Public spaces and physical activity in adults: insights from a mixed-methods study.

Public spaces could promote health equity by providing a place for people to engage in physical activity. Whereas most studies show a positive association between public spaces and physical activity, there are still mixed results, especially in low- and middle-income countries. The objectives of this mixed-methods study were: (i) to assess the quantitative association between access to public spaces and physical activity; (ii) to assess the modification of the association by public spaces quality, area-level walkability, and social stratifiers; (iii) to explain the quantitative results using qualitative data. Quantitative data were obtained with a household survey in two arid-climate Mexican cities in 2017-2018. physical activity was measured with the Global Physical Activity Questionnaire. Access to public spaces was measured in buffers centered on survey blocks, walkability with area-level indicators, and public spaces quality with the Physical Activity Resources Assessment. Qualitative data were obtained with semi-structured interviews and neighborhood observation. No quantitative association between access to public spaces and physical activity was found, as well as no interactions between access to public spaces and other variables. Walkability was positively associated with physical activity. Qualitative analysis showed that local public spaces were rarely used by adults because they were perceived as small, unequipped, unattractive, and unsafe. The results shed light on the relationship between public spaces and physical activity, highlighting the improvements in design and upkeep of public spaces that are necessary to achieve their potential health benefit.

Public spaces and physical activity in adults: insights from a mixed-methods study / Espacios públicos y actividad física en adultos: reflexiones de un estudio de métodos combinados / Espaços públicos e atividade física em adultos: um estudo de métodos mistos

Abstract: Public spaces could promote health equity by providing a place for people to engage in physical activity. Whereas most studies show a positive association between public spaces and physical activity, there are still mixed results, especially in low- and middle-income countries. The objectives of this mixed-methods study were: (i) to assess the quantitative association between access to public spaces and physical activity; (ii) to assess the modification of the association by public spaces quality, area-level walkability, and social stratifiers; (iii) to explain the quantitative results using qualitative data. Quantitative data were obtained with a household survey in two arid-climate Mexican cities in 2017-2018. physical activity was measured with the Global Physical Activity Questionnaire. Access to public spaces was measured in buffers centered on survey blocks, walkability with area-level indicators, and public spaces quality with the Physical Activity Resources Assessment. Qualitative data were obtained with semi-structured interviews and neighborhood observation. No quantitative association between access to public spaces and physical activity was found, as well as no interactions between access to public spaces and other variables. Walkability was positively associated with physical activity. Qualitative analysis showed that local public spaces were rarely used by adults because they were perceived as small, unequipped, unattractive, and unsafe. The results shed light on the relationship between public spaces and physical activity, highlighting the improvements in design and upkeep of public spaces that are necessary to achieve their potential health benefit.

Resumen: Los espacios públicos podrían promover la equidad en salud, proporcionando un lugar para que todas las personas practiquen actividades físicas. Mientras que la mayoría de los estudios muestran una asociación positiva entre espacios públicos y actividades físicas, existen todavía resultados mixtos, especialmente en países de ingresos medios y bajos. Los objetivos de estos métodos combinados fueron: (i) evaluar la asociación cuantitativa entre el acceso a espacios públicos y actividades físicas; (ii) evaluar la modificación de la asociación por la calidad de los espacios públicos, nivel de transitabilidad del área y estratificadores sociales; (iii) explicar resultados cuantitativos usando datos cualitativos. Los datos cuantitativos se obtuvieron a través de una encuesta por hogares en dos ciudades mejicanas de clima árido en 2017-2018. La actividad física se midió mediante el Cuestionario Mundial sobre Actividad Física. El acceso a los espacios públicos se midió con áreas de influencia centradas en encuestas por bloques, la transitabilidad según indicadores de nivel del área, y la calidad de los espacios públicos con la Physical Activity Resources Assessment [Evaluación de Recursos de Actividad Física]. Los datos cualitativos se obtuvieron a través de entrevistas semiestructuradas y observación del barrio. No hallamos ninguna asociación cuantitativa entre el acceso a los espacios públicos y actividades físicas, ni tampoco interacciones entre el acceso a espacios públicos y otras variables. La transitabilidad estuvo positivamente asociada con actividades físicas. El análisis cualitativo mostró que los espacios públicos locales eran raramente usados por adultos, porque los percibían como pequeños, faltos de equipamiento, poco atractivos e inseguros. Los resultados clarificaron la relación entre espacios públicos y actividades físicas, y resaltaban las mejoras en el diseño y el mantenimiento de los espacios públicos que se necesitan para lograr beneficios potenciales en la salud de la población.

