RESUMO
Azidothymidine (AZT) is an antiretroviral drug that affects cell proliferation, apoptosis, and the NF-κB pathway. As multiple myeloma (MM) presents with constitutive activation of NF-κB, we analyzed the effect of AZT on human MM cell lines. We evaluated the cytotoxic effect of AZT in human MM cell lines sensitive (8226/S) or resistant to doxorubicin (8226/DX5) and human T cell lymphoblast-like cells, uterine sarcoma cells, and HUVEC using MTT assay. Cytotoxicity was also evaluated in vivo in nude mice xenografted with 8226/S tumor. The effect of AZT on the expression of genes involved in cell proliferation, apoptosis, angiogenesis, and the NF-κB pathway was analyzed in the xenografts using real-time polymerase chain reaction. AZT was effective against both 8226/S and 8226/DX5 cells in a dose and time-dependent manner (p = 0.02) in vitro and promoted cell cycle arrest in S phase in these cells. The tumor volume was lower in mice treated with AZT compared to untreated mice (p = 0.0003). AZT down-regulated the pro-proliferative genes encoding AKT1, MYC, STAT1, MAPK8, MAPK9, CCL-3, Bcl-3, and cyclin D2; pro-angiogenenic genes encoding VEGF and IL8; and genes involved in cell adhesion (ICAM1 and FN1) and the NF-κB pathway. AZT up-regulated the expression of tumor suppressor gene FOXP1 and the pro-apoptotic genes encoding BID, Bcl-10, and caspase-8. Thus, we demonstrated the cytotoxic effect of AZT in human MM cell lines for the first time. Our data may provide the rationale for future clinical trials of AZT for treating MM.
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Antineoplásicos/uso terapêutico , Mieloma Múltiplo/tratamento farmacológico , Zidovudina/uso terapêutico , Antineoplásicos/farmacologia , Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Humanos , Mieloma Múltiplo/genética , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Zidovudina/farmacologiaRESUMO
BACKGROUND: The characteristics of blood recipients including diagnoses associated with transfusion and posttransfusion survival are unreported in Brazil. The goals of this analysis were: 1) to describe blood utilization according to clinical diagnoses and patient characteristics and 2) to determine the factors associated with survival of blood recipients. STUDY DESIGN AND METHODS: A retrospective cross-sectional analysis was conducted on all inpatients in 2004. Data came from three sources: The first two files consist of data about patient characteristics, clinical diagnosis, and transfusion. Analyses comparing transfused and nontransfused patients were conducted. The third file was used to determine survival recipients up to 3 years after transfusion. Logistic regression was conducted among transfused patients to examine characteristics associated with survival. RESULTS: In 2004, a total of 30,779 patients were admitted, with 3835 (12.4%) transfused. These patients had 10,479 transfusions episodes, consisting of 39,561 transfused components: 16,748 (42%) red blood cells, 15,828 (40%) platelets (PLTs), and 6190 (16%) plasma. The median number of components transfused was three (range, 1-656) per patient admission. Mortality during hospitalization was different for patients whose admissions included transfusion or not (24% vs. 4%). After 1 year, 56% of transfusion recipients were alive. The multivariable model of factors associated with mortality after transfusion showed that the most significant factors in descending order were hospital ward, increasing age, increasing number of components transfused, and type of components received. CONCLUSION: Ward and transfusion are markers of underlying medical conditions and are associated with the probability of survival. PLT transfusions are common and likely reflect the types of patients treated. This comprehensive blood utilization study, the first of its kind in Brazil, can help in developing transfusion policy analyses in South America.
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Transfusão de Sangue/mortalidade , Transfusão de Sangue/estatística & dados numéricos , Adolescente , Adulto , Idoso , Brasil , Criança , Pré-Escolar , Estudos Transversais , Feminino , Humanos , Lactente , Recém-Nascido , Modelos Logísticos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Estudos Retrospectivos , Taxa de SobrevidaRESUMO
BACKGROUND: The MASS IV-DM Trial is a large project from a single institution, the Heart Institute (InCor), University of São Paulo Medical School, Brazil to study ventricular function and coronary arteries in patients with type 2 diabetes mellitus. METHODS/DESIGN: The study will enroll 600 patients with type 2 diabetes who have angiographically normal ventricular function and coronary arteries. The goal of the MASS IV-DM Trial is to achieve a long-term evaluation of the development of coronary atherosclerosis by using angiograms and coronary-artery calcium scan by electron-beam computed tomography at baseline and after 5 years of follow-up. In addition, the incidence of major cardiovascular events, the dysfunction of various organs involved in this disease, particularly microalbuminuria and renal function, will be analyzed through clinical evaluation. In addition, an effort will be made to investigate in depth the presence of major cardiovascular risk factors, especially the biochemical profile, metabolic syndrome inflammatory activity, oxidative stress, endothelial function, prothrombotic factors, and profibrinolytic and platelet activity. An evaluation will be made of the polymorphism as a determinant of disease and its possible role in the genesis of micro- and macrovascular damage. DISCUSSION: The MASS IV-DM trial is designed to include diabetic patients with clinically suspected myocardial ischemia in whom conventional angiography shows angiographically normal coronary arteries. The result of extensive investigation including angiographic follow-up by several methods, vascular reactivity, pro-thrombotic mechanisms, genetic and biochemical studies may facilitate the understanding of so-called micro- and macrovascular disease of DM.
