Effects of Kangaroo Care on the development of oral skills and achievement of exclusive oral feeding in preterm infants.

PURPOSE: analyze the effects of hospitalization in the Kangaroo Neonatal Intermediate Care Unit (UCINCa), the second stage of the Kangaroo Care (KC), on the development of oral feeding skills in preterm neonates. METHODS: an analytical observational study of the prospective longitudinal type, carried out in a public hospital in Southern Brazil, where infants were accompanied until hospital discharge. The sample consisted of 20 preterm neonates hospitalized at the UCINCa and 26 preterm neonates at the Conventional Neonatal Intermediate Care Unit (UCINCo), that were periodically evaluated through the levels of oral skill, in a bottle, according to the criteria of proficiency and milk transfer rate. The outcomes considered were a progression of the oral skill level, days of transition to obtain the full oral route, and days of hospital stay. RESULTS: the duration of transition to exclusive oral feeding was shorter for preterm neonates at the UCINCa (4.5 vs. 10 days) relative to those at the UCINCo (p = 0.041). By the third assessment, all preterm neonates at the UCINCa had reached level 4, while participants at the UCINCo only achieved this level of performance on the fifth assessment. The average number of days of hospitalization was four days shorter in UCINCa participants (p=0.098). CONCLUSION: the admission to the UCINCa had been a further acceleration in the maturation of oral skills, which allowed for a faster transition to exclusive oral feeding as compared to neonates admitted in UCINCo.

Effects of Kangaroo Care on the development of oral skills and achievement of exclusive oral feeding in preterm infants / Efeitos do Método Canguru no desenvolvimento das habilidades orais e na aquisição da alimentação oral exclusiva em recém-nascidos pré-termo

ABSTRACT Purpose analyze the effects of hospitalization in the Kangaroo Neonatal Intermediate Care Unit (UCINCa), the second stage of the Kangaroo Care (KC), on the development of oral feeding skills in preterm neonates. Methods an analytical observational study of the prospective longitudinal type, carried out in a public hospital in Southern Brazil, where infants were accompanied until hospital discharge. The sample consisted of 20 preterm neonates hospitalized at the UCINCa and 26 preterm neonates at the Conventional Neonatal Intermediate Care Unit (UCINCo), that were periodically evaluated through the levels of oral skill, in a bottle, according to the criteria of proficiency and milk transfer rate. The outcomes considered were a progression of the oral skill level, days of transition to obtain the full oral route, and days of hospital stay. Results the duration of transition to exclusive oral feeding was shorter for preterm neonates at the UCINCa (4.5 vs. 10 days) relative to those at the UCINCo (p = 0.041). By the third assessment, all preterm neonates at the UCINCa had reached level 4, while participants at the UCINCo only achieved this level of performance on the fifth assessment. The average number of days of hospitalization was four days shorter in UCINCa participants (p=0.098). Conclusion the admission to the UCINCa had been a further acceleration in the maturation of oral skills, which allowed for a faster transition to exclusive oral feeding as compared to neonates admitted in UCINCo.

RESUMO Objetivo verificar os efeitos da internação em Unidade de Cuidado Intermediário Neonatal Canguru (UCINCa), segunda etapa do Método Canguru, no desenvolvimento das habilidades de alimentação oral em recém nascidos pré-termo (RNPT). Método estudo observacional analítico do tipo longitudinal prospectivo, realizado em um hospital público no Sul do Brasil, com acompanhamento até a alta hospitalar. A amostra foi constituída por 20 RNPT internados na UCINCa e 26 RNPT na Unidade de Cuidado Intermediário Neonatal Convencional (UCINCo), que foram avaliados periodicamente por meio dos níveis de habilidade oral, em mamadeira, conforme os critérios de proficiência e taxa de transferência de leite. Os desfechos considerados foram progressão do nível de habilidade oral, dias de transição para obtenção da via oral plena, dias de internação hospitalar. Resultados o tempo de transição para obtenção da via oral exclusiva foi menor nos RNPT da UCINCa (4,5 dias versus 10 dias) quando comparados aos da UCINCo (p=0,041). Na terceira avaliação de habilidade oral, a totalidade de RNPT da UCINCa atingiu o nível 4, já os participantes da UCINCo somente alcançaram esse nível na quinta avaliação. A mediana dos dias de internação foi de quatro dias menor nos participantes da UCINCa (p=0,098). Conclusão a internação na UCINCa favoreceu uma aceleração no processo de maturação das habilidades orais, influenciando positivamente na transição alimentar oral do RNPT, na comparação com os RNPT internados na UCINCo.

