RESUMO
Objectives. An increased urinary oxalate and reduced urinary citrate are considered major risk factors in the formation of calcium oxalate kidney stones. In this work, an HPLC-MS method is presented for the simultaneous measurement of oxalate and citrate in urine. Methods. Sample preparation was carried out using a liquid-liquid extraction with ethyl acetate. Chromatographic separation was performed in a C18 column by gradient elution with methanol and 1 M formate buffer at 35 °C. Citrate and oxalate were monitored on a single-quadrupole MS system. Results. The method was linear in the concentration range of 0.5 mg/L to 450 mg/L for oxalate and from 2.5 mg/L to 950 mg/L for citrate. The Lower Limit of Measurement was 0.56 mg/L for oxalate and 2.5 mg/L for citrate. The within-day imprecision was 6% for oxalate and 3% for citrate, and the between day imprecision was lower than 15% for both analytes. LC-MS method was compared with capillary electrophoresis and it was shown that both methods were interchangeable to measure oxalate, but not citrate. Conclusions. HPLC-MS method is a good approach to measure oxalate and citrate in 24-hour urine, and it is applicable in clinical routine for patients with recurrent stone formation (AU)
Objetivos. La hiperoxaluria e hipocitraturia están consideradas el principal factor de riesgo en la formación de cálculos renales de oxalato cálcico. En este trabajo se ha desarrollado un método de HPLC-MS para la medida simultánea de oxalato y citrato en orina. Métodos. La preparación de muestras se realizó por una extracción líquido-líquido con etilacetato. La separación cromatográfica se llevó a cabo en una columna C-18 a 35 °C con un gradiente de elución con metanol y ácido fórmico 1 M. El citrato y el oxalato se monitorizaron mediante espectrometría de masas con un cuadrupolo simple. Resultados. El método fue lineal para el oxalato en el rango de concentración de 0,5 a 450 mg/l y para el citrato de 2,5 a 950 mg/l. El límite menor de intervalo de medida fue de 0,56 mg/l para el oxalato y de 2,5 mg/l para el citrato. La imprecisión intradía fue del 6% para el oxalato y del 3% para el citrato, y la interdía fue inferior al 15% para ambos analitos. El método de LC-MS desarrollado se comparó con un método de electroforesis capilar y se demostró que ambos eran intercambiables para el oxalato, pero no para el citrato. Conclusiones. El método de HPLC-MS desarrollado constituye una buena aproximación para medir oxalato y citrato en orina de 24 horas y es aplicable en la rutina clínica para pacientes con riesgo de formación de cálculos renales (AU)