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Doença da Artéria Coronariana/diagnóstico , Vasos Coronários/metabolismo , Diabetes Mellitus Tipo 2/diagnóstico , Rim/metabolismo , Projetos de Pesquisa , Angiografia Coronária , Doença da Artéria Coronariana/tratamento farmacológico , Doença da Artéria Coronariana/patologia , Doença da Artéria Coronariana/fisiopatologia , Vasos Coronários/diagnóstico por imagem , Vasos Coronários/imunologia , Vasos Coronários/patologia , Diabetes Mellitus Tipo 2/tratamento farmacológico , Diabetes Mellitus Tipo 2/patologia , Diabetes Mellitus Tipo 2/fisiopatologia , Seguimentos , Predisposição Genética para Doença , Humanos , Inflamação , Rim/imunologia , Rim/patologia , Síndrome Metabólica , Estresse Oxidativo , Polimorfismo Genético , Prognóstico , Trombose , UltrassonografiaAssuntos
Coagulação Sanguínea , Trombose , Brasil , Humanos , Trombose/metabolismo , Trombose/patologia , Trombose/fisiopatologia , Trombose/terapiaRESUMO
Os linfomas extralinfonodais representam aproximadamente 1/3 de todos os linfomas não Hodgkin (LNH) e, embora possam ter início em qualquer tecido, mais frequentemente acometem o trato gastrointestinal, sendo o estômago o órgão responsável pela grande maioria dos casos. Os linfomas primários gástricos são comumente LNH, sendo representados em mais de 95 por cento dos casos pelo linfoma difuso de grandes células B e pelo linfoma MALT (mucosa associated lymphoid tissue). De evolução indolente, o linfoma MALT destaca-se por ser um modelo de câncer secundário à estimulação antigênica crônica exercida por uma bactéria denominada Helicobacter pylori (HP). No outro polo, situa-se o linfoma difuso de células B (LDGCB), que, de patogênese duvidosa, pode tratar-se de uma transformação de LNH MALT ou ainda se caracterizar por um linfoma "de novo". Neste estudo, revisamos a literatura, enfatizando aspectos importantes à prática clínica destes linfomas.
Extranodal lymphomas account for about 30 percent of all non-Hodgkin lymphomas (NHL), and although they can originate in any tissue, the gastrointestinal tract is the most commonly affected structure with the stomach being the most common subtype. Diffuse Large B cell lymphoma (DLBCL) and MALT (mucosa associated lymphoid tissue) lymphoma account for more than 95 percent of the cases of gastric lymphoma. The indolent development of MALT lymphoma stands out as it is a type of cancer subject to chronic antigen stimulation by the Helicobacter pylori bacteria. Conversely, diffuse large B cell lymphomas, whose pathogenesis is uncertain, can be a transformation from MALT NHL or perhaps a new type of lymphoma. In this study we carried out a review of the literature, stressing the key aspects of these lymphomas in the clinical practice.
RESUMO
Pacientes idosos com linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) são frequentemente excluídos de estudos clínicos. A utilização de terapias curativas muitas vezes é impossibilitada em virtude das comorbidades apresentadas por esta população ao diagnóstico. Nós adotamos um protocolo alternativo de quimioterapia oral combinando um inibidor da topoisomerase II e dexametasona. Apresentamos os resultados parciais com este protocolo em três pacientes portadores de LDGCB com idade superior a 80 anos e comorbidades severas. Todos alcançaram remissão completa com baixa toxicidade. Esses resultados demonstram que protocolos curativos alternativos devem ser testados em pacientes idosos portadores LDGCB a despeito da presença de comorbidades severas.
