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Cell Stress Chaperones ; 13(1): 111-6, 2008.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-18347948

RESUMO

Cellular levels of RNAs containing transposable elements increase in response to various stresses. Polymerase III (Pol III)-dependent transcripts of transposons are different from transposon-containing RNAs generated by read-through Pol II-dependent transcription. Until now, Pol III transcripts were detected by primer extension followed by time-consuming gel electrophoresis. In this paper, we describe a more sensitive PCR-based method for the selective detection of Pol III-transcribed RNAs. The method is based on the difference in sequences at the 5' ends of the Pol II- and Pol III-dependent transcripts. We employed this method to quantify Pol III transcripts of transposon B1 in rodent cells and revealed that their levels are affected by UV irradiation. We therefore conclude that the abundance of the Pol III-transcribed fraction of cellular RNA may serve as marker of stress response and can be conveniently quantified by the method described.


Assuntos
DNA Polimerase III/metabolismo , Elementos de DNA Transponíveis/genética , Perfilação da Expressão Gênica/métodos , Hepatócitos/química , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , RNA/biossíntese , Estresse Fisiológico/genética , Raios Ultravioleta/efeitos adversos , Animais , Núcleo Celular/metabolismo , Células Cultivadas/metabolismo , Células Cultivadas/efeitos da radiação , Elementos de DNA Transponíveis/efeitos da radiação , Hepatócitos/enzimologia , Queratinócitos/enzimologia , Queratinócitos/metabolismo , Queratinócitos/efeitos da radiação , Camundongos , RNA/genética , Ratos , Elementos Nucleotídeos Curtos e Dispersos/genética
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