMTS substrates aggrecan, brevican, and versican in these neoplasms. Correlations between overall survival and protein expression were performed. Methods: Tumors were classified according to the WHO Classification of Tumors of Female Reproductive Organs. Protein and PG expression was studied by immunohistochemistry. Differences in labeling were analyzed by percent measurements of stained areas. Results: ADAMTS-1, ADAMTS-5, and its tissue inhibitor TIMP-3 are increased in borderline and malignant tumors compared to benign neoplasms. Aggrecan and versican levels were increased in malignant subtypes compared to benign ovarian cancer. Higher ADAMTS-1, TIMP-3, and versican expression was associated with a shorter overall survival. Conclusions: Comparison of protease, TIMP-3, and substrate expression showed that in malignant tumors all ADAMTS and TIMP-3 expression levels were significantly raised compared to the substrates studied.

SEROLOGICAL RESPONSE OF COMMERCIAL LAYING HENS TO Mycoplasma gallisepticum IN POULTRY FARMS IN SÃO PAULO STATE / Reações sorológicas contra Mycoplasma gallisepticum em aves de postura de granjas comerciais no Estado de São Paulo.

Avaliaram-se reações sorológicas contra Mycoplasma gallisepticum em aves de postura comercial no Bolsão de Bastos e no Município de Guatapará, Estado de São Paulo, no período junho-julho/2009, utilizando a soroaglutinação rápida (SAR) como triagem e o ELISA como teste confirmatório. No Bolsão de Bastos, na SAR observou-se sororreatividade total de 88,2% (566/642), sendo para aves não vacinadas contra M. gallisepticum 85,5% (196/229) e vacinadas 89,5% (370/413), e pelo ELISA, reatividade total 89,8% (577/642), para aves não vacinadas 97,40% (233/229) e aves vacinadas 85,7% (354/413). Em Guatapará, todas as granjas amostradas utilizavam vacinação (cepa ts-11); a proporção de reagentes na SAR foi 76,5% (108/141) e no ELISA 97,20% (137/141). No Bolsão de Bastos, onde as aves não vacinadas apresentaram elevados índices de sororreatividade simultaneamente na SAR e no ELISA, 84,30% (193/229), não foram observados casos clínicos da infecção, fato que pode ser atribuído à difusão de cepas vacinais vivas (F ou ts-11), que possuem baixa patogenicidade e imunizam as

SEROLOGICAL RESPONSE OF COMMERCIAL LAYING HENS TO Mycoplasma gallisepticum IN POULTRY FARMS IN SÃO PAULO STATE / Reações sorológicas contra Mycoplasma gallisepticum em aves de postura de granjas comerciais no Estado de São Paulo.

Avaliaram-se reações sorológicas contra Mycoplasma gallisepticum em aves de postura comercial no Bolsão de Bastos e no Município de Guatapará, Estado de São Paulo, no período junho-julho/2009, utilizando a soroaglutinação rápida (SAR) como triagem e o ELISA como teste confirmatório. No Bolsão de Bastos, na SAR observou-se sororreatividade total de 88,2% (566/642), sendo para aves não vacinadas contra M. gallisepticum 85,5% (196/229) e vacinadas 89,5% (370/413), e pelo ELISA, reatividade total 89,8% (577/642), para aves não vacinadas 97,40% (233/229) e aves vacinadas 85,7% (354/413). Em Guatapará, todas as granjas amostradas utilizavam vacinação (cepa ts-11); a proporção de reagentes na SAR foi 76,5% (108/141) e no ELISA 97,20% (137/141). No Bolsão de Bastos, onde as aves não vacinadas apresentaram elevados índices de sororreatividade simultaneamente na SAR e no ELISA, 84,30% (193/229), não foram observados casos clínicos da infecção, fato que pode ser atribuído à difusão de cepas vacinais vivas (F ou ts-11), que possuem baixa patogenicidade e imunizam as

SEROLOGICAL RESPONSE OF COMMERCIAL LAYING HENS TO Mycoplasma gallisepticum IN POULTRY FARMS IN SÃO PAULO STATE / Reações sorológicas contra Mycoplasma gallisepticum em aves de postura de granjas comerciais no Estado de São Paulo

Avaliaram-se reações sorológicas contra Mycoplasma gallisepticum em aves de postura comercial no Bolsão de Bastos e no Município de Guatapará, Estado de São Paulo, no período junho-julho/2009, utilizando a soroaglutinação rápida (SAR) como triagem e o ELISA como teste confirmatório. No Bolsão de Bastos, na SAR observou-se sororreatividade total de 88,2% (566/642), sendo para aves não vacinadas contra M. gallisepticum 85,5% (196/229) e vacinadas 89,5% (370/413), e pelo ELISA, reatividade total 89,8% (577/642), para aves não vacinadas 97,40% (233/229) e aves vacinadas 85,7% (354/413). Em Guatapará, todas as granjas amostradas utilizavam vacinação (cepa ts-11); a proporção de reagentes na SAR foi 76,5% (108/141) e no ELISA 97,20% (137/141). No Bolsão de Bastos, onde as aves não vacinadas apresentaram elevados índices de sororreatividade simultaneamente na SAR e no ELISA, 84,30% (193/229), não foram observados casos clínicos da infecção, fato que pode ser atribuído à difusão de cepas vacinais vivas (F ou ts-11), que possuem baixa patogenicidade e imunizam as

