Inmunofenotipificación de linfocitos T como marcador diagnóstico de sepsis neonatal tardía / T lymphocyte immunophenotype as a diagnostic marker of late-onset neonatal sepsis

Introducción Dada la elevada morbimortalidad asociada con la sepsis neonatal, es necesario un marcador diagnóstico que prediga la enfermedad antes de obtener el resultado del cultivo de sangre y/o líquido cefalorraquídeo. Se evaluaron los cambios en el inmunofenotipaje de los linfocitos T CD4+ en neonatos con sepsis de comienzo tardío con el fin de mejorar los resultados obtenidos con los test diagnósticos empleados actualmente (proteína C reactiva, índice neutrófilos inmaduros/neutrófilos totales, leucocitosis). Pacientes y métodos Un estudio de cohortes prospectivo se llevó a cabo en 24 neonatos con sepsis de comienzo tardío y 48 recién nacidos controles no infectados, de edad gestacional igual o inferior a 37 semanas. Se identificaron las subpoblaciones de linfocitos T CD4+ en sangre periférica mediante tinción con anticuerpos monoclonales y cuantificación por citometría de flujo. Se construyeron curvas de rendimiento diagnóstico mediante regresión logística. Resultados Como marcador de sepsis neonatal de comienzo tardío, un porcentaje de linfocitos T CD4+/CD45RO+/CD45RA­ > 3,5 % muestra una sensibilidad del 94,1 %, una especificidad del 69,2 %, un valor predictivo positivo del 80,0 %, valor predictivo negativo del 90,0 %, y una odds ratio de 36,0 (p 10,0 mg/l, la especificidad de esta combinación de marcadores aumenta al 94,7 % y el valor predictivo positivo, al 85,7 %. Conclusiones Un porcentaje de linfocitos T CD4+/CD45RO+/CD45RA­ > 3,5 % es un buen indicador de sepsis neonatal de comienzo tardío en neonatos pretérmino. Y si se combina con una proteína C reactiva > 10,0 mg/l el rendimiento diagnóstico mejora

Background Given the high risks associated with neonatal sepsis, there is a need for a diagnostic marker that would predict the disease before the results of blood or cerebrospinal fluid cultures are available. We evaluated changes in the CD4+ T lymphocyte immunophenotype in neonates with late-onset sepsis to try to improve the test combinations currently used (C reactive protein, immature:total neutrophil ratio, leukocytosis). Patients and methods We performed a prospective cohort study in 24 neonates with late-onset sepsis and 48 non-infected controls with a gestational age of 37 weeks or less. CD4+ T lymphocyte subpopulations in peripheral blood samples were identified by labeling with monoclonal antibodies and quantified by flow cytometry. Diagnostic performance curves were constructed by logistic regression. Results As a marker of late-onset neonatal sepsis, a percentage of CD4+/CD45RO+/CD45RA­ T lymphocytes of > 3.5 % showed a sensitivity of 94.1 %, specificity of 69.2 %, positive predictive value of 80.0 %, negative predictive value of 90.0 %, and odds ratio of 36.0 (p 10.0 mg/L, the specificity of this combination of tests increased to 94.7 % and the positive predictive value to 85.7 %. Conclusions A percentage of CD4+/CD45RO+/CD45RA­ T lymphocytes of > 3.5 % is an effective indicator of late-onset neonatal sepsis in preterm infants. If this marker is combined with a C-reactive protein level of > 10.0 mg/l, its diagnostic performance is improved

[Basal immunological parameters in a group of retirees]. / Parámetros inmunológicos basales en un grupo de viejos-jóvenes.