RESUMO
BACKGROUND: Syphilis screening of blood donors is a common practice worldwide, but very little is known about the meaning of a positive serologic test for syphilis in blood donors and the risk profile of these donors. The aim of this study was to determine the demographic characteristics and risk behaviors of blood donors with recent and past syphilis and their implications for blood bank testing and deferral strategies. STUDY DESIGN AND METHODS: Demographic characteristics, category of donation, number of previous donations, sexual behavior, and history of sexually transmitted diseases were reviewed comparing blood donors with recent and past syphilis from January 1, 1999, to December 31, 2003. RESULTS: A total of 2439 interviews were reviewed, including 2161 (88.6%) donors with past and 278 (11.4%) with recent syphilis infection. Factors associated with recent infection included younger age (< or = 20 years odds ratio [OR], 36.5; 95% confidence interval [CI], 15.8-84.1), two previous donations (OR, 2.7; 95% CI, 1.9-3.9), male-male sex (homosexual OR, 8.2; 95% CI, 3.2-20.8; and bisexual OR, 11.4; 95% CI, 3.6-36.3), two or more partners in the past 12 months (OR, 2.3; 95% CI, 1.3-4.0), symptoms for syphilis (OR, 4.5; 95% CI, 2.8-7.1), and human immunodeficiency virus (HIV) seropositivity (OR, 39.6; 95% CI, 4.6-339.8). Community donors were also associated with recent syphilis infection (OR, 1.5; 95% CI, 1.2-1.9) compared to replacement donors. CONCLUSION: Sexual history, including male-male sex and multiple partners, were strongly associated with recent syphilis infection, which in turn was strongly associated with HIV. Continuous and vigilant surveillance that includes assessing sexual history and other factors associated with syphilis are needed to guide blood safety policies.
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Doadores de Sangue/estatística & dados numéricos , Cidades/epidemiologia , Doenças Bacterianas Sexualmente Transmissíveis/sangue , Sorodiagnóstico da Sífilis/métodos , Sífilis/epidemiologia , Adolescente , Adulto , Idoso , Algoritmos , Brasil/epidemiologia , Coleta de Dados , Feminino , Humanos , Entrevistas como Assunto , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Análise Multivariada , Fatores de Risco , Adulto JovemRESUMO
A medicina transfusional tem como objetivo garantir a qualidade e quantidade do sangue, componentes e serviços oferecidos à comunidade, e, dentro desse contexto, a análise dos reagentes imuno-hematológicos é crítica para a realização dos testes pré-transfusionais e, consequentemente, uma transfusão segura. É responsabilidade do controle de qualidade o constante aperfeiçoamento de testes que analisam a qualidade dos reagentes e equipamentos utilizados. Esse trabalho tem por objetivo apresentar os resultados alcançados em dez anos de experiência do Departamento de Controle de Qualidade em Imuno-hematologia da Fundação Pró-Sangue / Hemocentro de São Paulo. No período de janeiro de 1997 a dezembro de 2007 foram realizadas análises em 3.417 reagentes imuno-hematológicos por ocasião da aquisição do reagente e por solicitação de reavaliação (durante o uso). As análises incluíram desde a inspeção visual no recebimento a testes laboratoriais específicos para cada tipo de reagente. Dos 3.417 lotes analisados (média=310/ano, mediana=252/ano), 94 (2,7 por cento) foram reprovados (média=8,54/ano, mediana=7,00 ± 7,79/ano). Uma vez aprovado pelo controle de qualidade à aquisição, nenhum reagente imunohematológico foi reprovado durante o uso desde 2004. Podemos concluir que, para implementação de um sistema de controle de qualidade de reagentes imuno-hematológicos, não é necessário uso de reagentes ou equipamentos altamente especializados, pois os mesmos são utilizados na rotina laboratorial, como também não envolvem alta complexidade na execução das análises. Podemos enfim considerar que a implementação do controle de qualidade em Imuno-hematologia contribui para o aumento da segurança transfusional e é factível de realização nos mais diferentes níveis de complexidade dos serviços hemoterápicos.
Transfusion medicine has the purpose of guaranteeing the quality and quantity of blood, blood derivatives and services offered to the community. Thus, the analysis of serological reagents is critical in pre-transfusion testing and, consequently, reliable transfusions. A constant improvement in the tests that analyze the quality of reagents and equipment utilized is the responsibility of quality control. This paper aims at presenting the results and experience achieved over 10 years in the Department of Quality Control in Immunohematology at Fundação Pró-Sangue / Hemocentro de São Paulo. In the period of January 1997 to December 2007 we carried out analyses of 3,417 serological reagents at acquisition and/or during their use. The analyses included from visual inspection to specific laboratory tests for each kind of reagent. Of the 3,417 lots analyzed (mean = 310/year, median = 252/year), 94 (2.7 percent - median=8.54/year) failed the tests. From 2004 to date, once the reagents were approved, none failed during use. The implementation of a quality control system with standardized techniques is important for the adequate utilization of serological reagents. This system accomplished by retroactive control of the reagents, contributed to the safety and reliability of results in immunohematology testing.
