Papel del sistema renina angiotensina en la respuesta simpática inducida por la prueba presora al frío en humanos / Role of the renin-angiotensin system on the sympathetic response induced by the cold pressor test in humans

El objetivo del presente estudio fue evaluar el papel del receptor AT1 de la angiotensina sobre la respuesta simpática inducida por la prueba presora al frío (PPF), en voluntarios sanos. Se incluyeron 82 sujetos sanos, en un estudio doble ciego controlado con placebo. Se determinaron los valores de la presión arterial y la frecuencia cardiaca, antes y 175 minutos después de la administración oral única de placebo, losartan (59 mg), valsartan (80 mg) o eprosartan (600 mg). Inmediatamente después, los sujetos fueron sometidos a la prueba presora al frío (PPF), midiéndose los mismos parámetros hemodinámicos. La PPF incrementó la presión arterial sistólica, diastólica y media así como la frecuencia cardíaca en el grupo placebo. El pretratamiento con losartan, valsartan o eprosartan bloqueó la respuesta presora a la PPF sin producir cambios en la respuesta de frecuencia cardiaca. Nuestros resultados demuestran que la angiotensina II endógena, a través del receptor AT1, contribuye a la respuesta al estrés mediada simpáticamente en humanos.

Effect of AT(1) angiotensin II receptor antagonists on the sympathetic response to a cold pressor test in healthy volunteers.

The aim of this study was to evaluate the effect of short-term administration of AT(1) angiotensin II receptor antagonists on the sympathetic response to a cold pressor test (CPT) in normotensive healthy volunteers. Eighty-two healthy volunteers were included in this double-blind placebo-controlled study. Blood pressure and heart rate were determined before and 175 minutes after oral administration of placebo, losartan (50 mg), valsartan (80 mg), or eprosartan (600 mg). Immediately, the subjects underwent a CPT and then the same hemodynamic parameters were measured. CPT increased arterial blood pressure (systolic, diastolic, and mean) and heart rate in the placebo-treated group. Pretreatment with a single dose of losartan, valsartan, or eprosartan blunted CPT-induced pressor response but not heart rate increase. Our results demonstrate that endogenous angiotensin II, through stimulation of AT(1) receptor, supports sympathetic-mediated stress response in humans.

Papel de la adrenomedulina cerebelosa en la hipertensión arterial / Paper of the adrenomedulina cerebelosa in the arterial hypertension

La adrenomedulina (AM) y el péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP) pertenecen a la superfamilia de los péptidos de CGRP. En el SNC, los sitios de unión para la AM y el CGRP se encuentran presentes en áreas hipotalámicas y en la corteza cerebelosa de la rata. La administración central de AM o de CGRP en ratas induce diuresis, natriuresis e incremento de la presión arterial. El papel de la AM en el cerebelo se desconoce. Con el fin de establecer la posible relación de la AM y CGRP cerebelosa y la regulación cardiovascular, en el presente estudio evaluamos la densidad de sitios de unión para la AM y el CGRP en el cerebelo de ratas espontáneamente hipertensas (SHR) y sus controles normotensos Wistar Kyoto (WKY) adultos de 16 semanas, mediante el uso de técnicas autoradiografícas y empleando 125I-hCGRPα y 125I-hAM13-52 como radioligandos. Los cortes coronales de cerebelo fueron incubados con 35 pM de [125I]-hCGRPα o [125I]-hAM13-52, durante 90 y 120 minutos, respectivamente. La unión no específica fue determinada en presencia de 1µM del ligando no marcado. El análisis densitométrico demostró que existe una colocalización de los sitios de unión para el [125I]-hCGRPα y la [125I]-hAM13-52 en la corteza cerebelosa. En el cerebelo la unión de la [125I]-hAM13-52 en las ratas SHR fue significativamente mayor que las WKY, indicando una mayor expresión de los receptores para la AM en el cerebelo de animales hipertensos. En relación a la unión de [125I]-hCGRPα, se observó también un pequeño incremento significativo en las ratas SHR en relación a las WKY. Con el fin de establecer la posible vía de señalización de la AM en la corteza cerebelosa, se evaluó la actividad de la óxido nítrico sintasa inducida por la AM.

Ferutinin stimulates nitric oxide synthase activity in median eminence of the rat.

Several species of Ferula genus have been used in folk medicine in digestive disorders, rheumatism, headache, arthritis, and as tranquilizers, antispasmodic and aphrodisiac. From the dry and powdered roots of Ferula hermonis Boiss was extracted the oxygenated sesquiterpene 1,5-trans-daucane type: ferutinine (1). The structure of (1) was established by spectroscopic methods as: IR, (1)H RMN, (13)C RMN, COSY, HMBC, HMQC, NOESY, EIMS, and CIMS. The possible signaling pathway of ferutinin (1) in nervous tissue in vitro was assessed and the results showed that this compound is able to increase nitric oxide synthase activity and inositol monophosphate accumulation (49%, each) in the median eminence of the rat brain, suggesting that compound (1) is associated to the activation of phosphoinositide breakdown and nitric oxide production (NO), the last is a gaseous intercellular messenger known to play a broad role in human biology from homeostasis to pathology.

Ceramide-1-P induces Ca2+ mobilization in Jurkat T-cells by elevation of Ins(1,4,5)-P3 and activation of a store-operated calcium channel.

