Detección de Leptospira spp. en animales y muestras ambientales de áreas peridomésticas en Nicaragua

[RESUMEN]. Objetivo. El objetivo de este estudio fue conocer las características epidemiológicas de la leptospirosis en animales domésticos y en los casos de leptospirosis humana en áreas peridomésticas en Nicaragua entre 2014 y 2016. Métodos. Las muestras se extrajeron en áreas donde se confirmaron casos en humanos utilizando un muestreo no probabilístico en 10 de los 17 departamentos del país. Se incluyeron 112 muestras de orina de animales domésticos, 129 muestras de agua y 69 de tierra para aislar leptospiras en medio Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH). Además, se aplicó la prueba de microaglutinación (MAT) en 263 muestras de suero de animales y 88 aislados se analizaron mediante PCR. Resultados. En 32,6% (101/310) de las muestras se aislaron espiroquetas, 23,2% (26/112) se aislaron en la orina de animales domésticos, 47,3% (61/129), en las muestras de agua y 20,3 % (14/69), en las de tierra. El análisis de aislamiento mostró diferencias significativas (P < 0,05) entre los departamentos para los diferentes tipos de muestras, y el aislamiento fue más frecuente en agua que en tierra (OR = 3,49; IC95%: 1,56-7,80). El 14,1% (37/263) de los animales fueron reactores en la prueba de microaglutinación. El serogrupo más frecuente fue Icterohaemorrhagiae (40%). En el análisis con la PCR para identificar leptospiras de las especies patógenas 10,2% (9/88) de los aislamientos fueron positivos. Conclusiones. Esta investigación demuestra que los animales domésticos y el ambiente desempeñan un papel importante en la aparición de brotes de la leptospirosis y confirma el comportamiento endémico de la enfermedad en Nicaragua.

[ABSTRACT]. Objective. The objective of this study was to determine the epidemiological characteristics of leptospirosis in pets and in humans in peridomestic settings in Nicaragua between 2014 and 2016. Methods. The samples were taken in areas where cases were confirmed in humans using non-probabilistic sampling in 10 of the country’s 17 departments. This included 112 urine samples from pets, 129 water samples, and 69 soil samples in order to isolate leptospires in Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) medium. Furthermore, the microscopic agglutination test (MAT) was applied to 263 samples of animal serum, and 88 isolates were analyzed using PCR. Results. In 32.6% (101/310) of the samples, spirochetes were isolated: 23.2% (26/112) in the pet urine, 47.3% (61/129) in water samples, and 20.3% (14/69) in soil samples. Isolation analysis showed significant differences (p<0.05) between departments for the different types of samples, and isolation was more frequent in water than in soil (OR = 3.49; CI95%: 1.56-7.80). In total, 14.1% (37/263) of the animals were reactors in the microscopic agglutination test. The most frequent serogroup was Icterohaemorrhagiae (40%). PCR analysis to identify pathogenic species of leptospires resulted in 10.2% (9/88) positive isolations. Conclusions. This research demonstrates that pets and environment conditions play an important role in the emergence of outbreaks of leptospirosis, and confirms the endemic behavior of the disease in Nicaragua.

[RESUMO]. Objetivo. Descrever as características epidemiológicas da leptospirose em animais domésticos e em casos de leptospirose humana em áreas peridomiciliares na Nicarágua entre 2014 e 2016. Métodos. As amostras foram coletadas por amostragem não probabilística em áreas com casos confirmados de leptospirose humana em 10 das 17 províncias do país. Foram analisadas 112 amostras de urina de animais domésticos, 129 amostras de água e 69 amostras de solo com o uso do meio de cultura padrão para o isolamento de leptospiras (Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris, EMJH). Além disso, foi realizado o teste de aglutinação microscópica em 263 amostras séricas de animais e 88 isolados foram analisados com a técnica de PCR. Resultados. Em 32,6% (101/310) das amostras foram isoladas espiroquetas, sendo 23,2% (26/112) isoladas na urina de animais domésticos, 47,3% (61/129) nas amostras de água e 20,3% (14/69) nas amostras de solo. Houve diferença significativa (P < 0,05) entre as províncias no isolamento nos diferentes tipos de amostras analisadas, sendo o isolamento mais frequente nas amostras de água que de solo (OR = 3,49; IC95%: 1, 56–7,80). Reatividade no teste de aglutinação microscópica foi observada em 14,1% (37/263) das amostras de animais. O sorogrupo mais frequentemente isolado foi Icterohaemorrhagiae (40%). A técnica de PCR demonstrou que 10,2% (9/88) dos isolados eram positivos para espécies patogênicas de leptospiras. Conclusões. Esta pesquisa demonstra que os animais domésticos e o entorno têm papel importante no surgimento de surtos de leptospirose e confirma o comportamento endêmico da doença na Nicarágua.

[Molecular Epidemiology of Bartonella henselae in Stray and Sheltered Cats of Zaragoza, Spain]. / Epidemiología molecular de Bartonella henselae en gatos callejeros y de albergue en Zaragoza, España.

