Histological analysis of elastic cartilages treated with alkaline solution / Análise histológica de cartilagens elásticas tratadas com solução alcalina

The elastic cartilage is composed by chondroblasts and chondrocytes, extracellular matrix and surrounded by perichondrium. It has a low regeneration capacity and is a challenge in surgical repair. One of obstacles in engineering a structurally sound and long-lasting tissue is selecting the most appropriate scaffold material. One of the techniques for obtaining biomaterials from animal tissues is the decellularization that decreases antigenicity. In this work, alkaline solution was used in bovine ear elastic cartilages to evaluate the decellularization and the architecture of the extracellular matrix. The cartilages were treated in alkaline solution (pH13) for 72 hours and lyophilized to be compared with untreated cartilages by histological analysis (hematoxylin-eosin, Masson's trichrome and Verhoeff slides). Areas of interest for cell counting and elastic fiber quantification were delineated, and the distribution of collagen and elastic fibers and the presence of non-fibrous proteins were observed. The results demonstrated that the alkaline solution caused 90% decellularization in the middle and 13% in the peripheral region, and maintenance of the histological characteristics of the collagen and elastic fibers and non-fibrous protein removal. It was concluded that the alkaline solution was efficient in the decellularization and removal of non-fibrous proteins from the elastic cartilages of the bovine ear.(AU)

A cartilagem elástica é composta por condroblastos e condrócitos, matriz extracelular e envolta por pericôndrio. Possui uma baixa capacidade de regeneração e é um desafio em reparos cirúrgicos. Um dos obstáculos na engenharia de tecido estruturalmente sólido e de longa duração é a seleção do material de arcabouço mais adequado. Uma das técnicas para obtenção de biomateriais oriundos de tecidos animais é a descelularização, que diminui a antigenicidade. Neste trabalho, foi utilizada solução alcalina em cartilagem elástica auricular bovina para avaliar a descelularização e a arquitetura da matriz extracelular. As cartilagens foram tratadas em solução alcalina (pH13) durante 72 horas e liofilizadas, e comparadas com cartilagens não tratadas por análise histológica (hematoxilina-eosina, tricrômio de Masson e Verhoeff). Foram determinadas as áreas de interesse para contagem celular e quantificação de fibras elásticas, observada a distribuição de colágeno e fibras elásticas e a presença de proteínas não fibrosas. Os resultados demonstraram que a solução alcalina causou 90% de descelularização na região central e 13% na região periférica, manutenção das características histológicas do colágeno e fibras elásticas e remoção das proteínas não fibrosas. Concluiu-se que a solução alcalina foi eficiente na descelularização e retirada de proteínas não fibrosas de cartilagens elásticas da orelha de bovinos.(AU)

Estimates of genomic heritability and genome-wide association study for fatty acids profile in Santa Inês sheep.

BACKGROUND: Despite the health concerns and nutritional importance of fatty acids, there is a relative paucity of studies in the literature that report genetic or genomic parameters, especially in the case of sheep populations. To investigate the genetic architecture of fatty acid composition of sheep, we conducted genome-wide association studies (GWAS) and estimated genomic heritabilities for fatty acid profile in Longissimus dorsi muscle of 216 male sheep. RESULTS: Genomic heritability estimates for fatty acid content ranged from 0.25 to 0.46, indicating that substantial genetic variation exists for the evaluated traits. Therefore, it is possible to alter fatty acid profiles through selection. Twenty-seven genomic regions of 10 adjacent SNPs associated with fatty acids composition were identified on chromosomes 1, 2, 3, 5, 8, 12, 14, 15, 16, 17, and 18, each explaining ≥0.30% of the additive genetic variance. Twenty-three genes supporting the understanding of genetic mechanisms of fat composition in sheep were identified in these regions, such as DGAT2, TRHDE, TPH2, ME1, C6, C7, UBE3D, PARP14, and MRPS30. CONCLUSIONS: Estimates of genomic heritabilities and elucidating important genomic regions can contribute to a better understanding of the genetic control of fatty acid deposition and improve the selection strategies to enhance meat quality and health attributes.