Finger Kazoo Intensive Short-term Vocal Therapy: Vocal and Aerodynamic Measurements in Female Teachers.

OBJECTIVE: to verify the effect after short-term intensive therapy with the Finger Kazoo technique on vocal and aerodynamic measures of dysphonic female teachers. METHOD: blind randomized clinical trial. Fifteen female teachers without structural disorders of vocal folds and nine with vocal nodules participated in the study groups. Yet, nine female teachers without structural disorders and eight with vocal nodules in the control groups. The following variables were measured pre and post-therapy: minimum and maximum fundamental frequency: forced vital capacity; simple phonic coefficient; compound phonic coefficient; ratio between maximum phonation time of /a/ and expected maximum phonation time. RESULTS: no statistical significance was observed in the intra and intergroup analyses in any of the measures. CONCLUSION: in this group of female teachers, it was not possible to show a positive effect of short-term and intensive therapy with the Finger Kazoo technique on the vocal measures of minimum and maximum fundamental frequency, forced vital capacity, simple phonic coefficient, compound phonic coefficient, and the relationship between maximum phonation time of /a/ and expected maximum phonation time.

Influence of taste stimulation on sucking pressure in newborn infants at term. / Influência do estímulo gustativo na pressão de sucção de recém-nascidos a termo.

PURPOSE: To verify the influence of a taste stimulus on the suction pressure, during the non-nutritive sucking (SNN), in newborns, healthy and with weight appropriate to the gestational age. METHODS: Quasi-experimental study of the non-randomized clinical trial type with a convenience sample of 60 newborns (NB), 30 allocated in the study group (EG) and 30 in the control group (CG). The NB were evaluated for sucking pressure during the SNN in a pacifier. For the EG, a gustatory stimulus was added to the pacifier, moistened with colostrum. The CG did not receive any stimulus, other than the pacifier itself. The average, minimum and maximum pressures were measured with the equipment S-Flex®. RESULTS: The SG presented mean and maximum sucking pressure significantly higher than the CG. In addition, there was a statistically significant difference between the groups for the second measurement of mean sucking pressure. CONCLUSION: The results showed that the NB of the SG presented sucking pressures, average and maximum, significantly higher, when compared to the CG. The use of a taste stimulus associated with SNN modified the sucking pressure and seems to enhance oral skills.

OBJETIVO: Verificar a influência de um estímulo gustativo na pressão de sucção, durante a sucção não nutritiva (SNN), em recém-nascidos a termo, saudáveis e com peso adequado à idade gestacional. MÉTODO: Estudo quase experimental do tipo ensaio clínico não randomizado com uma amostra de conveniência de 60 recém-nascidos (RN), 30 alocados no grupo estudo (GE) e 30 no grupo controle (GC). Os RN foram avaliados quanto à pressão de sucção, durante a SNN em chupeta. Para o GE foi adicionado estímulo gustativo à chupeta, umedecida com o colostro. O GC não recebeu nenhum estímulo, além da própria chupeta. As pressões média, mínima e máxima foram medidas com o equipamento S-Flex®. RESULTADOS: O GE apresentou pressão média e máxima de sucção significativamente maiores do que o GC. Ainda, houve diferença estatisticamente significativa, entre os grupos, para a 2ª medida da pressão média de sucção. CONCLUSÃO: Os resultados demostraram que os RN do GE apresentaram pressões de sucção, média e máxima, significativamente maiores, quando comparados ao GC. A utilização de um estímulo gustativo associado à SNN modificou a pressão de sucção e parece potencializar as habilidades orais.