Resumo: Os espaços públicos podem promover a equidade na saúde, ao prover um lugar para todas as pessoas praticarem atividades físicas. A maioria dos estudos mostra uma associação positiva entre espaços públicos e atividade física, mas ainda há resultados conflitantes, principalmente em países de renda baixa e média. Os objetivos deste estudo de métodos mistos foram: (i) avaliar a associação quantitativa entre o acesso aos espaços públicos e atividade física; (ii) avaliar a modificação da associação pela qualidade dos espaços públicos, a caminhabilidade das áreas e fatores de estratificação social; e (iii) explicar os resultados quantitativos com base nos dados qualitativos. Os dados quantitativos foram obtidos com um inquérito domiciliar em duas cidades do semiárido mexicano em 2017-2018. A atividade física foi medida com o Questionário Global de Atividade Física. Os autores mediram o acesso aos espaços públicos com buffers centrados nos quarteirões do inquérito, a caminhabilidade com indicadores em nível de área e a qualidade dos espaços públicos com a Physical Activity Resources Assessment [Avaliação de Recursos de Atividade Física]. Os dados qualitativos foram obtidos com entrevistas semiestruturadas e observação dos bairros. Não foi encontrada associação quantitativa entre acesso aos espaços públicos e atividade física, ou interações entre o acesso aos espaços públicos e outras variáveis. A caminhabilidade mostrou associação positiva com atividade física. A análise qualitativa mostrou que os espaços públicos locais eram usados raramente por adultos, porque eram percebidos como pequenos, sem equipamentos, pouco atraentes e inseguros. Os resultados ajudam a entender a relação entre os espaços públicos e atividade física, e destacam as melhorias no desenho e na manutenção dos espaços públicos que são necessárias para realizar os benefícios para a saúde da população.

Unexplored Genetic Diversity of Multidrug- and Extremely Drug-Resistant Acinetobacter baumannii Isolates from Tertiary Hospitals in Honduras.

Although Acinetobacter baumannii has become one of the most important nosocomial pathogens worldwide, very little is known about the genetic identity of isolates from less developed countries in Latin America. To alleviate this, we sequenced the genomes of 16 A. baumannii isolates from Honduras. Whole-genome sequencing was conducted on 16 isolates from five Honduran Hospitals. With the sequences of these Honduran isolates and other 42 publically available genomes, a maximum likelihood phylogeny was constructed to establish the relationship between the Honduran isolates and those belonging to the International Clones (ICs). In addition, sequence type (ST) assignation was conducted by the PubMLST, and antibiotic resistance genes were identified using ResFinder. The Honduran isolates are highly diverse and contain new allele combinations under the Bartual multilocus sequence typing scheme. The most common STs were STB447/STP10 and STB758/STP156. Furthermore, none of these isolates belongs to clonal complexes related to the ICs. Antibiotic susceptibility profiles of these isolates showed that they are multidrug resistant (MDR) or extensively drug resistant (XDR). In addition, the Honduran isolates had genes involved in resistance to seven antibiotic families. For instance, several blaOXA alleles were found, including blaOXA-23 and a gene encoding the metallo-beta-lactamase NDM-1. Notably, nine of the Honduran isolates have antibiotic resistance genes to three or more antibiotic families. In summary, in this study, we unveiled an untapped source of genetic diversity of MDR and XDR isolates; notably, these isolates did not belong to the well-known ICs.