In vivo biocompatibility of nanostructured Chitosan/Peo membranes / Biocompatibilidade in vivo de membranas nanoestruturadas de Quitosana/Peo

Electrospinning is a technique that allows the preparation of nanofibers from various materials. Chitosan is a natural and abundant easily obtained polymer, which, in addition to those features, proved to be biocompatible. This work used nanostructured chitosan and polyoxyethylene membranes as subcutaneous implants in Wistar rats to evaluate the biocompatibility of the material. Samples of the material and tissues adjacent to the implant were collected 7, 15, 30, 45 and 60 days post-implantation. Macroscopic integration of the material to the tissues was observed in the samples and slides for histopathological examination that were prepared. It was noticed that the material does not stimulate the formation of adherences to the surrounding tissues and that there is initial predominance of neutrophilia and lymphocytosis, with a declining trend according to the increase of time, featuring a non-persistent acute inflammatory process. However, the material showed fast degradation, impairing the macroscopic observation after fifteen days of implantation. It was concluded that the material is biocompatible and that new studies should be conducted, modifying the time of degradation by changes in obtaining methods and verifying the biocompatibility in specific tissues for biomedical applications.

A eletrofiação é uma técnica que permite a preparação de nanofibras mediante o uso de diversos materiais. A quitosana é um polímero natural, abundante e de fácil obtenção, que, além dessas características, demonstrou ser biocompatível. Este trabalho utilizou membranas nanoestruturadas de quitosana e polióxido de etileno como implantes subcutâneos em ratos Wistar para avaliar a biocompatibilidade do biomaterial. As amostras do material e de tecidos adjacentes ao implante foram retiradas sete, 15, 30, 45 e 60 dias pós-implantação para a observação da integração macroscópica do material aos tecidos e para a preparação de lâminas para exame histopatológico. Verificou-se que o material não estimula a formação de aderências com os tecidos circunvizinhos e que há predominância inicial de neutrofilia e linfocitose, que tendem a decrescer em razão do aumento do tempo, caracterizando um processo inflamatório agudo não persistente. No entanto, o material apresentou degradação rápida, não sendo possível observá-lo macroscopicamente após 15 dias de implantação. Concluiu-se que o material é biocompatível, o que indica que novos estudos devem ser conduzidos, com modificação do tempo de degradação por alterações nos métodos de obtenção e verificação da biocompatibilidade em tecidos específicos para aplicações biomédicas.

Emprego da microscopia eletrônica na avaliação pós-vacinal de epitélio traqueal de patos (Anas platyrhynchos) imunizados contra a doença de Newcastle / The use of scanning electron microscopy in post-vaccinal evaluation of tracheal epithelium in ducks (Anas platyrhynchos) imunized against Newcastle disease

Avaliou-se o emprego da microscopia eletrônica de varredura no estudo da reação respiratória pós-vacinal em epitélio traqueal de patos (Anas platyrhynchos) imunizados contra a doença de Newcastle. Foram utilizadas 48 aves, distribuídas em quatro grupos: T1 - grupo de aves-controle (não vacinadas), T2 - grupo de aves vacinadas com a estirpe Ulster 2C, T3 - grupo de aves vacinadas com a estirpe B1 e T4 - grupo de aves vacinadas com a estirpe LaSota. Independente do grupo experimental, as aves não apresentaram sinais clínicos detectáveis de reação respiratória pós-vacinal. Ao microscópio eletrônico de varredura, observou-se que os animais vacinados com as estirpes B1 e LaSota desenvolveram descamação epitelial da traqueia, enquanto os vacinados com a estirpe Ulster 2C não, mostrando um epitélio traqueal íntegro, semelhante ao do grupo-controle. Os patos vacinados com a estirpe B1 mostraram evidências de regeneração epitelial da traqueia decorridos 21 dias pós-vacinação, o que não ocorreu com os vacinados com a amostra LaSota.

Scanning electron microscopy was used in the study of the post-vaccinal respiratory reaction of the tracheal epithelium of ducks (Anas platyrhynchos) immunized against Newcastle disease. Forty-eight ducks were distributed into four groups: T1 - control birds (non-vaccinated); T2 - birds vaccinated with Ulster 2C strain; t3 - birds vaccinated with B1 strain; and t4 - birds vaccinated with LaSota strain. Regardless the experimental group, birds did not show detectable clinical signs of post-vaccinal respiratory reaction. Scanning electron microscopy showed that birds vaccinated with B1 and LaSota strains developed epithelial sloughing of the trachea, whereas those vaccinated with Ulster 2C strain did not develop this change, showing intact tracheal epithelium, similar to the control group. However, the birds vaccinated with B1 strain showed evidences of regeneration of tracheal epithelium 21 days post-vaccination, which did not happen with the ducks vaccinated with LaSota strain.