Índice de patogenicidade, produção de hemolisina e sorogrupo de amostras de Escherichia coli isoladas de aves de postura comercial / Pathogenicity index, production of hemolysin and serogroup of samples of Escherichia coli isolated from commercial laying hens

Este estudo avaliou o índice de patogenicidade, a produção de hemolisina e a determinação de sorogrupos de cepas deEscherichia coli isoladas de fígado de aves de postura comercial com um dia de idade. Para este estudo, foram analisados 32 lotes, dos quais 15 foram positivos para o isolamento de E. coli no fígado, totalizando vinte e quatro amostras. A patogenicidade dos isolados foi determinada por inoculação no saco aéreo de pintinhos e classificada como alta, intermediária, baixa ou não-patogênica. Os sorogrupos foram identificados utilizando um conjunto de antissoros anti-O (O1 a O180). A produção de hemolisina foi determinada por semeadura em ágar sangue de galinha (8%) e em placas de ágar sangue de carneiro (8%). Do total de amostras estudadas, 17 (70,83%) foram classificadas como não patogênica, 6 (25%) como de baixa patogenicidade e 1 (4,17%) de alta patogenicidade. Foram identificados 14 sorogrupos diferentes: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132, O141. Cinco cepas não tiveram o sorogrupo identificado. Com relação ao teste de produção de hemolisina, todas as cepas foram consideradas negativas, tanto para o teste realizado com ágar sangue de galinha quanto para o de carneiro. Os resultados obtidos neste estudo demonstram a importância de se identificar as cepas prevalentes deE. colinas diferentes regiões produtoras, podendo ser utilizados em estudos epidemiológicos.

This work evaluated the index of pathogenicity, the production of hemolysin and determination of serogroups in Escherichia coli strains isolated from liver of commercial laying hens with one day of age. Thirtytwo lots were analyzed, of which 15 were positive for the isolation ofE. coli in the liver, for a total of 24 samples. The pathogenicity in one-day-old chicks was determined by inoculation in air sac and was classified as high, intermediate or low pathogenicity, or non-pathogenic. Serogroups were identified using a set of anti-O antisera (O1 to O180). The production of hemolysin was determined by plating on chicken blood agar (8%) and sheep blood agar (8%). Of the samples studied, 17 (70.83%) were classified as non-pathogenic, 6 (25%) as low pathogenicity and 1 (4.17%) as high pathogenicity. Fourteen different serogroups were identified: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132 and O141, while 5 samples were non-typable. Regarding the test for production of hemolysin, all strains were considered negative for both the test performed with chicken blood agar and that with sheep blood agar. The results of this study demonstrate the importance of identifying the prevalent strains of E. coli in different producing regions, as this information can be used in epidemiological studies.

ÍNDICE DE PATOGENICIDADE, PRODUÇÃO DE HEMOLISINA E SOROGRUPO DE AMOSTRAS DE ESCHERICHIA COLI ISOLADAS DE AVES DE POSTURA COMERCIAL

ABSTRACT This work evaluated the index of pathogenicity, the production of hemolysin and determination of serogroups in Escherichia coli strains isolated from liver of commercial laying hens with one day of age. Thirtytwo lots were analyzed, of which 15 were positive for the isolation ofE. coli in the liver, for a total of 24 samples. The pathogenicity in one-day-old chicks was determined by inoculation in air sac and was classified as high, intermediate or low pathogenicity, or non-pathogenic. Serogroups were identified using a set of anti-O antisera (O1 to O180). The production of hemolysin was determined by plating on chicken blood agar (8%) and sheep blood agar (8%). Of the samples studied, 17 (70.83%) were classified as non-pathogenic, 6 (25%) as low pathogenicity and 1 (4.17%) as high pathogenicity. Fourteen different serogroups were identified: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132 and O141, while 5 samples were non-typable. Regarding the test for production of hemolysin, all strains were considered negative for both the test performed with chicken blood agar and that with sheep blood agar. The results of this study demonstrate the importance of identifying the prevalent strains of E. coli in different producing regions, as this information can be used in epidemiological studies.