Dosis única de la vacuna oral de la cepa viva atenuada 638 de Vibrio cholerae essegura e inmunogénica en voluntarios adultos en Mozambique / A single dose of live-attenuated 638 Vibrio cholerae oral vaccine is safe and immunogenic in adult volunteers in Mozambique

Se realizó un ensayo clínico controlado con placebo, aleatorizado y a doble ciego, para evaluar la seguridad, reactogenicidad e inmunogenicidad del candidato vacunal liofilizado contra el cólera de la cepa viva atenuada 638 de V. cholerae O1 El Tor Ogawa. Se incluyeron 120 voluntarios de ambos sexos, aparentemente sanos, entre 18 y 50 años de edad, en Maputo, Mozambique, un área endémica de cólera, donde la seroprevalencia del virus de inmunodeficiencia humana (VIH) es de 20 por ciento a 30 por ciento. Ochenta sujetos recibieron como tratamiento una dosis oral de 2 x 10 9 UFC del candidato vacunal 638 y otros 40 una dosis del placebo que contenía solo los lioprotectores. Se realizó seguimiento ambulatorio de los eventos adversos durante 30 días. La respuesta inmune se evaluó por medio de la estimación de la tasa de seroconversión y la media geométrica del título (MGT) de anticuerpos vibriocidas en los sueros de los voluntaries, antes y a los 14 y 21 días posteriores a la inmunización. No se reportaron eventos adversos graves. La incidencia de eventos adversos reportados en el grupo que recibió la vacuna fue similar al del grupo placebo. Los eventos adversos encontrados fueron independientes de la detección de anticuerpos contra el VIH-1, VIH-2, hepatitis (H) A, HC y el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B. La presencia de helmintos no modificó la incidencia de eventos adversos. La cepa vacunal fue aislada en 37 (46,25 por ciento) voluntarios que recibieron la vacuna. A los 14 días el pico de la MGT de anticuerpos vibriocidas en el grupo de la vacuna fue de 9056 frente a 39 en el grupo placebo, con una seroconversión total de 97,4 por ciento a los 21 días. Se concluye que el candidato vacunal 638 es seguro e inmunogénico en una región endémica de cólera(AU)

A placebo-controlled randomized, double-blind, clinical trial was carried out to assess the safety, reactogenicity,and immunogenicity of the lyophilized vaccine candidate against cholera derived from the live attenuated 638Vibrio cholerae O1 El Tor Ogawa strain. One hundred and twenty presumably healthy female and male adultvolunteers aged between 18 and 50 years were included. They were from Maputo, Mozambique a cholera endemicarea, where, in addition, human immunodeficiency virus (HIV) seroprevalence is from 20 to 30 percent A dose of 2 x 109 colony forming units (CFU) was given to 80 subjects and other 40 received only vaccine lyoprotectors as a placebocontrol. Out-patient follow-up of adverse events was carried out during the following 30 days after vaccination.The immune response was evaluated by the estimation of seroconversion rate and the geometric mean titer(GMT) of vibriocidal antibodies in the sera from volunteers that was collected previously, and at days 14 and 21after immunization. No serious adverse events were reported. The adverse events found in the vaccine groupwere similar to those of the placebo groups. They were independent from the detection of antibodies againstHIV-1, HIV-2, hepatitis (H) A; HC and hepatitis B surface antigen. The presence of helminthes did not modify the incidence of adverse events. The 638 vaccine strain was isolated in 37 (46,25 percent) vaccinated volunteers feces. The peak of the GMT of vibriocidal antibodies in the vaccine group was 9056 versus 39 in the placebo group at 14 dayswith a total seroconversion of 97,4 percent at 21 days. The 638 vaccine candidate is safe and immunogenic in a cholera endemic region(AU)

Nuevos enfoques sobre la aplicación de vacunas orales contra el cólera / New approaches to the implementation of oral cholera vaccines