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Humanos , Antígenos de Grupos Sanguíneos , Transfusão de Sangue , Técnicas de Laboratório Clínico , Serviço de Hemoterapia , Estudos de Avaliação como Assunto , Controle de QualidadeRESUMO
Vinte e dois pacientes consecutivos portadores de leucemia mielóide aguda (LMA) em primeira remissão completa (1ªRC) submetidos a transplante de células-tronco hematopoéticas autogênico (TCTH Auto) condicionados com bussulfano e melfalano (Bu/Mel) foram selecionados entre 1993 e 2006. A probabilidade de sobrevida global (SG) pelo método de Kaplan-Meier foi de 57,5% após 36 meses, com "plateau" aos 20 meses após o transplante. Fatores como sexo, classificação Franco-Americana-Britânica (FAB) da LMA, tratamento de indução, consolidação intensiva, remissão após o primeiro ciclo de indução e fonte de células não tiveram impacto na sobrevida. Pela análise citogenética, um paciente de mau prognóstico submetido ao procedimento, foi a óbito um ano após o transplante. Nove pacientes foram a óbito, oito por recidiva e um por hemorragia. Morte antes dos 100 dias ocorreu em dois pacientes, um por recidiva e outro por hemorragia decorrente da plaquetopenia refratária, relacionada ao procedimento. Concluímos que o regime de condicionamento Bu/Mel é opção válida ao uso de outros regimes de condicionamento, apresentando excelente taxa da sobrevida.
Twenty-two consecutive patients with acute myeloid leukemia in first complete remission submitted to autologous hematopoietic stem cells transplantation conditioned with busulfan and melphalan were evaluated between 1993 and 2006. The overall survival, according to the Kaplan-Meier curve, was 57.5% at 36 months, with a "plateau" at 20 months after transplant. Factors such as gender, French-American-British (FAB) classification of acute myeloid leukemia, induction therapy, intensive consolidation, remission after the first cycle of induction and source of cells had no impact on survival. One patient with poor prognosis before the procedure died a year after transplantation. Nine patients died, eight by relapse and one because of bleeding. Death before 100 days occurred for two patients, one due to relapse and the other bleeding caused by refractory thrombocytopenia related to the procedure. In conclusion, the conditioning regiment with busulfan and melphalan is a valid option compared to the other conditioning regimens, with an excellent overall survival.
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Humanos , Resistência a Medicamentos , Transplante de Células-Tronco Hematopoéticas , Leucemia Mieloide Aguda/mortalidade , Transplante de Células-Tronco , Transplante AutólogoRESUMO
Recruiting safe, volunteer blood donors requires understanding motivations for donating and knowledge and attitudes about HIV. We surveyed 1,600 persons presenting for blood donation at a large blood bank in São Paulo, Brazil using a self-administered, structured questionnaire, and classified motivations into three domains as well as categorizing persons by HIV test-seeking behavior. Motivations, in descending order, and their significant associations were: "altruism": female gender, volunteer donor and repeat donor status; "direct appeal": female gender, repeat donor status and age 21-50 years; "self-interest": male gender, age under 20 years, first-time donor status and lower education. HIV test-seekers were more likely to give incorrect answers regarding HIV risk behavior and blood donation and the ability of antibody testing to detect recent HIV infections. Altruism is the main motivator for blood donation in Brazil; other motivators were associated with specific demographic subgroups. HIV test-seeking might be reduced by educational interventions.
Assuntos
Doadores de Sangue/psicologia , Infecções por HIV/prevenção & controle , Conhecimentos, Atitudes e Prática em Saúde , Motivação , Adulto , Fatores Etários , Altruísmo , Atitude Frente a Saúde , Brasil , Feminino , Infecções por HIV/transmissão , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Fatores de Risco , Fatores Sexuais , Inquéritos e QuestionáriosRESUMO
Invasive aspergillosis is an important cause of mortality in long-term neutropenic patients, particularly after bone marrow (B.M.T.) and solid organ transplantation. More than 90% of invasive fungal infections in immunocompromised patients can be attributed to Candida and Aspergillus. To date, there is no fast, reliable and feasible test for Aspergillus infection detection in routine procedures. In the present report, a nested PCR technique, developed to detect Aspergillus infection, is described. In our study, the sensitivity, specificity, positive and negative values using this approach were 100%, 94.4%, 83.3%, and 100%, respectively.