Sphingolipids comprise a very important class of second messengers involved in cell growth, differentiation, and apoptosis, among other different functions. Recently, these lipids have been implicated in calcium mobilization in different cell lines, including Jurkat T-lymphocytes. However, the effect of each particular sphingolipid appears to be cell-line specific. Among them, the least studied is ceramide-1-P (Cer-1-P). Here, we show that Cer-1-P increased the intracellular Ca(2+) concentration in Jurkat T-cells. Furthermore, laser-scanning confocal microscopy indicated that Ca(2+) is released from the endoplasmic reticulum. An effect on store-operated Ca(2+) channels was evidenced by whole-cell "patch clamp" measurements after Cer-1-P induced Ca(2+) store depletion. The mechanism of action of Cer-1-P resembles that of the Jurkat anti-TCR antibody, but differs from that of ceramide, since Cer-1-P induced an increase in Ins(1,4,5)-P(3).

Ceramide increase cytoplasmic Ca2+ concentration in Jurkat T cells by liberation of calcium from intracellular stores and activation of a store-operated calcium channel.

The effect of ceramide on the cytoplasmic Ca2+ concentration ([Ca2+]i) varies depending on the cell type. We have found that in Jurkat human T cells ceramide increases the [Ca2+]i from a thapsigargin-sensitive calcium pool and the subsequent activation of a capacitative Ca2+ entry. This effect occurs both in the presence and in the absence of extracellular calcium. Addition of ceramine, a non-hydrolysable analogue of ceramide, reproduced its effect on the [Ca2+]i ruling out that this is due to the conversion of ceramide to sphingosine. The effect of ceramide was additive to that obtained by sphingosine, but not to the Jurkat T cells specific antibody OKT3. However, different to the latter, ceramide do not induced an elevation of InsP3. The opening of a store operated Ca2+ channel by ceramide was corroborated by experiments of Fura-2 quenching, using Mn2+ as a surrogate for Ca2+ and confirmed by whole-cell recording patch clamp techniques.

Endothelin ETB receptor signaling in the median eminence and subfornical organ of the rat brain.

We investigated the effect of endothelins (ETs) on receptor-mediated phosphoinositides (PI) turnover in whole subfornical organ (SFO) and median eminence (ME). Consistent with the presence of a high density of binding sites in the SFO and the ME of the rat brain, our results show an increase in PI hydrolysis induced by ETs in each structure, in a dose-dependent manner and with similar ED50 values. In addition, IRL 1620, a selective ETB receptor agonist, increased the inositol monophosphate (InsP1) accumulation in the SFO and the ME in a similar degree as ETs. With the use of selective agonists and antagonists of both endothelin receptor subtypes, we characterized the receptor subtype involved in ET-induced phosphoinositide metabolism. The addition of two selective ETA receptor antagonists, BQ 123 or BQ 610, did not alter the ETs-induced increase in the PI metabolism. While, IRL 1620- and ET3-induced InsP1 accumulation was completely blocked by BQ 788, a selective ETB receptor antagonist, in both brain structures evaluated. Our results demonstrate that in the SFO and the ME of the rat brain, stimulation of phosphoinositide turnover constitutes one of the signaling pathways of ETs, and this action is mediated through ETB receptor activation. These results support the concept that endothelin could play a role in the regulation of brain functions.

La adrenalectomía reduce la actividad de la guanilata ciclasa estimulada por el péptido atrial natriurético en el núcleo paraventricular de ratas / The adrenalinectomy reduce the cyclase guanylate activity stimulate by the natriuretic atrial peptide in the rats paraventricular nucleus

El péptido atrial natriurético (ANP por sus siglas en inglés) o un análogo, la Atriopeptina III (Pl 058) estimulan la formación de cGMP en la fracción de membrana del bulbo olfatorio de la rata, en la eminencia mediana y en el núcleo paraventricular, de manera dosis-dependiente. El efecto del análogo Atriopeptina III fue de un 20-40 por ciento mayor que el del ANP. Se investigó la adrenalectomía bilateral, con o sin reemplazo mineral o glucocorticoide, en la formación de cGMP estimulada por el ANP en el núcleo paraventricular de ratas. 11 días después de realizada la adrenalectomía bilateral de la producción inducida de cGMP. Este efecto fue prevenido mediante la administración de deoxicorticosterona, no así con la administración de dexametasona. Nuestros resultados apoyan aún más la presencia de receptores pareados de ANP con guanilata ciclasa localizados en lugares específicos del cerebro. Esto proporciona evidencia que sugiere que los sitios de enlace del ANP con la guanilata ciclasa en el PVN son susceptibles a cambios reguladores de la activación inducida de la adrenalectomía del sistema hipotálamo-hipofisoadrenocortical

Efecto adrenalectomía bilateral sobre la actividad guanililciclasa estimulable por el péptido natriurético auricular en el núcleo paraventricular de la rata / Bi-sided adrenalectomy effects on the natriuretic atrial factor-stimulated guanylcyclase activity on the rat paraventricular nucleus

El Peptido Natriurético Auricular (PNA) o el análogo de la Atriopeptina III (PL 059) estimulan la actividad guanililciclasa particulada en el bulbo olfatorio, la eminencia media , y el núcleo paraventrícular de la rata. El efecto del análogo de la Atripeptina III fue 20-40 por ciento mayor que el del PNA. Se investigó el efecto de la adrenalectomía bilateral (con o sin sustitución con mineral o glucocorticoides), sobre la formación de GMPc estimulada por el PNA en el núcleo paraventricular de la rata. Once días después de la adrenalectomía bilateral se observó una disminución en la capacidad porducción de GMPc inducida por el PNA o por el PL058. Esta acción fue prevenida por la administración de deoxicorticosterona, pero no por dexametasona. Nuestros resultados demuestran la presencia de receptores para el PNA asociados a la actividad guanililciclasa en áreas localizadas del cerebro de la rata; y sugieren que los receptores para el PNA acoplados a la guanililciclasa en el núcleo paraventricular son susceptibles a cambios regulatorios inducidos por la actividad del eje hipotálamo-hipófisis-suprarrenal