El cólera constituye un problema de salud para muchos países en el mundo: las elevadas tasas de morbilidad y mortalidad registradas en los últimos años inquietan a la comunidad científica, pues el aumento de su incidencia podría generar una crisis global en su control. Existen factores claves en su reemergencia, entre ellos están el debilitamiento general de las actividades de salud pública, sobre todo las involucradas en la vigilancia y el deterioro de los laboratorios encargados de identificar cuanto antes a los microorganismos emergentes, así como la circulación en África y Asia de nuevas cepas de Vibrio cholerae O1 El Tor, las que producen la toxina del cólera clásico y reemplazan a la original del biotipo El Tor, ocasionando manifestaciones clínicas más graves, situación que representa un obstáculo importante para el control de esta enfermedad. En la lucha contra ésta en casos de desastre, la Organización Mundial de la Salud no recomienda el uso de las vacunas actuales, porque ocurre una rápida disminución en la protección, lo que da un sentido falso de la seguridad, debiéndose dirigir los recursos a los métodos de control más útiles. Dada la repercusión global que implica la reemergencia del cólera, en este trabajo se exponen algunos aspectos epidemiológicos, así como consideraciones en torno a las medidas de prevención y el control de esta entidad clínica, a partir de la revisión de diferentes fuentes de información actualizadas y la exposición de nuevos conceptos sobre su control, observaciones que serán de utilidad e interés para profesionales de todos los niveles de la atención sanitaria(AU)

Cholera is a health problem for many countries in the world. The high morbidity and mortality rates observed recently have concerned the scientific community, since the increase of the incidence of this disease could generate a global crisis in its control. Key factors in the reemergence of Cholera are: the general weakening of public health activities, especially those involved in the monitoring and deterioration of the laboratories responsible for early identification of emerging microorganisms as well as the circulation of new strains of Vibrio cholerae O1 El Tor in Africa and Asia, which produces the classical cholera toxin and replaces the original one of El Tor biotype, causing more severe clinical manifestations, which represents a major obstacle to control this disease. In the fight against this disease during the occurrence of disasters, the World Health Organization (WHO) does not recommend the use of existing vaccines against cholera because a rapid decline of protection occurs; giving a false sense of safety so resources must be directed to the most useful control methods. Due to the global impact the re-emergence of cholera involves, some epidemiological aspects and considerations on prevention and control of this clinical entity are presented in this article, starting by the review of different updated information sources and the presentation of new concepts on its control, which will be useful and interesting for health care professionals(AU)

Randomized, double-blind, placebo-controlled trial to evaluate the safety and immunogenicity of live oral cholera vaccine 638 in Cuban adults.

A randomized, double-blind, placebo-controlled clinical trial was conducted to evaluate the safety, reactogenicity and the immunogenicity of a 2 x 10(9)CFU dose of the 638 lyophilized live attenuated cholera vaccine for oral administration, formulated and produced at Finlay Institute, City of Havana, Cuba. Thirty-six healthy female and male adult volunteers from 18 to 40 years old were involved, clinically examined and laboratory tested after the informed consent signature. Adverse events were monitored and seroconversion rates and geometrical mean titer (GMT) of vibriocidal antibodies were tested in volunteer's sera samples. Neither serious adverse events nor other damages to the volunteers due to vaccine or placebo feeding were reported during the clinical follow-up period of this study; none of the adverse events registered within the first 72 h after inoculation were life-threatening for volunteers. Neither severe nor moderate adverse events were reported. Sixty-one percent of subjects showed mild expected adverse events in an interval lower than 24h up to the first 72 h, 75% of these in the vaccinated group and 18% in the placebo group. Fourteen days after inoculation the GMT of vibriocidal antibodies in the vaccine group significantly increased in comparison to the placebo group. All subjects in the vaccine group (24) seroconverted (100%). Results show that this vaccine is safe, well tolerated and immunogenic in healthy female and male volunteers.