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Humanos , Aspergillus , Transplante de Medula Óssea , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
O linfoma primário do sistema nervoso central (LPSNC) é um linfoma extralinfonodal que, ao diagnóstico, encontra-se restrito ao parênquima cerebral, às meninges e/ou cordão espinhal e/ou olhos. Sua incidência triplicou nas últimas três décadas para 0,4 casos por 100.000 habitantes, representando 4 por cento dos tumores do sistema nervoso central (SNC). Embora pacientes infectados pelo HIV tenham 3.600 vezes maior risco para o desenvolvimento do LPSNC, a incidência não aumentou apenas neste grupo de pessoas. Dados sugerem reduções da incidência de LPSNC em pacientes infectados após a introdução de drogas anti-retrovirais. Cerca de 90 por cento dos casos de LPSNC são classificados como linfoma difuso de grandes células B, 10 por cento têm envolvimento ocular e 10 por cento são HIV positivos. A apresentação clínica depende da localização tumoral, prevalecendo os sintomas neurológicos em detrimento aos sistêmicos. Os exames de tomografia computadorizada (TC) e ressonância nuclear magnética (RNM) são essenciais para o diagnóstico, porém o exame confirmatório deve ser o anatomopatológico. O estadiamento deve ser feito com exames de imagem e biópsia de medula óssea (BMO) bilateral. Os principais fatores de mau prognóstico são: performance status do paciente acima de 1, idade superior a 60 anos, DHL elevada, hiperproteinorraquia e acometimento de área cerebral não hemisférica. Alguns fatores de prognóstico biológicos também podem influenciar na sobrevida, a exemplo da expressão de Bcl-6, que confere melhor prognóstico. O tratamento de escolha é a combinação de quimioterapia contendo altas doses de metotrexate e radioterapia (RDT). Devido às altas taxas de neurotoxicidade associada à RDT, seu uso tem ficado mais restrito aos pacientes idosos, e os recidivados ou refratários.
Primary Central Nervous System lymphoma (PCNSL) is an extranodal non-Hodgkin lymphoma in the brain, leptomeninges, spinal cord or eyes. The incidence of PCNSL increased approximately three-fold in the last decades. Nowadays, it represents 0.4 case per 100,000 people and accounts for 4 percent of all primary brain tumors. Although individuals infected with HIV have a 3,600-fold increased risk of developing PCNSL compared with the general population, the incidence has not increased only in AIDS group. Recent data suggest that the incidence of PCNSL declined in the AIDS group after the introduction of anti-retroviral drugs. Around 90 percent of PCNSL cases are classified as diffuse large B-cell lymphoma, 10 percent involve the eyes and 10 percent of patients are HIV positive. The clinical presentation depends on the location of the tumor with neurological rather than systemic symptoms. Computed tomography (CT) and magnetic resonance imaging (RMI) are essential in diagnosis, however the gold standard is tumor biopsy. Staging should be made with imaging and bilateral biopsy of bone marrow. The main poor prognosic parameters are performance status greater than 1, age older than 60 years, elevated DHL, high liquor protein concentration and tumor located within the deep regions of the brain. BCL-6 expression identified in the tumor confers a better prognosis. Currently, a combined therapy with high doses of methotrexate and whole-brain radiotherapy is the therapy of choice. Nowever, whole-brain radiotherapy should be carefully analyzed because neurotoxity is a frequent problem in the elderly and in relapsed and refractory patients.
Assuntos
Humanos , Sistema Nervoso Central , Diagnóstico , Linfoma , Cuidados Médicos , PrognósticoRESUMO
A neoformação vascular constitui evento essencial para que ocorra o desenvolvimento humano. Nesta fase, o sistema vascular sofre expansão. Células endoteliais maduras (ECs) irão compor a parede dos vasos, enquanto células endoteliais oriundas da medula óssea (MO) migram para locais de neoformação vascular com subseqüente diferenciação em células endoteliais maduras. Processos fisiológicos e patológicos como câncer têm a angiogênese como importante componente. Estudos correlacionam a angiogênese com a agressividade tumoral em alguns tipos de tumores incluindo hematológicos, o que ressalta a importância da terapia antiangiogênica como alvo de pesquisas cada vez mais profundas. Neste artigo de revisão enfocamos o papel da angiogênese nas neoplasias hematológicas com ênfase em possíveis alvos terapêuticos.
Vascular neoformation is an essential event in the development of the human body. In this phase vascular networks undergo expansion. Mature endothelial cells constitute the structure of vessel walls so endothelial cells from bone marrow migrate to sites of vascular neoformation with subsequent differentiation as mature endothelial cells (endothelial progenitor cells). Physiopathological and pathological processes such as cancer use angiogenesis as an important component for growth. Studies correlate angiogenesis with aggressive tumors for some types of tumors, including hematological malignancies, thereby highlighting the importance of anti-angiogenic therapy.
