Terapia celular para reparar cartílago / Cell therapy for cartilage repair

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Sobreexpresión de MMP-2 en cultivos de fibroblastos procedentes de fascia transversalis de pacientes jóvenes portadores de hernias inguinales directas (II) / MMP-2 overexpression in cultured fibroblasts derived from fascia transversalis in young patients with direct inguinal hernias (II)

Introducción. Entre las estructuras que conforman la pared posterior del canal inguinal que puedan impedir la formación de hernias, y de una manera especial las hernias de tipo directo, se encuentra la fascia transversalis. En estudios previos demostramos la existencia en muestras in vivo de un aumento en la expresión de metaloproteinasa 2 (MMP-2). El objetivo del presente trabajo ha sido investigar, a través de cultivos de fibroblastos tomados de fascia transversalis, la expresión de algunas MMP con el fin de comprobar si las modificaciones encontradas en tejido se mantenían en condiciones de cultivo. Pacientes y métodos. La fascia transversalis fue obtenida de pacientes portadores de hernias indirectas y directas, siempre de una misma zona situada en la pared posterior del canal inguinal. Las muestras control se obtuvieron de pacientes donantes en el transcurso de extracciones multiorgánicas destinadas a trasplante. Se establecieron los siguientes grupos de estudio: control (n = 10), pacientes con hernia directa (n = 32), pacientes con hernia indirecta (n = 36). Las edades de los pacientes oscilaron entre 20 y 60 años (media, 39,8 años). Atendiendo a este parámetro, se diseñaron dos subgrupos de estudio, I: 20-40 años y II: 41-60 años. Las muestras de fascia transversalis fueron procesadas para estudio en cultivo y obtención de fibroblastos. La expresión celular y de los medios de cultivo para MMP-2 y MMP-9 fueron analizada por inmunohistoquímica, ELISA, immunobloting y zimografía. El análisis estadístico fue realizado empleando un test no paramétrico (test de la U de Mann-Whitney). Resultados. La sobreexpresión de MMP-2 fue siempre detectada en los fibroblastos procedentes de pacientes con hernia inguinal directa del subgrupo I. No fue detectada actividad de MMP-9. La cuantificación de MMP-2 por ELISA en los medios de cultivo puso de manifiesto un incremento significativo de esta enzima en el subgrupo I en relación con pacientes con hernia indirecta y controles de la misma edad (p < 0,05). En el subgrupo II, la cantidad de MMP-2 secretada al medio de cultivo fue menor en pacientes con hernia directa, en relación con pacientes control y con hernia indirecta de la misma edad (p < 0,05). Comparando grupos de edades, solamente se detectaron diferencias, significativas en los pacientes portadores de hernia directa (p < 0,05). La zimografía evidenció un aumento significativo para MMP-2 en el subgrupo I, con respecto a controles de la misma edad. La cantidad de enzima activa demostraba un patrón similar al observado para el ELISA del subgrupo II, manteniéndose una disminución significativa en los pacientes portadores de hernia directa en relación con controles y pacientes con hernia indirecta (p < 0,05). Conclusiones. Los fibroblastos de fascia transversalis procedentes de pacientes jóvenes con hernia inguinal directa demuestran una mayor expresión para MMP-2. Esta enzima podría estar implicada en el proceso degradativo de la matriz extracelular de las fascia transversalis de pacientes portadores de este tipo de hernias (AU)