Propuesta de un algoritmo para evaluar la causalidad de eventos adversosen los Ensayos Clínicos de Vacunas / Proposal of an algorithm to assess causality of adverse events in vaccine clinical trials

En el transcurso de los ensayos clínicos usualmente se designa a una comisión, la cual se encarga de evaluar la causalidad de los eventos adversos que se reportan y transcriben en los cuadernos de recogida de datos. Para llegar a contestar la pregunta de: ¿si una vacuna que se está estudiando ha causado un evento adverso?, los decisores pueden tomar diferentes caminos, por lo que obviamente la conclusión final podría variar mucho y la evaluación deficiente puede generar conclusiones erróneas, lo que confirma la necesidad de disponer de un procedimiento para definir lascategorías que se utilizarán para analizar y clasificar la relación de causalidad. Una forma de contestar a la pregunta es mediante la construcción de un algoritmo. En relación con los ensayos clínicos no encontramos en la literatura un algoritmo que sea el patrón clave para establecer o descartar la causalidad, sin embargo es factible diseñarlo partiendo de la metodología internacional utilizada poscomercialización, lo cual fue el propósito de este trabajo. Se diseñó una primera propuesta que fue analizada individual y colectivamente por el grupo multidisciplinario de la Gerencia Médica del Instituto Finlay. Finalmente se aprobó por consenso el algoritmo que puede ser útil para aplicar en los ensayos clínicos dentro y fuera de la institución(AU)

During clinical trials it is common to appoint a commission which is in charged of assessing the causality of adverse events which are reported and transcribed to the collection data logbooks. To be able to answer the question: Does the vaccine understudy cause an adverse event.? different pathways could be taken by decision makers, so it is obvious that the final conclusion could vary too much and a poorly assessment can generate mistaken conclusions. That confirms the need of having a procedure to define which categories must be used to analyze and to classify the relation of causality. To create an algorithm isone answer to the question. We reviewed the literature and did not find any algorithm which could be considered a master key to set or to reject causality, so this paper aims at designing an algorithm beginning with the international methodology used in post commercialization. A first proposal was designed which was individually and collectively analyzed by the multidisciplinary group of the Medical Management from Finlay Institute. Finally, the proposed algorithm was approved by consensus, which could be useful to apply in clinical trials inside and outside of the institution(AU)

Biomodelo para la evaluación de cepas atenuadas como candidatosvacunales contra el cólera humano I: estudio de la virulencia, capacidadde colonización y adherencia a la mucosa intestinal / Biomodel for evaluating attenuated Vibrio cholerae strains as human cholera vaccine candidates I: virulence, colonizing capacity and adherence to the intestinal mucosa

El cólera continúa siendo en muchos países un problema para la salud humana, manteniéndose como una enfermedad epidémica o endémica que afecta tanto a niños como adultos y causa la muerte en casos no tratados. Una vacuna viva oral contra esta enfermedad puede ser la solución. En el presente trabajo se seleccionó y aplicó un biomodelo para la evaluación de cepas atenuadas genéticamente de Vibrio cholerae como candidatas vacunales contra el cólera. La virulencia, capacidad de colonización y adherencia a la mucosa intestinal de las cepas fueron evaluadas mediante el usode ratones neonatos de 2 a 4 días de nacidos de la línea Balb/c, con un peso entre 1,5-2 g. Los resultados obtenidos con este biomodelo demostraron que las cepas atenuadas genéticamente son no virulentas, colonizan y se adhieren a lamucosa intestinal. Se concluye que el biomodelo utilizado permite la evaluación y selección de cepas candidatas para vacunas vivas orales contra el cólera(AU)

Cholera is still a human health problem in many countries. It is an epidemic or endemic disease affecting both children and adults that causes death of untreated cases. A live oral vaccine could be the solution against this disease. In the present study a biomodel was selected and applied for the evaluation of genetically attenuated Vibrio cholerae strains as vaccinecandidates. The virulence, colonizing capacity and adherence to the intestinal mucosa of the strains were evaluated using 2-4 day-old neonatal Balb/c mice, weighing from 1.5-2 g. The results obtained with this biomodel showed that genetically attenuated strains are not virulent, colonize and adhere to the intestinal mucosa. The conclusion was that the biomodel used allows the evaluation and selection of candidate strains for live oral cholera vaccines(AU)

Selección de cepas atenuadas de Vibrio cholerae para la obtención de candidatos vacunales atenuados orales contra el cólera / Selection of attenuated Vibrio cholerae strains to obtain oral attenuated candidate vaccines against cholera