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Células Endoteliais , Processos Patológicos , Medula Óssea , Neoplasias Hematológicas , Fenômenos Fisiológicos , Células Progenitoras Endoteliais , NeoplasiasRESUMO
BACKGROUND: Procalcitonin (PCT) is an inflammatory marker that has been used as indicator of severe bacterial infection. We evaluated the concentrations of PCT as a marker for systemic infection compared to C-reactive protein (CRP) in patients neutropenic febrile. METHODS: 52 adult patients were enrolled in the study. Blood sample was collected in order to determine the serum concentrations of PCT, CRP and other hematological parameters at the onset of fever. The patients were divided into 2 groups, one with severe infection (n = 26) and the other in which the patients did not present such an infection (n = 26). Then PCT and CRP concentrations at the fever onset were compared between groups using non parametric statistical tests, ROC curve, sensitivity, specificity, likelihood ratio, and Spearman's correlation coefficient. RESULTS: The mean of PCT was significantly higher in the group with severe infection (6.7 ng/mL versus 0.6 ng/mL - p = 0.0075) comparing with CRP. Serum concentrations of 0.245 ng/mL of PCT displayed 100% de sensitivity and 69.2% specificity. PCT concentrations of 2,145 ng/mL presented a likelihood ratio of 13, which was not observed for any concentration of CRP. CONCLUSION: PCT seems to be an useful marker for the diagnosis of systemic infection in febrile neutropenic patients, probably better than CRP.
Assuntos
Infecções Bacterianas/diagnóstico , Proteína C-Reativa/análise , Calcitonina/sangue , Neutropenia/etiologia , Infecções Oportunistas/diagnóstico , Precursores de Proteínas/sangue , Adulto , Infecções Bacterianas/sangue , Infecções Bacterianas/etiologia , Biomarcadores/sangue , Peptídeo Relacionado com Gene de Calcitonina , Efeitos Colaterais e Reações Adversas Relacionados a Medicamentos , Feminino , Febre/etiologia , Neoplasias Hematológicas/complicações , Humanos , Imunoensaio , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Neutropenia/sangue , Infecções Oportunistas/sangue , Infecções Oportunistas/etiologia , Estatística como AssuntoRESUMO
A pesquisa de antígenos intracelulares por citometria de fluxo é essencial para o estudo imunofenotípico das doenças onco-hematológicas. A utilização de saponina para permeabilização celular tem se mostrado eficaz e de menor custo. Com suas propriedades detergentes, permeabiliza a membrana citoplasmática sem danificá-la ou alterar a expressão dos antígenos de membrana, permitindo a detecção simultânea de antígenos intracelulares e de superfície. O objetivo deste trabalho foi analisar a eficácia da técnica de permeabilização celular com a utilização de saponina como agente permeabilizante. Foram avaliadas 36 amostras de sangue periférico e de medula óssea enviadas ao Laboratório de Imunopatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo para estudo imunofenotípico. Realizamos a técnica de imunofluorescência direta e utilizamos o programa CellQuest (Becton Dickinson, San Jose, CA) do citômetro de fluxo FACSCalibur (Becton Dickinson, San Jose, CA) para aquisição e análise dos dados. Observamos excesso de perda celular quando utilizamos o tampão de lavagem estocado por período superior a sete dias, à temperatura de 2ºC a 8ºC, e perda mínima com tampão de lavagem recém-preparado ou congelado no momento do preparo e descongelado apenas no momento do uso. Para eliminar o excesso de perda celular realizamos análise sistemática das etapas da técnica, o que nos permitiu adequá-la e utilizá-la na rotina de nosso laboratório. Em país de recursos escassos padronizamos uma técnica viável para pesquisar antígenos intracelulares por citometria de fluxo, mais rápida, eficaz e com redução dos custos financeiros em 35 por cento.