Influência do estímulo gustativo na pressão de sucção de recém-nascidos a termo / Influence of taste stimulation on sucking pressure in newborn infants at term

RESUMO Objetivo Verificar a influência de um estímulo gustativo na pressão de sucção, durante a sucção não nutritiva (SNN), em recém-nascidos a termo, saudáveis e com peso adequado à idade gestacional. Método Estudo quase experimental do tipo ensaio clínico não randomizado com uma amostra de conveniência de 60 recém-nascidos (RN), 30 alocados no grupo estudo (GE) e 30 no grupo controle (GC). Os RN foram avaliados quanto à pressão de sucção, durante a SNN em chupeta. Para o GE foi adicionado estímulo gustativo à chupeta, umedecida com o colostro. O GC não recebeu nenhum estímulo, além da própria chupeta. As pressões média, mínima e máxima foram medidas com o equipamento S-Flex®. Resultados O GE apresentou pressão média e máxima de sucção significativamente maiores do que o GC. Ainda, houve diferença estatisticamente significativa, entre os grupos, para a 2ª medida da pressão média de sucção. Conclusão Os resultados demostraram que os RN do GE apresentaram pressões de sucção, média e máxima, significativamente maiores, quando comparados ao GC. A utilização de um estímulo gustativo associado à SNN modificou a pressão de sucção e parece potencializar as habilidades orais.

Abstract Purpose To verify the influence of a taste stimulus on the suction pressure, during the non-nutritive sucking (SNN), in newborns, healthy and with weight appropriate to the gestational age. Methods Quasi-experimental study of the non-randomized clinical trial type with a convenience sample of 60 newborns (NB), 30 allocated in the study group (EG) and 30 in the control group (CG). The NB were evaluated for sucking pressure during the SNN in a pacifier. For the EG, a gustatory stimulus was added to the pacifier, moistened with colostrum. The CG did not receive any stimulus, other than the pacifier itself. The average, minimum and maximum pressures were measured with the equipment S-Flex®. Results The SG presented mean and maximum sucking pressure significantly higher than the CG. In addition, there was a statistically significant difference between the groups for the second measurement of mean sucking pressure. Conclusion The results showed that the NB of the SG presented sucking pressures, average and maximum, significantly higher, when compared to the CG. The use of a taste stimulus associated with SNN modified the sucking pressure and seems to enhance oral skills.

Assessing the vertical transmission potential of dengue virus in field-reared Aedes aegypti using patient-derived blood meals in Ho Chi Minh City, Vietnam.

BACKGROUND: Dengue viruses (DENV) can be transmitted from an adult female Aedes aegypti mosquito through the germ line to the progeny; however, there is uncertainty if this occurs at a frequency that is epidemiologically significant. We measured vertical transmission of DENV from field-reared Ae. aegypti to their F1 progeny after feeding upon blood from dengue patients. We also examined the transmission potential of F1 females. METHODS: We examined the frequency of vertical transmission in field-reared mosquitoes, who fed upon blood from acutely viremic dengue patients, and the capacity for vertically infected females to subsequently transmit virus horizontally, in two sets of experiments: (i) compared vertical transmission frequency of field-reared Ae. aegypti and Ae. albopictus, in individual progeny; and (ii) in pooled progeny derived from field- and laboratory-reared Ae. aegypti. RESULTS: Of 41 DENV-infected and isofemaled females who laid eggs, only a single female (2.43%) transmitted virus to one of the F1 progeny, but this F1 female did not have detectable virus in the saliva when 14 days-old. We complemented this initial study by testing for vertical transmission in another 460 field-reared females and > 900 laboratory-reared counterparts but failed to provide any further evidence of vertical virus transmission. CONCLUSIONS: In summary, these results using field-reared mosquitoes and viremic blood from dengue cases suggest that vertical transmission is uncommon. Field-based studies that build on these observations are needed to better define the contribution of vertical DENV transmission to dengue epidemiology.

Phonotherapeutic Intervention in Patients With Mucosal Leishmaniasis Sequelae.

PURPOSE: To characterize the voice before and after speech-language intervention, with Humming nasal sound in patients with sequelae Mucosal Leishmaniasis (ML) and Cutaneous Leishmaniasis (CL). METHODS: Collection of phonation /a:/ from 44 patients with ML and CL for perceptual voice analysis and computed acoustic. The Wilcoxon nonparametric test and Fisher's exact test were used, with significance level of 5%. RESULTS: It was observed, prespeech therapy, that 27.7% of participants with ML presented asthenic vocal quality, and for the acoustics characteristics there was a statistically significant result for measures of frequency, frequency disturbance, noise, and subharmonic measurements, indicating phonatory instability, weakness, and noise emission giving the emission a feeling of vocal weakness. After therapy, the subharmonic segment measurements for the group with ML, showing reduction noise emission. Patients with CL had more grade 1 instability (36.4%), indicating tremor in vocal tract structures. After speech therapy, this group presented a reduction in the degree of roughness and reduction of the frequency disturbance measures, indicating a decrease in tension in the larynx and pharynx. CONCLUSION: Even after completing treatment for LM, patients may experience vocal changes due to the sequelae of the disease, like vocal alterations due to nasal lesions or in other locations that interfere in the correct vocal emission. As for participants with CL, no vocal changes would be expected, since these patients present thorax, leg and arm lesions that would not cause problems for the voice. Nevertheless, the two groups of participants presented vocal changes to different degrees before vocal therapy. However, it was observed that patients with ML present vocal alterations with more severe degrees. After the speech-language intervention, the participants of both groups showed vocal improvement, but the group with CL presented more vocal benefits, possibly due to the previous vocal alterations not being so severe.

