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Anal Bioanal Chem ; 387(1): 83-9, 2007 Jan.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-17082883

RESUMO

Analytics of single biological cells allows quantitative investigation from a structural, functional and dynamical point of view and opens novel possibilities to an unamplified subcellular analysis. In this article, we report on three different experimental methods and their applications to single cellular systems with a subcellular sensitivity down to the single molecule level. First, the subcellular surface structure of living bacteria (Corynebacterium glutamicum) was investigated with atomic force microscopy (AFM) at the resolution of individual surface layer (S-layer) proteins; discrimination of bacterial strains that lack the expression of hexagonally packed surface layer proteins was possible. Second, quantitative measurement of individual recognition events of membrane-bound receptors on living B-cells was achieved in single cell manipulation and probing experiments with optical tweezers (OT) force spectroscopy. And third, intracellular dynamics of translocating photoactivatable GFP in plant protoplasts (Nicotiana tabacum BY-2) was quantitatively monitored by two-photon laser scanning microscopy (2PLSM).


Assuntos
Citometria de Varredura a Laser/métodos , Microscopia de Força Atômica/métodos , Pinças Ópticas , Animais , Anticorpos Monoclonais/química , Anticorpos Monoclonais/imunologia , Linfócitos B/química , Linfócitos B/citologia , Proteínas de Bactérias/química , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Proteínas de Bactérias/fisiologia , Núcleo Celular/metabolismo , Galinhas , Corynebacterium glutamicum/citologia , Corynebacterium glutamicum/metabolismo , Citoplasma/metabolismo , Proteínas de Fluorescência Verde/química , Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo , Glicoproteínas de Membrana/química , Glicoproteínas de Membrana/metabolismo , Glicoproteínas de Membrana/fisiologia , Microesferas , Transporte Proteico , Protoplastos/citologia , Protoplastos/metabolismo , Receptores de Antígenos de Linfócitos B/química , Receptores de Antígenos de Linfócitos B/imunologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos B/fisiologia , Nicotiana/citologia , Nicotiana/metabolismo
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