Se desarrolló una metodología para la selección de cepas de Vibrio cholerae O1 y O139 modificadas genéticamente, con el objetivo de obtener candidatos vacunales atenuados orales contra el cólera. A las cepas modificadas se les realizó caracterización microbiológica, susceptibilidad bacteriana y diferentes pruebas biológicas (dosis letal media, capacidad colonizadora, adherencia en ratones, intestino ligado e inoculación intraduodenal en conejos como pruebas de virulencia y potencia). Las cepas 81, 638, 638T y 1333 fueron evaluadas en ensayos clínicos para determinar su reactogenicidad e inmunogenicidad. Todas las cepas fueron sensibles a la tetraciclina y doxiclicina y mostraron su atenuación e inmunogenicidad en modelos animales, resultando las cepas 638 y 1333 inmunogénicas y no reactogénicas en voluntarios

Utilización de indicadores ambientales para la prevención del dengue en la habana vieja / Utilization of environmental indicators for the prevention of dengue in Old Havana

El objetivo del presente trabajo fue probar indicadores ambientales para la prevención del dengue en el municipio La Habana Vieja, en Ciudad de La Habana. Se emplearon 5 indicadores ambientales, para los cuales fue evaluada la disponibilidad, calidad y comparabilidad de los datos en espacio y tiempo. Se realizó un estudio descriptivo durante 12 ciclos de igual número de días cada uno, en 2 etapas de la fase de aseguramiento de la campaña de lucha antivectorial en los años 2002 y 2004, respectivamente. El universo lo constituyeron todas las áreas de salud del municipio en estudio. Para la mayoría de los indicadores los datos estaban disponibles, se encontraron identificadas las principales limitaciones que afectaban su calidad y fueron comparables en espacio y tiempo. El indicador en el que se obtuvieron peores resultados fue el de vertimientos de aguas albañales por más de 7 días. En este municipio las áreas de salud de peor calidad ambiental fueron “Robert Manuel Zulueta”, “Diego Tamayo” y “Ángel Arturo Aballí”

Selección de cepas atenuadas de Vibrio cholerae para la obtención de candidatos vacunales atenuados orales contra el cólera / Selection of attenuated Vibrio cholerae strains to obtain oral attenuated candidate vaccines against cholera

Se desarrolló una metodología para la selección de cepas de Vibrio cholerae O1 y O139 modificadas genéticamente, con el objetivo de obtener candidatos vacunales atenuados orales contra el cólera. A las cepas modificadas se les realizó caracterización microbiológica, susceptibilidad bacteriana y diferentes pruebas biológicas (dosis letal media, capacidad colonizadora, adherencia en ratones, intestino ligado e inoculación intraduodenal en conejos como pruebas de virulencia y potencia). Las cepas 81, 638, 638T y 1333 fueron evaluadas en ensayos clínicos para determinar su reactogenicidad e inmunogenicidad. Todas las cepas fueron sensibles a la tetraciclina y doxiclicina y mostraron su atenuación e inmunogenicidad en modelos animales, resultando las cepas 638 y 1333 inmunogénicas y no reactogénicas en voluntarios(AU)

Utilización de indicadores ambientales para la prevención del dengue en la habana vieja / Utilization of environmental indicators for the prevention of dengue in Old Havana

El objetivo del presente trabajo fue probar indicadores ambientales para la prevención del dengue en el municipio La Habana Vieja, en Ciudad de La Habana. Se emplearon 5 indicadores ambientales, para los cuales fue evaluada la disponibilidad, calidad y comparabilidad de los datos en espacio y tiempo. Se realizó un estudio descriptivo durante 12 ciclos de igual número de días cada uno, en 2 etapas de la fase de aseguramiento de la campaña de lucha antivectorial en los años 2002 y 2004, respectivamente. El universo lo constituyeron todas las áreas de salud del municipio en estudio. Para la mayoría de los indicadores los datos estaban disponibles, se encontraron identificadas las principales limitaciones que afectaban su calidad y fueron comparables en espacio y tiempo. El indicador en el que se obtuvieron peores resultados fue el de vertimientos de aguas albañales por más de 7 días. En este municipio las áreas de salud de peor calidad ambiental fueron “Robert Manuel Zulueta”, “Diego Tamayo” y “Ángel Arturo Aballí”(AU)