Acoustic Measurements of the Glottic Source of Female Teachers With Dysphonia.

OBJECTIVE: To verify the acoustic measurements of glottic source of dysphonic teachers of a medium-sized municipality of interior of the state. METHODS: Retrospective, cross-sectional, and quantitative study, with a composite sample of 34 dysphonic teachers, of which 21 teachers without laryngeal affections and 13 with laryngeal affections, mean age 39.1 years old and 39.5 years old, respectively. Glottic source acoustic analysis was performed with the Multi-Dimensional Voice Program Advanced. The data were analyzed statistically to verify the significance of each acoustic measure between the groups (with laryngeal affection, without laryngeal affection, and total) and in relation to the normality proposed by the software. RESULTS: In the three conditions (groups with and without affection and total) the means were statistically below normality in the measurements of maximum and minimum fundamental frequency. In the group without affection, frequency, and noise measurements presented above normality. In both groups, measurements of frequency, noise, and subharmonic segments were above normal, and number of voice breaks below normal. CONCLUSION: Acoustic parameters outside the normal pattern showed an aperiodic vocal production, with presence of noise and instability in the vocal signal, in dysphonic teachers with or without alteration at the laryngeal level.

Detecting wMel Wolbachia in field-collected Aedes aegypti mosquitoes using loop-mediated isothermal amplification (LAMP).

BACKGROUND: The World Mosquito Program uses Wolbachia pipientis for the biocontrol of arboviruses transmitted by Aedes aegypti mosquitoes. Diagnostic testing for Wolbachia in laboratory colonies and in field-caught mosquito populations has typically employed PCR. New, simpler methods to diagnose Wolbachia infection in mosquitoes are required for large-scale operational use. METHODS: Field-collected Ae. aegypti mosquitoes from North Queensland were tested using primers designed to detect the Wolbachia wsp gene, specific to the strain wMel. The results were analysed by colour change in the reaction mix. Furthermore, to confirm the efficiency of the LAMP assay, the results were compared to the gold-standard qPCR test. RESULTS: A novel loop-mediated isothermal amplification (LAMP) colorimetric test for the wMel strain of Wolbachia was designed, developed and validated for use in a high-throughput setting. Against the standard qPCR test, the analytical sensitivity, specificity and diagnostic metrics were: sensitivity (99.6%), specificity (92.2%), positive predictive value (97.08%) and negative predictive value (99.30%). CONCLUSIONS: We describe an alternative, novel and high-throughput method for diagnosing wMel Wolbachia infections in mosquitoes. This assay should support Wolbachia surveillance in both laboratory and field populations of Ae. aegypti.

Wolbachia detection in insects through LAMP: loop mediated isothermal amplification.

BACKGROUND: The bacterium Wolbachia is a promising agent for the biological control of vector-borne diseases as some strains have the ability to block the transmission of key human disease-causing pathogens. Fast, accurate and inexpensive methods of differentiating between infected and uninfected insects will be of critical importance as field-based trials of Wolbachia-based bio-control become increasingly common. FINDINGS: We have developed a specific and sensitive method of detecting Wolbachia based on the isothermal DNA amplification. This technique can be performed in an ordinary heat block without the need for gel-based visualisation, and is effective for a wide variety of insect hosts. CONCLUSION: Here we present the development of a rapid, highly sensitive and inexpensive method to detect Wolbachia in a variety of insect hosts, including key mosquito disease vectors.