Morphometric study of Rynchotus rufescens testis throughout the year.

The research aimed to study the morphologic variation of the testis, seeking to promote the selection and genetic control of those that present appreciable spermatic production throughout the year. Testis morphology of the Rynchotus rufescens partridge was investigated, analyzing the testis weight, the seminiferous tubules diameter, the thickness of the seminiferous epithelium, the amount of meiotic figures and the thickness of the tunica albuginea. Sixty male partridges were used, divided in 12 groups, and one group per month had the testis collected for the histological routine and the sections were stained using the Hematoxilin-Eosin technique. For the histological sections analysis, morphometric measures were taken, with the aid of an Image Analyzer and the resulting data were submitted to analysis of variance and to Tukey's test. Based on the histological modifications of the seminiferous epithelium and the morphometric analysis, the partridge testis morphology could be divided in four successive phases throughout the year. The reproductive phase occurred in the spring, characterized by the complete spermatogenesis process. The regression phase occurred in the summer, with the involution of the seminiferous epithelium. The rest phase took place in the fall, with spermatogonias presence and some spermatocytes beginning the meiosis. The phase of recrudescence occurred in the winter, with the recovery of the seminiferous epithelium and absence of spermatozoa. In conclusion, the characteristics analyzed revealed a variation over the year, with greater production of spermatozoa in the spring and less in the winter.

Morphometric study of Rynchotus rufescens testis throughout the year

The research aimed to study the morphologic variation of the testis, seeking to promote the selection and genetic control of those that present appreciable spermatic production throughout the year. Testis morphology of the Rynchotus rufescens partridge was investigated, analyzing the testis weight, the seminiferous tubules diameter, the thickness of the seminiferous epithelium, the amount of meiotic figures and the thickness of the tunica albuginea. Sixty male partridges were used, divided in 12 groups, and one group per month had the testis collected for the histological routine and the sections were stained using the Hematoxilin-Eosin technique. For the histological sections analysis, morphometric measures were taken, with the aid of an Image Analyzer and the resulting data were submitted to analysis of variance and to Tukey's test. Based on the histological modifications of the seminiferous epithelium and the morphometric analysis, the partridge testis morphology could be divided in four successive phases throughout the year. The reproductive phase occurred in the spring, characterized by the complete spermatogenesis process. The regression phase occurred in the summer, with the involution of the seminiferous epithelium. The rest phase took place in the fall, with spermatogonias presence and some spermatocytes beginning the meiosis. The phase of recrudescence occurred in the winter, with the recovery of the seminiferous epithelium and absence of spermatozoa. In conclusion, the characteristics analyzed revealed a variation over the year, with greater production of spermatozoa in the spring and less in the winter.

O trabalho teve como objetivo estudar a variação morfológica do testículo, visando promover a seleção e o controle genético de exemplares que apresentem produção espermática apreciável ao longo do ano. A morfologia testicular de perdiz Rynchotus rufescens foi avaliada, analisando o peso do testículo, o diâmetro dos túbulos seminíferos, a espessura do epitélio seminífero, o número de figuras de meiose e a espessura da túnica albugínea. Foram utilizados 60 machos de perdizes, divididos em 12 grupos, sendo que um grupo por mês teve os testículos coletados para a rotina histológica e foram corados pela técnica de Hematoxilina-Eosina. Para a análise dos cortes histológicos, foram realizadas medidas morfométricas, com o auxílio de um Analisador de Imagem e os dados encontrados foram submetidos à análise de variância e teste de Tukey. Baseado nas modificações histológicas do epitélio seminífero e na análise morfométrica, a morfologia testicular da perdiz pôde ser dividida em quatro fases sucessivas ao longo do ano. A fase reprodutiva ocorreu na primavera, caracterizando-se pelo completo processo de espermatogênese. A fase de regressão aconteceu no verão, ocorrendo involução do epitélio seminífero. No outono ocorreu a fase de repouso, com a presença de espermatogônias e alguns espermatócitos em início de meiose, já a fase de recrudescência da perdiz aconteceu no inverno, com a recuperação do epitélio seminífero e ausência de espermatozóides. Em conclusão, as características analisadas revelaram uma variação durante o ano, com maior produção de espermatozóides na primavera e menor produção no inverno.