OBJECTIVE: Bartonella henselae is responsible for the Cat Scratch Disease in humans, being it underdiagnosed. This study aims to detect and quantify the load of B. henselae DNA in oral and whole blood samples from stray and shelthered cats from Zaragoza (Spain), and analyze associations with epidemiological and clinical factors. METHODS: 47 cats entered in the estudy. Real time PCR was used to detect B. henselae DNA in blood and oral samples. The SPSS software was applied to the statistical analysis of positivity of paired samples and its relationship with variables as age, sex, origin, month of sampling and fleas/ticks observation in fur and clinical factors (health status and observation of oral lesions). To know the relationship between the presence in blood and oral cavity a logistic regression analysis was performed. RESULTS: A 23.40% of blood samples and the 27.65% of the oral swabs carried the B. henselae DNA. A fair agreement between paired samples was observed (kappa value = 0.33, p less than 0.05). Bacterial DNA detected in oral and blood samples were not significantly associated to any of the epidemiological and clinical factors. Positive cats having oral lesions carried higher loads (3,12/1x1,000,000 cells) of bacterial DNA in their oral cavity than those without lesions (2,58/1x1,000,000 cells) being p=0.032. CONCLUSIONS: Carriage of the B. henselae DNA in the blood samples appears not to be related with carriage of the DNA of the bacteria in mouth and vice versa. Positive cats having oral lesions carry a higher load of B. henselae DNA and may suppose a higher risk of transmission to people handling them.

OBJETIVO: Bartonella henselae produce la enfermedad del arañazo del gato en las personas y se considera infradiagnosticada. El objetivo fue detectar y cuantificar la carga de ácido desoxiribonucleico (ADN) de B. henselae en muestras de sangre y orales de gatos callejeros y de albergue de Zaragoza, España y analizar su relación con factores epidemiológicos y clínicos. METODOS: Se estudiaron 47 gatos. El ADN de B. henselae,se detectó mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) en sangre y muestras orales. Se usó el paquete estadístico SPSS para analizar la positividad de las muestras pareadas y su relación con factores epidemiológicos (edad, sexo, origen, mes de muestreo, presencia de pulgas/garrapatas) y clínicos (estado de salud y presencia de lesiones orales). Se realizó un análisis de regresión logística para conocer la asociación entre la presencia en sangre y cavidad oral y el resto de las variables. RESULTADOS: El 23,40% de las muestras de sangre y el 27,65% de las orales portaba el ADN de B. henselae. Se observó débil correlación de la positividad de las muestras pareadas (kappa=0,33; p inferior a 0,05). No se detectó asociación estadística entre la presencia de ADN de B. henselae en las muestras y los factores epidemiológicos y clínicos. Los gatos con lesiones orales portaban una carga más elevada de ADN (3,12/1x1.000.000 células) en la boca que los que no tenían lesiones (2,58/1por 1.000.000 células),(p=0,032). CONCLUSIONES: La detección de ADN de B. henselae en sangre no parece estar relacionada con su presencia en cavidad oral y viceversa. Los gatos positivos con lesiones orales pueden significar mayor riesgo de infección por B. henselae para las personas que los manejan.

Epidemiología molecular de Bartonella Henselae en gatos callejeros y de albergue en Zaragoza, España / Molecular epidemiology of Bertonella Henselae in stray and sheltered cats of Zaragoza, Spain

Fundamentos: Bartonella henselae produce la enfermedad del arañazo del gato en las personas y se considera infradiagnosticada. El objetivo fue detectar y cuantificar la carga de ácido desoxiribonucleico (ADN) de B. henselae en muestras de sangre y orales de gatos callejeros y de albergue de Zaragoza, España y analizar su relación con factores epidemiológicos y clínicos. Métodos: Se estudiaron 47 gatos. El ADN de B. henselae,se detectó mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) en sangre y muestras orales. Se usó el paquete estadístico SPSS para analizar la positividad de las muestras pareadas y su relación con factores epidemiológicos (edad, sexo, origen, mes de muestreo, presencia de pulgas/garrapatas) y clínicos (estado de salud y presencia de lesiones orales). Se realizó un análisis de regresión logística para conocer la asociación entre la presencia en sangre y cavidad oral y el resto de las variables. Resultados: el 23,40% de las muestras de sangre y el 27,65% de las orales portaba el ADN de B. henselae. Se observó débil correlación de la positividad de las muestras pareadas (kappa= 0,33; p <0,05). No se detectó asociación estadística (p>0,05) entre la presencia de ADN de B. henselae en las muestras y los factores epidemiológicos y clínicos. Los gatos con lesiones orales portaban una carga más elevada de ADN (3,12/1x106 células) en la boca que los que no tenían lesiones (2,58 /1por106 células), (p=0,032). Conclusiones: La detección de ADN de B. henselae en sangre no parece estar relacionada con su presencia en cavidad oral y viceversa. Los gatos positivos con lesiones orales pueden significar mayor riesgo de infección por B. henselae para las personas que los manejan (AU)

Background: Bartonella henselae is responsible for the Cat Scratch Disease in humans, being it underdiagnosed. This study aims to detect and quantify the load of B. henselae DNA in oral and whole blood samples from stray and shelthered cats from Zaragoza (Spain), and analyze associations with epidemiological and clinical factors. Methods: 47 cats entered in the estudy. Real time PCR was used to detect B. henselae DNA in blood and oral samples. The SPSS software was applied to the statistical analysis of positivity of paired samples and its relationship with variables as age, sex, origin, month of sampling and fleas/ticks observation in fur and clinical factors (health status and observation of oral lesions). Logistic Regression was used. Results: a 23.40% of blood samples and the 27.65% of the oral swabs carried the B. henselae DNA. A fair agreement between paired samples was observed (kappa value = 0.33, p<0.05). Bacterial DNA detected in oral and blood samples were not significantly associated to any of the epidemiological and clinical factors. Positive cats having oral lesions carried higher loads (3,12 / 1x106 cells) of bacterial DNA in their oral cavity than those without lesions (2,58/1x106 cells) being p = 0.032. Conclusions: Carriage of the B. henselae DNA in the blood samples appears not to be related with carriage of the DNA of the bacteria in mouth and vice versa. Positive cats having oral lesions carry a higher load of B. henselae DNA and may suppose a higher risk of transmission to people handling them (AU)