Comparing in vitro activity of tigecycline by using the disk diffusion test, the manual microdilution method, and the VITEK 2 automated system.

Tigecycline is a broad spectrum antibiotic having activity against multiresistant isolates. In vitro susceptibility testing is difficult to perform with the use of traditional microbiological techniques. The aim of this study was to evaluate the disk diffusion test with three different Mueller-Hinton agar brands, and the Vitek 2 automated system in comparison with the standard broth microdilution method against 200 gram-negative isolates (Escherichia coil, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens and Acinetobacter baumannii). Among Enterobacteriaceae, the Becton Dickinson agar had the lowest rate of minor (32.5%) and major errors (3.8%). No very major errors were found. For A. baumanni, the rate of minor and major errors was lower. A high rate of agreement (94%) was found between the broth microdilution method and the Vitek 2 system. Our results show that there are important differences between agars used for the disk diffusion test, and that Vitek 2 is a valid tool for susceptibility testing in clinical laboratories.

Caracterización molecular de aislamientos de enterobacter cloacae multirresistentes productores de a-lactamasas provenientes de pacientes de un hospital de tercer nivel de Bogotá / Molecular characterization of 20 isolates of resistance enterobacter cloacae from a Hospital of third level in Bogotá

Antecedentes. Las enterobacterias, antaño flora normal del tracto gastrointestinal, han cambiado su biología y emergido como agentes patógenos nosocomiales que se tornan resistentes a los antibióticos conocidos. Objetivo. Realizar la caracterización epidemiológico-molecular de 20 aislamientos de Enterobacter cloacae resistentes a cefalosporinas de tercera generación; provenientes de un hospital de tercer nivel de Bogotá-Colombia. Material y métodos. Los aislamientos fueron identificados mediante sistemas automatizados Microscan y VITEK, se utilizó el Enterobacter asbureae como control externo inter-especie. La confirmación de resistencia se hizo por técnica de difusión en agar, y una vez establecida se realizó BLEE para comprobación. La determinación de puntos isoeléctricos se hizo, mediante lisis por ultrasonido y la genotipificación mediante la metodología para bacterias Gramnegativas propuesta por Versalovic. Resultados: Los aislamientos colectados durante un año fueron causantes de 15 de infección Intrahospitalaria y dos colonizaciones. Todos los aislamientos presentaron resistencia a cefotaxima, ceftazidima, ceftriaxona, aztreonam y ciprofloxacina, 95 por ciento a amikacina, gentamicina y cloranfenicol, 75 por ciento a trimetoprim/sulfametoxazol, 20 por ciento a cefepime y todos fueron sensibles a imipenem. Dos aislamientos fueron confirmados como productores de â-lactamasas de espectro extendido (BLEE) por la técnica microbiológica de disco combinado. Por isoelectroenfoque presentaron dos â-lactamasas con puntos isoeléctricos (pI) de 5,4 y 8,2. En los 18 aislamientos no inhibidos por ácido clavulánico, se detectaron entre 2 y 4 â-lactamasas con pI de 5,4; 6,0; 7,0; 8,2 y mayor que 8,2; la resistencia a cefalosporinas de tercera generación podría ser atribuida a la hiperproducción de AmpC; los valores de pI sugieren la producción simultánea de â-lactamasas tipo SHV y TEM. La genotipificación mediante tres metodologías de rep-PCR (ERIC; REP y BOX) agrupó la población estudiada en siete clones: seis constituidos por un solo aislamiento y el clon predominante E1/B1/R1 agrupó 14 aislamientos causantes de infección en diez pacientes. Conclusión. Se identificó un clon de Enterobacter cloacae multirresistente, endémico en una institución de tercer nivel en Bogotá, causante de infección nosocomial y quirúrgica en particular