RESUMO
Sanguessugas possuem substâncias em sua saliva que são capazes de desequilibrar o sistema hemostático de suas presas tornando o sangue incoagulável. Foi feita a purificação da hementerina ( substância fibrinogenolítica ) e do lefaxin ( inibidor de fator Xa). O mecanismo de ação e peptídeos internos das duas proteínas foi determinado. A hementerina é uma metaloprotainase de cadeia única de 80 kDa, capaz de degradar o fibrinogênio e a fibrina. Essa atividade é maior quando o plasminogênio é adicionado. No entanto nenhuma atividade tipo t-PA ou pro-UK foi descoberta em sistema específico purificado. O N- terminal da hementerina apresenta 80% de homologia com a hementina, outra fibrinogenase purificada da Haementeria ghilianii. O lefaxin ( inibidor de FXa) é uma proteína de cadeia única de 30 kDa, pl 5,7 e possui o N-terminal bloqueado. Inibe o fator Xa por um mecanismo do tipo lento " slow" e apresenta um IC 50 de 50 pM para 1 nM de fator Xa humanoou bovino. Ele é especifico para o fator Xa e é capaz de inibir a formação da trombina no complexo protombinase. A sequência dos peptídeos internos não revelou homologia com a antistasina , inibidor de fator Xa da Haementeria officinalis. Foi construida uma biblioteca de cDNA para o complexo salivar de H. depressa.
Leeches posses salivary substances wich are able to disequilibrate the hemostatic system thus rendering the blood unclottable . Purification of hementerin (fibrinogenolytic substance) and of a lefaxin ( a FXa inhibitor ) was undertaken. The mecanism of action and the internal peptides of both proteins were determined. Purified hementerin is a single chain metaloproteinase of 80 kD, able do degrade fibrinogen and fibrin . This activity is higher on plasma or when plasminogen is added. However, no t-PA or Pro-UK like activity is disclosed in a purified specific system. The hementerin N- terminal has 80% homology with hementerin, another fibrinogenolytic component purified from Haementeria ghilianii. The lefaxin ( Fxa inhibitor) is a single chain protein of 30 kD, pl 5.7 with N-terminal bloqued. The inhibition is of the slow type and presents an IC 50 of 50 pM for 1 nM of human or bovine Fxa. It is specific for FXa and is able to inhibit thrombin formation from the prothrombinase complex. The internal peptide sequence does not show homology with antistasin ( another FXa inhibitor from H. officinalis). A cDNA library was constructed for the "salivary complex".