OBJECTIVES: a) establish the major immunological parameters for clinical use in a group of retirees; b) correlate its levels in relation to gender; c) assess the influence of some specific factors (substance abuse, diseases) on the analyzed parameters. MATERIAL AND METHODS: study period: 1990-1999; sample: 249; 102 men (M); 147 women (W). Median age: 67.03 (4.2) years. Analyzed immunological variables: total leukocytes, lymphocytes B, immunoglobulins (IgG, IgA and IgM), rheumatoid factor, lymphocytes subpopulations (CD4, CD8, ratio), natural killer, complement (C3 and C4) and delayed hypersensitivity tests. TECHNIQUES: flow cytometry (EPICS-Profile II) and Multitest IMC. STATISTICAL ANALYSIS: SPSS version 10.0.Results. Gender influence: leukocytes: M: 6,699.4 (1,615.0); W: 6,105.9 (1,470.5); p < 0,003; lymphocytes B (%): M: 9.4 (5.0); W: 11.3 (4.1); p < 0,003; IgG: M: 1,155.7 (320.0); W: 1,116.1 (257.8); p = 0,28, IgM: M: 112.7 (69.3); W: 136.8 (85.6); p < 0,01; IgA: M: 276.1 (114); W: 254.0 (122); p = 0,15; rheumatoid factor: M: 18.5 (6.6); W: 20.9 (18.8); p = 0,020; CD4 (%): M: 42.2 (9.7); W: 47.3 (9,1); p < 0.001; CD8 (%): M: 30.3 (10,8); W: 25.0 (10.2); p < 0,001; scores: M: 13.2 (7.4); 11m: 10.0 (7.2); p < 0,005. Influence of the substance abuse: smokers; lymphocytes B (%): 8.8 (3.4); No: 10.9 (4.7); p < 0.008; CD8 (%): smokers: 31.8 (13.2); No: 26.2 (9.9); p < 0.003; CD4/CD8 ratio: smokers: 1.6 (0.9); No: 2.0 (1.3); p < 0,05; scores: smokers: 14.3 (6.8); No: 10.8 (7.5); p < 0.02; alcoholism: lymphocytes B (%): 8.7 (2.5). No: 10.8 (4.7); p < 0.001; alcoholism: store: 16.9 (6.7); No: 10.7 (7.3); p < 0,001. Influence of the diseases: diabetes: CD4 (%): 49.4 (12.0); diabetics versus healthy: p = 0,05; CD4/CD8 ratio: 2.6 (2.5); diabetics versus healthy: p = 0,04; EPOC: CD8 (%): 32.9 (16,3); COPD versus healthy: p = 0,07; neoplasias NK (%): 17.1 (21.4); neoplasias versus healthy: p < 0,01. CONCLUSIONS. a) there are differences according to the gender in the parameters of normalcy of some variables; b) smoking and alcoholism alter the immunological test analyzed, and c) some chronic diseases influence the subpopulations of lymphocytes and the cutaneous test of delayed hypersensitivity.

Parámetros inmunológicos basales en un grupode viejos-jóvenes / Basal inmunological parameters in a group of retirees

Objetivos. a) valorar los principales parámetros inmunológicos de uso clínico en un grupo de jubilados; b) correlacionar sus niveles en función del género, y c) valorar la influencia sobre los parámetros analizados de determinados factores (hábitos tóxicos, enfermedades).Material y métodos. Período de estudio: 1990-1999; muestra: 249; 102 hombres (H); 147 mujeres (M). Edad media: 67,03 ñ 4,2 años. Variables inmunológicas analizadas: leucocitos totales, linfocitos B, inmunoglobulinas (IgG, A y M), factor reumatoide, subpoblaciones de linfocitos (CD4, CD8, ratio), natural killer (NK), complemento (C3 y C4) y pruebas de hipersensibilidad retardada. Técnicas: citometría de flujo (EPICS-Profile II) y Multitest IMC. Análisis estadístico: SPSS versión 10.0.Resultados. Influencia del género: leucocitos: H: 6.699,4 (1.615,0); M: 6.105,9 (1.470,5); p< 0,003; linfocitos B ( por ciento); H: 9,4 (5,0); M: 11,3 (4,1); p < 0,003; IgG; H: 1.155,7; (320,0) M: 1.116,1 (257,8); p = 0,28; IgM; H: 112,7 (69,3); M: 136,8 (85,6); p < 0,01; IgA; H: 276,1 (114); M: 254,0 (122); p = 0,15; factor reumatoide: H: 18,5 (6,6); M: 20,9 (18,8); p = 0,20; CD4 ( por ciento); H: 42,2 (9,7); M: 47,3 (9,1); p < 0,001; CD8 ( por ciento); H: 30,3 (10,8); M: 25,0 (10,2); p < 0,001; score; H: 13,2 (7,4); M: 10,0 (7,2); p < 0,005. Influencia de los hábitos tóxicos: fumadores: linfocitos B ( por ciento): 8,8 (3,4); No: 10,9 (4,7); p < 0,008; CD8 ( por ciento); fumadores: 31,8 (13,2); No: 26,2 (9,9); p < 0,003; cociente CD4/CD8: fumadores: 1,6 (0,9); No: 2,0 (1,3); p < 0,05; score: fumadores: 14,3 (6,8); No: 10,8 (7,5); p < 0,02; hábito enólico, linfocitos B ( por ciento): 8,7 (2,5); No: 10,8 (4,7); p < 0,001; hábito enólico, score: 16,9 (6,7); No: 10,7 (7,3); p < 0,001. Influencia de las enfermedades: diabetes; CD4 ( por ciento): 49,4 (12,0); diabéticos frente a sanos: p = 0,05; cociente CD4/CD8: 2,6 (2,5); diabéticos frente a sanos: p = 0,04; enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC): CD8 ( por ciento), 32,9 (16,3); EPOC frente a sanos: p = 0,07; neoplasias: NK ( por ciento): 17,1 (21,4); neoplasias frente a sanos: p < 0,01. Conclusiones. a) existen diferencias en función del género en los parámetros de normalidad de algunas variables; b) el tabaquismo y el hábito enólico alteran las pruebas inmunológicas analizadas, y c) determinadas enfermedades crónicas influyen en las subpoblaciones de linfocitos y en las pruebas cutáneas de hipersensibilidad retardada (AU)