RESUMO Este estudo avaliou o índice de patogenicidade, a produção de hemolisina e a determinação de sorogrupos de cepas deEscherichia coli isoladas de fígado de aves de postura comercial com um dia de idade. Para este estudo, foram analisados 32 lotes, dos quais 15 foram positivos para o isolamento de E. coli no fígado, totalizando vinte e quatro amostras. A patogenicidade dos isolados foi determinada por inoculação no saco aéreo de pintinhos e classificada como alta, intermediária, baixa ou não-patogênica. Os sorogrupos foram identificados utilizando um conjunto de antissoros anti-O (O1 a O180). A produção de hemolisina foi determinada por semeadura em ágar sangue de galinha (8%) e em placas de ágar sangue de carneiro (8%). Do total de amostras estudadas, 17 (70,83%) foram classificadas como não patogênica, 6 (25%) como de baixa patogenicidade e 1 (4,17%) de alta patogenicidade. Foram identificados 14 sorogrupos diferentes: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132, O141. Cinco cepas não tiveram o sorogrupo identificado. Com relação ao teste de produção de hemolisina, todas as cepas foram consideradas negativas, tanto para o teste realizado com ágar sangue de galinha quanto para o de carneiro. Os resultados obtidos neste estudo demonstram a importância de se identificar as cepas prevalentes deE. colinas diferentes regiões produtoras, podendo ser utilizados em estudos epidemiológicos.

Desempenho de poedeiras comerciais consumindo água filtrada

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate filtered water for the intake of laying hens. One hundred commercial laying hens with 30 weeks of age were housed in cages with nipple drinkers for 63 days divided in 3 cycles of 21 days each. This study was analyzed as a completely randomized design with 2 treatments: unfiltered water supply and filtered water supply and 10 replicates of 5 hens per pen. Data were taken on the performance percentage of egg production, feed intake and feed gain ratio (kg/kg and kg/dozen), bacteriological analyses of fecal and total coliform in the water, egg quality specific gravity, egg weight, egg mass and eggshell percentage. These data were submitted to analyses of variance and F Test at 5% of significance. The hens fed filtered water showed higher egg percentage, greater number of eggs per hen, higher egg mass and better feed-gain ratio The egg quality was not influenced by the treatments. The analyses showed that the water supplied by the purification system improved the bacteriological quality of the water used to feed the hens.

RESUMO Com o objetivo de avaliar o efeito do fornecimento de água filtrada na dessedentação de aves, foram utilizadas cem poedeiras comerciais brancas com 30 semanas de idade alojadas em gaiolas equipadas com bebedouros tipo nipple, divididos em três ciclos de 21 dias cada. O delineamento experimental inteiramente casualizado foi constituído por dois tratamentos com fornecimento de água não filtrada e água filtrada e dez repetições de cinco aves por parcela. Foram coletados dados para avaliação do desempenho tais como: porcentagem de postura, consumo de ração e conversão alimentar e para análise bacteriológica: coliformes fecal e total. Para avaliar a qualidade de ovos foram feitas as seguintes análises: gravidade específica, peso médio dos ovos, massa de ovos e porcentagem de casca. Os dados obtidos foram submetidos à analise de variância e teste F a 5% de significância. As aves que receberam água filtrada apresentaram maior percentagem de postura, maior número de ovos por ave alojada, maior massa de ovo e melhor conversão alimentar. A qualidade dos ovos não foi influenciada pelos tratamentos, no entanto, as análises realizadas constataram que a purificação da água pelo sistema de filtração melhorou a qualidade bacteriológica da água utilizada na dessedentação das aves.

Molecular characterization of MG isolates using RAPD and PFGE isolated from chickens in Brazil.

In the present study, 27 primers were screened under different cycles by random amplified polymorphic DNA (RAPD) method. Mathematical models were used for analysis of the genetic relationships among strains, including vaccinal, reference strains and nine field isolates previously characterized as Mycoplasma gallisepticum (MG)F by RAPD and pulsed field gel electrophoresis (PFGE). The PFGE was considered as laborious, expensive and time-consuming than RAPD method. These methods improved the typeability for epidemiological studies of MG with regard to differentiation from vaccinal and field strains.

Immunohistochemistry of fumonisin in poultry using avidin-biotin-peroxidase system.

Using monoclonal anti-fumonisin B1 antibody (anti-FB1) and avidin-biotin-peroxidase system, liver and kidneys of broiler chicks were evaluated for the detection and distribution of fumonisins (FBs). One hundred and fifty micrograms of FB1 or culture extract of Fusarium moniliforme str. 113F containing 150 microg of FB1 and 4 microg of FB2 were administered into the vitelline sac of 1-day old, specific pathogen-free chicks. The animals were killed 24 h after injection, and renal and hepatic tissues submitted for immunohistochemical analysis. FBs were detected in the epithelial cells of convoluted distal and proximal tubules of the kidneys, as well as in the cytoplasm of hepatocytes. This novel immunohistochemical method developed is expected to be an efficient way for monitoring the target of the FB toxins in tissues.