Produção de escleródios de Sclerotinia sclerotiorum (LIB) de Bary em meio de cultura / Production of sclerotia on Sclerotinia sclerotiorum (LIB) de Bary in culture media

Os escleródios são fundamentais no ciclo de vida de Sclerotinia sclerotiorum, pois são precursores de hifas e de apotécios e, conseqüentemente dos ascósporos. A produção de escleródios, em condições de laboratório, é necessária para realização de trabalhos envolvendo este patógeno. Desta forma, foram conduzidos dois experimentos, um com o objetivo de avaliar meios de cultura à base de vegetais, e o outro, o efeito de concentrações de fubá de milho, farinha de mandioca e trigo moído, adicionadas ao meio de cultura contendo grãos de "feijão", no rendimento e o número de escleródios produzidos. No primeiro experimento, os vegetais utilizados para compor os meios de cultura foram raízes de cenoura e batata doce, folhas de repolho, grãos de soja, girassol e feijão, inflorescências de couve-flor, frutos de tomate, vagem e abóbora e tubérculos de batata, com e sem adição de fubá de milho. Quanto ao segundo experimento foram estudadas as concentrações de 0, 5, 20, 35, 50, 65, 85 e 100% de fubá de milho, farinha de mandioca e trigo moído, adicionadas separadamente ao meio de cultura com presença de grãos de feijão. Após autoclavagem dos meios de cultura, 5 discos de micélio foram depositados sobre no meio de cultura, contido em frasco de Erlenmeyer. Os frascos foram armazenados a 22 ± 3ºC e fotoperíodo de 12 horas, durante 30 dias consecutivos (primeiro experimento) e 45 dias (segundo experimento). Verificou-se que meios de cultura com fubá de milho foram os mais promissores, sendo os meios de cultura contendo grãos de "feijão" e "girassol" os que mais se destacaram no rendimento e no número de escleródios produzidos. O meio de cultura contendo grãos de feijão e complementados com fubá de milho e trigo moído, na concentração de 20%, foram os melhores na produção de escleródios.

The sclerotias are fundamental in the life cycle of Sclerotinia sclerotiorum because they are the precursor of hyphae and apotecia and, consequently, ascospores. The sclerotias production, in the laboratory, is required for studies involving this pathogen. Thus, two experiments were done, one of them was to evaluate diferents vegetables based culture media, and the another one was to evaluate the effect on cornmeal, tapioca meal and wheat meal concentrations added to common beans seeds culture medium, on the profit and the number of sclerotias production. The vegetables used in the first experiment were: carrot and sweet potato roots, leaves of cabbage, seeds of soybean, sunflower and common beans, blooms of cauliflower, fruit of tomatoes, pumpkin, snap beans and tubers potatoes, with or without the addition of cornmeal. In the second experiment evaluated the concentrations of 0, 5, 20, 35, 50, 65, 85 or 100% cornmeal, tapioca meal or wheat meal, added individually to a medium containing beans. Five mycelium disks were added to each medium in Erlenmeyer flasks after autoclaving. The flasks were incubated at 22 ± 3ºC and 12 hours lighting, for 30 days (first experiment) or 45 days (second experiment). The media containing cornmeal were the most promising ones, and those containing beans seeds and sunflower seeds the ones presenting the best yield and number of sclerotias. The media containing beans, supplemented with cornmeal or ground wheat, at the concentration 20% were the best for sclerotias production.

Atividade antifúngica de óleo e extratos vegetais sobre Sclerotinia sclerotiorum / Antifungal activity of vegetable oils and extracts against Sclerotinia sclerotiorum

Considerando a importância do mofo branco, causado pelo patógeno Sclerotinia sclerotiorum na cultura da soja (Glycine max) e a falta de estudos sobre alternativas de controle deste patógeno, este trabalho teve como objetivo estudar o efeito de óleos e extratos vegetais sobre o crescimento micelial de S. sclerotiorum. No experimento de óleos essenciais, concentrações de 25, 50, 75 e 100 µg de i.a mL-1 de azadiractina, obtida de nim indiano (Azadirachta indica A. Juss), foram estudadas em associação às doses de 0, 1/3, 1/6, 1/8 e 1/10 do óleo de Karanja (Pongamia glabra). Quanto ao experimento de extratos vegetais, estudou-se as espécies Aroeirinha (Schinus molle L.), Mentrasto (Ageratum conyzoides L.), Alfavaca (Ocimum gratissimum L.), Losna (Artemisia absinthium L.), Jambolão (Syzygium cumini (L.) Skeels), Arruda (Ruta graveolens L.), Mandioca (Manihot esculenta Crantz), Santa Bárbara (Melia azedarach L.) e Pimenta longa (Piper aduncum L.) na concentração de 30%. Óleos e extratos vegetais foram incorporados, separadamente, ao meio de cultura BDA e vertido em placa de Petri de 9 cm de diâmetro, na qual depositou-se um disco de BDA, contendo micélio do fungo. As placas foram incubadas à temperatura de 22 ± 3 oC e fotoperíodo de 12 horas. As avaliações consistiram em medições diárias do diâmetro da colônia, durante 48 horas. A maior inibição do crescimento micelial foi diretamente proporcional ao aumento das concentrações dos óleos de nim indiano e de Karanja. A concentração de azadiractina, correspondente a 100 µg de i.a mL-1 com 1/3 de óleo de Karanja foi a mais eficiente na redução do crescimento micelial, com 63% de inibição. Em relação aos extratos vegetais, o fruto de pimenta longa foi o mais promissor sobre a redução do crescimento micelial, com 43% de inibição.

Considering the importance of white mold, caused by the pathogen Sclerotinia sclerotiorum, to soybeans (Glycine max) and the lack of studies about alternative control ways of plant pathogens, this study evaluated the effect of vegetable oils and extracts on the mycelial growth of S. sclerotiorum. Concentrations of 25, 50, 75 and 100 µg a.i. mL-1 of azadiractine, obtained from neem (Azadirachta indica A. Juss), were evaluated associated with the doses of 0, 1/3, 1/6, 1/8 or 1/10 of Karanja (Pongamia glabra) oil in the experiment with essential oils. Vegetable extracts of the species Schinus molle L., Ageratum conyzoides L., Ocimum gratissimum L., Artemisia absinthium L., Syzygium cumini (L.) Skeels, Ruta graveolens L., Manihot esculenta Crantz, Melia azedarach L. and Piper aduncum L. were evaluated in the concentration of 30%. Oils and vegetable extracts were incorporated, separately, into PDA culture medium and poured in 9-cm diameter petri plates, over which a PDA disk containing mycelium of the fungus was placed. The plates were incubated at 22 ± 3 oC and 12 hours lighting. The evaluations consisted of daily measurements of colony diameter for two days. The greatest mycelial growth inhibition was directly proportional to the concentration increase of neem and Karanja oils. Azadiractin concentration corresponding to 100 µg a.i. mL-1 with 1/3 Karanja oil was the most effective on reducing mycelial growth, with 63% inhibition. Among the vegetable extracts, fruits of long pepper were the most promising for reducing mycelial growth, with 43% inhibition.