Detecção da bactéria Wolbachia em insetos através da técnica LAMP (amplificação isotérmica mediada por loop) / Detection of Wolbachia bacteria in insects through the LAMP technique (isothermal amplification Loop-mediated)

Wolbachia pipientis é uma bactéria intracelular que infecta cerca de 40% dos artrópodes e alguns nematódeos, causando alterações reprodutivas em seus hospedeiros. Recentemente, duas cepas de Wolbachia (wMelPop e wMel)foram inseridas individualmente em Aedes aegypti (não infectado naturalmente)e os mosquitos adultos contendo a Wolbachia foram menos suscetíveis a diferentes arboviroses (Dengue e Chikungunya) bem como ao Plasmodium sp. Atualmente, mosquitos A. aegypti contendo Wolbachia (wMel) estão sendo liberados a campo em diversos países, pelo Programa Eliminate Dengue, como possível agente de controle biológico de Dengue. Durante o processo de invasão de mosquitos contendo Wolbachia no campo, há a necessidade de realização de coletas e screening semanal de grandes quantidades de mosquitos para detecção de Wolbachia, via PCR quantitativo, técnica ainda bastante onerosa. Diante disto, é imprescindível o desenvolvimento de um método rápido, específico e de baixo custo para detecção de mosquitos infectados com a bactéria, para levantamento e monitoramento da disseminação da Wolbachia em campo. No presente trabalho, desenvolvemos com sucesso um método rápido de detecção através do LAMP (Amplificação isotérmica mediada por loop) que utiliza 3 pares de primers que se ligam em 8 regiões distintas do DNA alvo, o que torna a reação bastante específica. Em nosso caso, desenhamos iniciadores baseando-se na sequência alvo do gene 16S rRNA da bactéria. Para padronização, foram utilizados mosquitos da colônia do Insetário do Laboratório de Malária do CPqRR, infectados e não infectados por Wolbachia, além de insetos de campo (mosquitos e insetos de diferentes ordens) doados por colaboradores. O tempo de incubação estabelecido para a amplificação foi de 90 minutos à 63oC, sendo possível a realização da reação tanto em termociclador, como em banho seco...

Para análise da sensibilidade, foi feita a diluição seriada de plasmídeo contendo a sequência alvo de 109 à 100 cópias, sendo possível a amplificação utilizando apenas 1 cópia do DNA. Para verificar a especificidade, foram utilizadas amostras de diferentes espécies de bactérias e em nenhuma delas ocorreu a amplificação, confirmando que o LAMP é bastante específico. Uma maneira de reduzir os custos foi através da redução da concentração da enzima Bst DNA polimerase por reação e, com apenas 1 unidade, a amplificação ocorreu de maneira eficiente. Para visualização dos resultados, foram utilizados dois corantes, o azul de hidroxinaftol (HNB) e SYBR Green I. Em ambos foi possível diferenciar as amostras positivas das negativas sem a necessidade de géis de agarose, sendo que, com o HNB, não há manipulação de produto amplificado pois é adicionado antes da reação, o que evita possíveis contaminações, e também é possível observar a diferença de cores a olho nu, sem o uso de luz UV. Comparando os custos, em reais, para realização da técnica de PCR e LAMP, esta apresentou um custo de 53,92% menor em relação ao PCR, o que confirma ser uma técnica de baixo custo, já que não requer equipamentos sofisticados e nem eletroforese em gel de agarose para análise dos resultados.Desenvolvemos, neste trabalho, uma técnica para detecção de Wolbachia bastante especifica, rápida, sensível e de baixo custo a qual possibilita seu uso em larga escala para monitoramento de diversas espécies de insetos infectadas no campo...

Detecção da bactéria Wolbachia em insetos através da técnica LAMP (amplificação isotérmica mediada por loop)