The Vaccine Candidate Vibrio cholerae 638 Is Protective against Cholera in Healthy Volunteers / s. t

Vibrio cholerae 638 is a living candidate cholera vaccine strain attenuated by deletion of the CTX prophage from C7258 (O1, El Tor Ogawa) and by insertion of the Clostridium thermocellum endoglucanase A gene into the hemagglutinin/protease coding sequence. This vaccine candidate was previously found to be well tolerated and immunogenic in volunteers...(AU)

The vaccine candidate Vibrio cholerae 638 is protective against cholera in healthy volunteers.

Vibrio cholerae 638 is a living candidate cholera vaccine strain attenuated by deletion of the CTXPhi prophage from C7258 (O1, El Tor Ogawa) and by insertion of the Clostridium thermocellum endoglucanase A gene into the hemagglutinin/protease coding sequence. This vaccine candidate was previously found to be well tolerated and immunogenic in volunteers. This article reports a randomized, double-blind, placebo-controlled trial conducted to test short-term protection conferred by 638 against subsequent V. cholerae infection and disease in volunteers in Cuba. A total of 45 subjects were enrolled and assigned to receive vaccine or placebo. The vaccine contained 10(9) CFU of freshly harvested 638 buffered with 1.3% NaHCO(3), while the placebo was buffer alone. After vaccine but not after placebo intake, 96% of volunteers had at least a fourfold increase in vibriocidal antibody titers, and 50% showed a doubling of at least the lipopolysaccharide-specific immunoglobulin A titers in serum. At 1 month after vaccination, five volunteers from the vaccine group and five from the placebo group underwent an exploratory challenge study with 10(9) CFU of DeltaCTXPhi attenuated mutant strain V. cholerae 81. Only two volunteers from the vaccine group shed strain 81 in their feces, but none of them experienced diarrhea; in the placebo group, all volunteers excreted the challenge strain, and three had reactogenic diarrhea. An additional 12 vaccinees and 9 placebo recipients underwent challenge with 7 x 10(5) CFU of virulent strain V. cholerae 3008 freshly harvested from a brain heart infusion agar plate and buffered with 1.3% NaHCO(3). Three volunteers (25%) from the vaccine group and all from the placebo group shed the challenge agent in their feces. None of the 12 vaccinees but 7 volunteers from the placebo group had diarrhea, and 2 of the latter exhibited severe cholera (>5,000 g of diarrheal stool). These results indicate that at 1 month after ingestion of a single oral dose (10(9) CFU) of strain 638, volunteers remained protected against cholera infection and disease provoked by the wild-type challenge agent V. cholerae 3008. We recommend that additional vaccine lots of 638 be prepared under good manufacturing practices for further evaluation.

[Selection of attenuated Vibrio cholerae strains to obtain oral attenuated candidate vaccines against cholera]. / Selección de cepas atenuadas de Vibrio cholerae para la obtención de candidatos vacunales atenuados orales contra el cólera.

A methodology was developed for the selection of genetically modified strains of Vibrio cholerae 01 and 0139 aimed at obtaining oral attenuated candidate vaccines against cholera. The modified strains underwent microbiological characterization, bacterial susceptibility and different biological tests (mean lethal dose, colonizing capacity, adherence in mice, ligated intestine and intraduodenal inoculation in rabbits as virulence and potency tests. The strains 81, 638, 638T and 1333 were evaluated in clinical trials to determine their reactogenicity and immunogenicity. All the strains were sensitive to tetracycline and doxoclycine. They showed their attenuation and immunogenicity in animal models. The strains 638 and 1333 proved to be immunogenic and non reactogenic in volunteers.