Intracellular antigen investigations by means of flow cytometry are essential for immune phenotypical studies of oncohematological diseases. The use of Saponin for cellular permeabilization has proved to be cost-effective. Due to its detergent properties, Saponin permeabilizes the cytoplasmatic membrane without harming it or altering membrane antigen expressions, thus allowing simultaneous detection of intracellular and surface antigens. The objective was to analyze the efficiency of the cell permeabilization technique using Saponin as a permeabilizing agent. Thirty-six samples of peripheral blood and bone marrow underwent an immune phenotypical study at the Immune Pathology Laboratory of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo. Direct immunofluorescence was accomplished using the CellQuest program (Becton Dickinson, San Jose, CA) of the FACSCalibur flow cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA) to acquire and analyze the data. Excessive cell loss was observed when using rinsing buffers stored for more than seven days at temperatures ranging from 2ºC to 8ºC. Minimal cell loss was found when rinsing buffers were used immediately after preparation or frozen at the time of preparation and thawed just before use. In order to eliminate excessive cell loss, a systematic analysis of the technique stages was carried out, allowing us to restructure the technique to our purposes and its use in our laboratory. In a country with scarce resources, a viable, faster, more cost-effective technique (35 percent reduction in cost) aimed at investigating intracellular antigens by flow cytometry has been standardized.
Assuntos
Citometria de Fluxo , Permeabilidade , Saponinas , Membrana Celular , AntígenosRESUMO
O linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) é uma entidade clínico-patológica heterogênea que corresponde de 30 por cento a 35 por cento dos casos de linfoma não-Hodgkin (LNH). É considerado como agressivo porque a sobrevida é curta na ausência de tratamento adequado. Desde 1993 o tratamento deste linfoma passou a ser direcionado pelo índice internacional de prognóstico (IPI) validado em vários estudos. Entretanto, diante das diferentes respostas à mesma terapêutica para pacientes de mesmo IPI houve necessidade de se instituírem novos marcadores de prognóstico para pacientes com LDGCB. Com os avanços do conhecimento biológico destes linfomas, outras variáveis começam a ser utilizadas na estratificação de risco destes linfomas. Nesta revisão abordamos os principais marcadores biológicos utilizados como fatores de prognóstico para o tratamento de pacientes com LDGCB.
Diffuse large B-cell lymphoma is a heterogeneous clinical pathological entity which accounts for about 30 percent to 35 percent of all non-Hodgkin's lymphoma cases. It is considered to be aggressive due to the patient's short survival time when incorrect treatment is provided. Since 1993, treatment has been carried out according to IPI, which has been validated in several studies. However, since there are different responses from patients with the same IPI submitted to similar therapies, new prognostic markers are needed for these patients. As the biological nature of such lymphomas is becoming better known, other variables are starting to be used in order to stratify risk. In this review we will approach the key biological markers used as prognostic factors to treat diffuse Large B-Cell Lymphoma patients.
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Humanos , Biomarcadores Farmacológicos , Linfoma Difuso de Grandes Células B , Biomarcadores , PrognósticoRESUMO
O linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) corresponde a 50 por cento dos casos de linfoma não-Hodgkin (LNH). A partir de 1993, o tratamento destes pacientes passou a ser direcionado pelo índice Internacional de Prognóstico (IPI) validado em vários estudos. Entretanto a aplicação do IPI ainda não foi avaliada em nossa população e em nossas condições socioeconômicas. Neste estudo avaliamos o impacto do IPI ajustado para a idade (IPIa) na remissão completa (RC), sobrevida global (SG) e sobrevida livre de doença (SLD) dos portadores de LDGCB com idade inferior a 60 anos, tratados no Serviço de Hematologia do HCFMUSP. Dos 111 pacientes avaliados, 60 foram classificados com IPIa de risco baixo e intermediário e 51 IPIa de risco intermediário alto e alto. Os pacientes de risco baixo e intermediário foram analisados em conjunto no grupo de baixo risco adaptado e os de risco intermediário alto e alto no grupo de alto risco adaptado. Verificamos que a SG e a SLD foram influenciadas pelo estádio clínico, DHL e o estado funcional dos pacientes. Recomendamos o uso sistemático do IPI no tratamento dos nossos pacientes com LDGCB em nossa instituição.