Wolbachia pipientis é uma bactéria intracelular que infecta cerca de 40% dos artrópodes e alguns nematódeos, causando alterações reprodutivas em seus hospedeiros. Recentemente, duas cepas de Wolbachia (wMelPop e wMel)foram inseridas individualmente em Aedes aegypti (não infectado naturalmente)e os mosquitos adultos contendo a Wolbachia foram menos suscetíveis a diferentes arboviroses (Dengue e Chikungunya) bem como ao Plasmodium sp. Atualmente, mosquitos A. aegypti contendo Wolbachia (wMel) estão sendo liberados a campo em diversos países, pelo Programa Eliminate Dengue, como possível agente de controle biológico de Dengue. Durante o processo de invasão de mosquitos contendo Wolbachia no campo, há a necessidade de realização de coletas e screening semanal de grandes quantidades de mosquitos para detecção de Wolbachia, via PCR quantitativo, técnica ainda bastante onerosa. Diante disto, é imprescindível o desenvolvimento de um método rápido, específico e de baixo custo para detecção de mosquitos infectados com a bactéria, para levantamento e monitoramento da disseminação da Wolbachia em campo. No presente trabalho, desenvolvemos com sucesso um método rápido de detecção através do LAMP (Amplificação isotérmica mediada por loop) que utiliza 3 pares de primers que se ligam em 8 regiões distintas do DNA alvo, o que torna a reação bastante específica. Em nosso caso, desenhamos iniciadores baseando-se na sequência alvo do gene 16S rRNA da bactéria. Para padronização, foram utilizados mosquitos da colônia do Insetário do Laboratório de Malária do CPqRR, infectados e não infectados por Wolbachia, além de insetos de campo (mosquitos e insetos de diferentes ordens) doados por colaboradores. O tempo de incubação estabelecido para a amplificação foi de 90 minutos à 63oC, sendo possível a realização da reação tanto em termociclador, como em banho seco.

Para análise da sensibilidade, foi feita a diluição seriada de plasmídeo contendo a sequência alvo de 109 à 100 cópias, sendo possível a amplificação utilizando apenas 1 cópia do DNA. Para verificar a especificidade, foram utilizadas amostras de diferentes espécies de bactérias e em nenhuma delas ocorreu a amplificação, confirmando que o LAMP é bastante específico. Uma maneira de reduzir os custos foi através da redução da concentração da enzima Bst DNA polimerase por reação e, com apenas 1 unidade, a amplificação ocorreu de maneira eficiente. Para visualização dos resultados, foram utilizados dois corantes, o azul de hidroxinaftol (HNB) e SYBR Green I. Em ambos foi possível diferenciar as amostras positivas das negativas sem a necessidade de géis de agarose, sendo que, com o HNB, não há manipulação de produto amplificado pois é adicionado antes da reação, o que evita possíveis contaminações, e também é possível observar a diferença de cores a olho nu, sem o uso de luz UV. Comparando os custos, em reais, para realização da técnica de PCR e LAMP, esta apresentou um custo de 53,92% menor em relação ao PCR, o que confirma ser uma técnica de baixo custo, já que não requer equipamentos sofisticados e nem eletroforese em gel de agarose para análise dos resultados.Desenvolvemos, neste trabalho, uma técnica para detecção de Wolbachia bastante especifica, rápida, sensível e de baixo custo a qual possibilita seu uso em larga escala para monitoramento de diversas espécies de insetos infectadas no campo.

wFlu: characterization and evaluation of a native Wolbachia from the mosquito Aedes fluviatilis as a potential vector control agent.

There is currently considerable interest and practical progress in using the endosymbiotic bacteria Wolbachia as a vector control agent for human vector-borne diseases. Such vector control strategies may require the introduction of multiple, different Wolbachia strains into target vector populations, necessitating the identification and characterization of appropriate endosymbiont variants. Here, we report preliminary characterization of wFlu, a native Wolbachia from the neotropical mosquito Aedes fluviatilis, and evaluate its potential as a vector control agent by confirming its ability to cause cytoplasmic incompatibility, and measuring its effect on three parameters determining host fitness (survival, fecundity and fertility), as well as vector competence (susceptibility) for pathogen infection. Using an aposymbiotic strain of Ae. fluviatilis cured of its native Wolbachia by antibiotic treatment, we show that in its natural host wFlu causes incomplete, but high levels of, unidirectional cytoplasmic incompatibility, has high rates of maternal transmission, and no detectable fitness costs, indicating a high capacity to rapidly spread through host populations. However, wFlu does not inhibit, and even enhances, oocyst infection with the avian malaria parasite Plasmodium gallinaceum. The stage- and sex-specific density of wFlu was relatively low, and with limited tissue distribution, consistent with the lack of virulence and pathogen interference/symbiont-mediated protection observed. Unexpectedly, the density of wFlu was also shown to be specifically-reduced in the ovaries after bloodfeeding Ae. fluviatilis. Overall, our observations indicate that the Wolbachia strain wFlu has the potential to be used as a vector control agent, and suggests that appreciable mutualistic coevolution has occurred between this endosymbiont and its natural host. Future work will be needed to determine whether wFlu has virulent host effects and/or exhibits pathogen interference when artificially-transfected to the novel mosquito hosts that are the vectors of human pathogens.