Assuntos
Leucemia Promielocítica Aguda/genética , Receptores do Ácido Retinoico/genética , Tretinoína/administração & dosagem , Animais , Células da Medula Óssea/efeitos dos fármacos , Células-Tronco Embrionárias/efeitos dos fármacos , Humanos , Leucemia Promielocítica Aguda/metabolismo , Leucemia Promielocítica Aguda/patologia , Camundongos , Células Mieloides/efeitos dos fármacos , Células Mieloides/patologia , Proteínas de Fusão Oncogênica/genética , Receptores do Ácido Retinoico/metabolismo , Receptor alfa de Ácido RetinoicoRESUMO
Rim1 was previously identified as a Rab3 effector localized to the presynaptic active zone in vertebrates. Here we demonstrate that C. elegans unc-10 mutants lacking Rim are viable, but exhibit behavioral and physiological defects that are more severe than those of Rab3 mutants. Rim is localized to synaptic sites in C. elegans, but the ultrastructure of the presynaptic densities is normal in Rim mutants. Moreover, normal levels of docked synaptic vesicles were observed in mutants, suggesting that Rim is not involved in the docking process. The level of fusion competent vesicles at release sites was reduced fivefold in Rim mutants, but calcium sensitivity of release events was unchanged. Furthermore, expression of a constitutively open form of syntaxin suppressed the physiological defects of Rim mutants, suggesting Rim normally acts to regulate conformational changes in syntaxin. These data suggest Rim acts after vesicle docking likely via regulating priming.
Assuntos
Proteínas de Caenorhabditis elegans , Caenorhabditis elegans/fisiologia , Proteínas de Transporte/metabolismo , Genes de Helmintos , Proteínas de Helminto/metabolismo , Peptídeos e Proteínas de Sinalização Intracelular , Vesículas Sinápticas/metabolismo , Proteínas Adaptadoras de Transdução de Sinal , Motivos de Aminoácidos , Sequência de Aminoácidos , Animais , Animais Geneticamente Modificados , Caenorhabditis elegans/citologia , Caenorhabditis elegans/genética , Proteínas de Transporte/química , Proteínas de Transporte/genética , Eletrofisiologia , Genes Reporter , Fatores de Troca do Nucleotídeo Guanina , Proteínas de Helminto/genética , Locomoção/fisiologia , Proteínas de Membrana/genética , Proteínas de Membrana/metabolismo , Microscopia de Fluorescência , Dados de Sequência Molecular , Mutação , Proteínas do Tecido Nervoso/metabolismo , Junção Neuromuscular/fisiologia , Junção Neuromuscular/ultraestrutura , Estrutura Terciária de Proteína , Proteínas Qa-SNARE , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo , Alinhamento de Sequência , Transmissão Sináptica/fisiologia , Proteínas de Transporte Vesicular , Dedos de Zinco , Proteínas rab de Ligação ao GTP/metabolismo , Proteínas rab3 de Ligação ao GTP/metabolismo , Rabfilina-3ARESUMO
Little is known of mechanisms regulating presynaptic differentiation. We identified rpm-1 in a screen for mutants with defects in patterning of a presynaptic marker at certain interneuronal synapses. The predicted RPM-1 protein contains zinc binding, RCC1, and other conserved motifs. In rpm-1 mutants, mechanosensory neurons fail to accumulate tagged vesicles, retract synaptic branches, and ectopically extend axons. Some motor neurons branch and overgrow; others show altered synaptic organization. Expression of RPM-1 in the presynaptic mechanosensory neurons is sufficient to rescue phenotypes in these cells. Certain rpm-1 phenotypes are temperature sensitive, revealing that RPM-1 function can be bypassed by maintaining mutants at the permissive temperature at stages commensurate with synapse formation in wild-type animals. These results indicate that RPM-1 functions cell autonomously during synaptogenesis to regulate neuronal morphology.