Sistema de Lotes de Siembra de la cepa vacunal Vibrio cholerae 638

En la producción de biológicos, especialmente en aquellos obtenidos a partir de microorganismos, resulta imprescindible contar con un suministro de células caracterizado y estable, como punto de partida para la producción. El concepto de Sistema de Lotes de Siembra en dos niveles, en el cual el Lote de Siembra de Referencia es usado para generar el Lote de Siembra de Trabajo, es considerado el enfoque más práctico para lograr este propósito. En este trabajo se elaboraron los Lotes de Siembra de Referencia y de Trabajo de la cepa vacunal Vibrio cholerae 638, primera etapa de la fabricación de una vacuna contra el cólera, cumpliendo con los requerimientos de Buenas Prácticas de Producción (BPP), lo que constituye una exigencia de las autoridadesregulatorias nacionales e internacionales. La caracterización de los lotes demostró que se lograron adecuados niveles de viabilidad y se conservaron inalterables las características de la cepa original en cuanto a identidad, pureza, atenuación de su virulencia, capacidad de colonizar el intestino delgado de ratones lactantes y de inducir una respuesta inmune(AU)

Validación del ensayo Vibriocida colorimétrico para / determinar anticuerpos séricos contra cepas candidatas / vacunales de Vibrio cholerae / Validation of Colorimetric Vibriocidal Assay to Determine Serum Antibodies against Vaccine Candidate Strains of Vibrio Cholerae

El Instituto Finlay posee un grupo de cepas atenuadas candidatas a vacuna oral contra el cólera, las cuales fueron evaluadas desde el punto de vista de su capacidad inmunogénica mediante la determinación de anticuerpos por el método ELISA y principalmente por el ensayo Vibriocida. Este ensayo mide la funcionalidad de los anticuerpos estimulados por la cepa vacunal, por lo que se considera la herramienta más eficaz para medir el estado de la inmunidad en individuos vacunados contra el cólera y constituye el soporte analítico para el desarrollo de la vacuna anticolérica cubana. En este trabajo se evaluaron la precisión, la especificidad y la robustez del ensayo y los resultados obtenidos estuvieron dentro del criterio de aceptación de esta técnica (>50(por ciento) de coincidencia). Se demostró que las variaciones entre las muestras negativas y positivas se debían precisamente al crecimiento de V. cholerae y que se pueden incorporar pequeños cambios al ensayo sin que esto traiga consigo variaciones en el título de la muestra ni falsos resultados. De acuerdo con los resultados obtenidos, el mismo se considera apto para la evaluación de la respuesta inmune estimulada por un candidato vacunal contra el cólera(AU)

Validación de un ensayo ELISA para la determinación de / anticuerpos anti LPS de Vibrio Cholerae / Validation of an ELISA assay to determine antibodies against LPS of Vibrio Cholerae

Para evaluar la respuesta inmunológica de cualquier candidato vacunal es necesario contar en el laboratorio con técnicas estandarizadas y validadas. Es por ello que en este trabajo se realizaron los ensayos para la estandarización del ELISA indirecto, usado para la determinación de anticuerpos séricos anti-LPS Ogawa contra cólera en suero de humanos inoculados por vía oral, así como la evaluación de los parámetros de validación típicos de este ensayo. Para la selección de las condiciones óptimas se evaluaron la concentración de recubrimiento, condiciones de bloqueo y dilución de conjugado, con el objetivo de seleccionar las mejores respuestas para el control positivo, el control negativo y el blanco en cada caso. Una concentración de 25 µg/mL de LPS Ogawa en PBS, como recubrimiento, durante toda la noche; leche descremada al 0,5(por ciento) en PBS, 30 min a temperatura ambiente como bloqueo y el conjugado anti-IgA-HRP diluido 1:5000, resultaron las variables óptimas para el ensayo. En cuanto a la validación de la técnica los parámetros evaluados fueron precisión, exactitud, límite de detección, especificidad y robustez. Para ello se siguió un protocolo de validación que permitiera evaluarlos, y en todos los casos el ensayo se consideró adecuado, siempre y cuando el coeficiente de variación resultara ser menor del 20(por ciento). En todos los parámetros evaluados se cumplió con este requisito, considerando así los resultados confiables y reproducibles(AU)