Assuntos
Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Humanos , Linfoma Difuso de Grandes Células B , PrognósticoRESUMO
Entre outubro de 1997 e julho de 1999 pesquisou-se a refratariedade plaquetária em 15 pacientes na fase precoce do TMO alogênico e autoplástico, com idade variando de 1 a 66 anos no Hospital São Camilo. Para esta avaliação, foram utilizados os seguintes parâmetros: evolução clínica, cálculo corrigido do incremento plaquetário (CCI), teste de microlinfocitotoxicidade dependente de complemento (CDC) e ensaios plaquetários por aderência de células vermelhas em fase sólida (SPRCA). A refratariedade plaquetária foi definida como falha de resposta a uma transfusão de dois concentrados de plaquetas ABO compatíveis, quando o cálculo corrigido do incremento plaquetário (CCI) de uma hora pós-transfusional era inferior a 7,5 ou de 24 horas < 4,5. Apenas a análise do CCI de 24 horas mostrou significância estatística. A refratariedade plaquetária foi detectada em 80,0 por cento dos casos, tendo como causa principal os fatores não imunológicos, como: anfotericina 66,66 por cento, doença veno-oclusiva hepática 53,33 por cento, febre de origem indeterminada 40,0 por cento, esplenomegalia epistaxe leve, febre, melena grave, hematêmese grave e infecção bacteriana 20,0 por cento. Melena leve, enterorragia grave, epistaxe moderada e grave 13,33 por cento, enquanto CIVD, enterorragia moderada e grave 6,66 por cento. Os fatores imunológicos foram representados pela presença da reação aguda do enxerto contra hospedeiro (aGVHD) em 33,0 por cento e infecção por citomegalovírus (CMV) em 13,33 por cento, embora a detecção de auto-anticorpos tenha sido negativa. Conclui-se que a análise do CCI pós-transfusional de 24 horas mostrou ser um método de escolha para detecção da refratariedade e de útil aplicabilidade em pacientes trombocitopênicos refratários, em particular naqueles submetidos ao TMO.
Assuntos
Lactente , Pré-Escolar , Criança , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Humanos , Antígenos de Plaquetas Humanas/sangue , Transplante de Medula Óssea , Testes Imunológicos de Citotoxicidade , Transfusão de PlaquetasRESUMO
Dentre os métodos para a obtenção de hemocomponentes destaca-se o método doplasma rico em plaquetas (PRP) e o método da extração da camada leucoplaquetária(ECLP). Este estudo tem por objetivo comparar os métodos do PRP e da ECLP naprodução de hemocomponentes. Foram processadas 88 bolsas de sangue total(ST) pelo método do PRP, 130 bolsas triplas pelo método da ECLP (ECLPT) e 215bolsas coletadas em bolsas quádruplas pelo método da ECLP (ECLPQ) com o usode extrator automático. Encontramos diferença estatisticamente significante na quantidadede Hb total /unidade entre ECLPT e ECLPQ (p=0,005) e entre ECLPT e PRP(p=0,007) no ST. Houve diferença estatisticamente entre ECLPT e ECLPQ(p<0,001) e entre ECLPQ e PRP (p<0,001) para a quantidade de leucócitos. NoCH, encontramos diferença estatisticamente significante entre o método do PRP eECLPT e ECLPQ hematócrito (p<0,001), recuperação de Hb (p<0,001), Hb total(p<0,001), leucócitos (p<0,001), depleção de leucócitos (p<0,001), quantidade deplaquetas (p<0,001) e depleção de plaquetas (p<0,001). Para o concentrado deplaquetas houve diferença estatisticamente significante entre PRP, ECLPT e ECLPQpara o volume, recuperação de plaquetas e depleção de leucócitos (p<0,001). Autilização do método da ECLP é vantajosa qualitativamente, pois os hemocomponentesobtidos apresentam menor quantidade de leucócitos e plasma. Ométodo da ECLP com a utilização de bolsas quádruplas e a produção de CP apartir de uma unidade de CLP é de implantação viável e de fácil padronização,permitindo boa reprodutibilidade, bem como melhor aproveitamento de plasma e plaquetas.
The most commonly used methods for blood componentprocessing are the plasma rich in platelets method (PRP),and the Buffy-coat extraction method (BC).The purpose of thisstudy was to compare these two methods in the processing ofblood components. Eighty-eight whole blood units (WB) wereprocessed by the PRP method, 130 blood units were processedby the BC triple blood bag method (BCT) and 215 blood unitswere collected in quadruple blood bags by the BC method (BCQ)using an automatic extractor. A statistically significant differencewas observed in the number in the total Hb per unit of WBbetween the BCT and BCQ methods (p=0.005) and between theBCT and PRP methods (p=0.007). There were also statisticallysignificant differences between the BCT and BCQ methods(p<0.001) and between BCQ and PRP methods (p<0.001) inrelation to leukocytes/mL. In the RBC concentrates, we foundstatistically significant differences between the PRP method andboth the BCT and BCQ methods in respect to hematocrit levels,Hb recovery, total Hb, leukocytes, leukocyte depletion, plateletsand platelet depletion (p<0.001 in all cases). We also foundstatistically significant differences between the PRP, BCT andBCQ methods for the volume, platelet recovery, and leukocytedepletion (p<0.001) in platelet concentrates. The use of theBC method is qualitatively advantageous as the bloodcomponents obtained present a lower quantity of leukocytesand plasma. The BC method with the use of quadruple bloodbags for the production of PC from one BC unit is reliable,easy to standardize, allows good reproducibility, as well as better utilization of plasma and platelets.