RESUMO
Wheat-dependent exercise-induced anaphylaxis (WDEIA) is one of the most severe forms of wheat allergy. It occurs in patients when they exercise after ingesting wheat-containing foods. Nowadays, the only possible alternative for WDEIA patients is to avoid such foods. This study investigated the potential of six RNA of interference (RNAi) wheat lines with low-prolamin content as alternatives for WDEIA patients. For that purpose, a high performance-liquid chromatography (HPLC) analysis was performed to evaluate differences in gluten protein fractions among these lines. Next, western blots were conducted to measure the immunoglobulin E (IgE) reactivity to wheat proteins in sera from five WDEIA patients. Additionally, monoclonal antibodies (moAb) recognition sites and the IgE binding sites were searched in all peptides identified by LC-MS/MS after protein digestion. The results showed a 61.4%-81.2% reduction in the gliadin content of the RNAi lines, accompanied by an increase in their high-molecular weight (HMW) glutenin content compared to the wild type bread wheat line (WT). In all cases, the reduction in gliadin content correlated with a decrease in IgE reactivity observed in the sera of WDEIA patients, highlighting the E82 and H320 lines. These two RNAi lines exhibited a ≤90% reduction in IgE reactivity. This reduction could be attributed to an absence of IgE binding sites associated with α- and ω5-gliadins, which were present in the WT. Overall, these lines offer a potential alternative for foodstuff for individuals with WDEIA.
RESUMO
INTRODUCCIÓN: la enfermedad celiaca (EC) presenta un determinado patrón de infiltrado linfocitario en la mucosa duodenal. Gracias a la citometría de flujo como herramienta complementaria al diagnóstico de la EC, se pueden cuantificar y caracterizar los linfocitos intraepiteliales (LIE) a través de lo que comúnmente denominamos linfograma. Con este estudio, pretendemos describir nuestra experiencia con la técnica en el diagnóstico del paciente celiaco adulto. MÉTODOS: se han analizado retrospectivamente los linfogramas realizados en nuestro centro entre 2009 y 2017, que fueron en total 157. Catorce de ellos tenían un diagnóstico previo de EC y seguían una dieta sin gluten, 21 tuvieron un diagnóstico nuevo de EC y el resto fueron considerados no celiacos. Se ha estudiado la asociación de los valores del linfograma (LIE totales, linfocitos CD3- y linfocitos TcRγδ) con el diagnóstico de EC, el cumplimiento de la dieta sin gluten (DSG), el tiempo desde el diagnóstico y el título de inmunoglobulina A antitransglutaminasa tisular. RESULTADOS: el valor de área bajo la curva ROC de los linfocitos TcRγδ para el diagnóstico de EC varía entre 0,86 y 0,86. El porcentaje de linfocitos TcRγδ en pacientes celiacos en DSG es menor 12 (8,5) vs. 20,5 (8,7), p = 0,0153, aunque permanece elevado frente a los no celiacos 12 (8,5) vs. 6,7 (6), p = 0,135. El tiempo desde el diagnóstico y el título de IgA antitransglutaminasa tisular (anti-Tgt) se correlacionan con los valores del linfograma en el paciente celiaco. La infección por Helicobacter pylori y el tratamiento con antagonistas de receptores de angiotensina 2 (ARA2) se asocia a diferencias en el linfograma. CONCLUSIONES: el linfograma duodenal es una herramienta complementaria fiable en el diagnóstico del celiaco adulto. Sin embargo, el cumplimiento y la duración de la DSG, así como otros factores, pueden condicionar su capacidad diagnóstica
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Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Doença Celíaca/diagnóstico , Citometria de Fluxo , Linfócitos/patologia , Helicobacter pylori , Infecções por Helicobacter , Estudos Retrospectivos , Curva ROCRESUMO
Los errores producidos en el laboratorio clínico han sido estudiados durante mucho tiempo, siendo actualmente una parte muy importante en los sistemas de gestión de la calidad, enmarcados dentro de la cultura de seguridad del paciente. Para minimizar los errores en el laboratorio clínico nos hemos apoyado en los últimos años en el avance tanto tecnológico como informático en el campo del diagnóstico. La gran capacidad de gestión de los sistemas informáticos de laboratorio, junto con la tendencia hacia la concentración de gran parte de la rutina en un laboratorio central, o corelab, hace que los laboratorios actuales estén preparados para el aumento de solicitudes de pruebas, pudiendo minimizar los errores asociados al manejo de un alto volumen de muestras. Dentro de la clasificación de los errores según la fase en la que se producen, los errores analíticos han sido los que más han disminuido gracias a la automatización, siendo más difíciles de controlar los errores en las fases pre y postanalíticas, ya que aspectos como la extracción de muestras o la interpretación de ciertos resultados no son susceptibles de automatización. A continuación, destacamos los errores más comunes, principalmente aquellos producidos durante la fase preanalítica, incluyendo tanto a aquellos que derivan de un uso inapropiado de la solicitud de pruebas de laboratorio como a los propiciados por el diseño del espacio en el laboratorio clínico (AU)
Clinical laboratory errors have been the subject of many studies over the years, and now play a very important role in quality management systems within the framework of the patient safety culture. In recent years we have had the support of technological and computer advances in the diagnostic field to help minimise errors. The large capacity of Laboratory Information Management Systems, along with the trend towards the concentration of much of the routine tests in a central laboratory, or Core lab, means that today's laboratories are prepared for the increase in test requests, and should be able to minimise errors associated with managing a high volume of samples. Within the classification of errors according to the phase in which they occur, analytical errors can be seen to have decreased with automation. It is more difficult to handle errors in pre- and post-analytical phases as aspects such as obtaining specimens or the interpretation of certain results are not amenable to automation. The most common errors are presented, especially those produced during the pre-analytical phase, including those arising from the improper use of laboratory test requesting, as well as those brought about due to the design of the clinical laboratory space (AU)
Assuntos
Humanos , Ensaio de Proficiência Laboratorial , Serviços de Laboratório Clínico/estatística & dados numéricos , Erros de Diagnóstico/estatística & dados numéricos , Controle de Qualidade , Qualidade da Assistência à Saúde/normas , Manejo de Espécimes/métodosRESUMO
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Assuntos
Humanos , Masculino , Recém-Nascido , Síndrome de Alagille/diagnóstico , Síndrome de Alagille/genética , Recém-Nascido de Baixo Peso , Estenose da Valva Pulmonar/diagnóstico por imagem , Colestase/diagnóstico por imagem , Colestase/genética , Diagnóstico Diferencial , Testes Genéticos/métodos , Mutagênese/genéticaRESUMO
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