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1.
Vopr Virusol ; 40(3): 100-2, 1995.
Artigo em Russo | MEDLINE | ID: mdl-7676667

RESUMO

Genome DNA encoding the N-part of human CD4 gene located in the 15 kilobase (kb) Sau3a restriction fragment was cloned and nucleotide sequence of a part (3430 b.p.) of this fragment determined. Exons 2 and 3, intron 2, and partially introns 2 and 3 of this gene were located in the sequenced fragment. Six Alu repeats and open reading frames (ORFs) coding for proteins very close to C5 and C3 components of the complement were detected in this fragment.


Assuntos
Antígenos CD4/genética , Éxons , Linfócitos T/imunologia , Sequência de Aminoácidos , Sequência de Bases , Complemento C3/genética , Complemento C5/genética , DNA , Humanos , Dados de Sequência Molecular , Fases de Leitura Aberta , RNA Mensageiro/genética , Mapeamento por Restrição , Homologia de Sequência do Ácido Nucleico
2.
Vopr Virusol ; 39(2): 56-9, 1994.
Artigo em Russo | MEDLINE | ID: mdl-7517083

RESUMO

A recombinant protein containing the first 179 N-terminus amino acids of human T-lymphocyte CD4-receptor was synthesized in E. coli cells. This recombinant protein was shown to interact with OKT4A and Leu3a monoclonal antibodies competing with HIV gp120 glycoprotein for binding with the native CD4 receptor. Experiments in vitro in human T-lymphocyte cultures showed that the recombinant CD4-protein in concentrations of 1 to 10 micrograms/ml inhibited the virus-induced syncytium formation, HIV replication in cell culture, synthesis of HIV reverse transcriptase and other virus-specific proteins, that is, behaved as a HIV inhibitor.


Assuntos
Antivirais/farmacologia , Antígenos CD4/farmacologia , HIV-1/efeitos dos fármacos , Anticorpos Monoclonais/efeitos dos fármacos , Anticorpos Monoclonais/metabolismo , Antivirais/síntese química , Antígenos CD4/efeitos dos fármacos , Antígenos CD4/imunologia , Antígenos CD4/metabolismo , Células Cultivadas/efeitos dos fármacos , Células Cultivadas/metabolismo , Depressão Química , Relação Dose-Resposta a Droga , Células Gigantes/efeitos dos fármacos , Proteína gp120 do Envelope de HIV/efeitos dos fármacos , Proteína gp120 do Envelope de HIV/metabolismo , HIV-1/metabolismo , Humanos , Ligação Proteica/efeitos dos fármacos , DNA Polimerase Dirigida por RNA/efeitos dos fármacos , Proteínas Recombinantes/síntese química , Proteínas Recombinantes/farmacologia , Linfócitos T/efeitos dos fármacos , Linfócitos T/metabolismo , Cultura de Vírus
3.
Vopr Virusol ; 39(1): 6-10, 1994.
Artigo em Russo | MEDLINE | ID: mdl-8160451

RESUMO

A number of vectors expressing in E. coli hybrid proteins (receptorotoxins) composed of diphtheria toxin lacking the C-terminal region and CD4-receptor fragment including N-terminal region of the natural protein have been constructed. The receptorotoxins consisting of the CD4 fragment in their N-terminal region were more stable. These recombinant receptorotoxins were cultured with HIV-infected Hut-78 cells and were shown to block HIV infection in vitro.


Assuntos
Antivirais/farmacologia , Antígenos CD4/farmacologia , Toxina Diftérica/farmacologia , Proteínas de Bactérias/genética , Antígenos CD4/genética , Linhagem Celular , Toxina Diftérica/genética , Escherichia coli/genética , Regulação Bacteriana da Expressão Gênica/genética , Vetores Genéticos/genética , HIV-1/efeitos dos fármacos , HIV-2/efeitos dos fármacos , Humanos , Plasmídeos/genética , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/farmacologia , Cultura de Vírus
4.
Vopr Virusol ; 38(6): 253-5, 1993.
Artigo em Russo | MEDLINE | ID: mdl-8303883

RESUMO

Ten hybridomas secreting monoclonal antibodies (Mab) against recombinant HIV-1 and HIV-2 antigens were produced (3 Mab anti-gag protein, 2 anti-env1, and 5 anti-env2). In the immunoblotting assay all the anti-gag Mabs reacted with HIV capsid protein p24, whereas one of them reacted also with p55 protein and with 7 other polypeptides. Another anti-gag Mab cross-reacted with the antigen of subpopulation of human peripheral blood lymphocytes. The third one interacted with the antigen of both HIV-1 and HIV-2. All the 10 Mabs interacted with natural HIV antigens and can be used for identification and differentiation of HIV-1 and HIV-2.


Assuntos
Anticorpos Monoclonais/isolamento & purificação , Produtos do Gene env/imunologia , Produtos do Gene gag/imunologia , HIV-1/imunologia , HIV-2/imunologia , Animais , Anticorpos Monoclonais/análise , Reações Cruzadas , Imunofluorescência , Antígenos HIV/sangue , Humanos , Hibridomas/imunologia , Imunização/métodos , Immunoblotting , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Proteínas Recombinantes/imunologia
5.
Mol Gen Mikrobiol Virusol ; (1): 16-8, 1991 Jan.
Artigo em Russo | MEDLINE | ID: mdl-2023597

RESUMO

The gene for the CD4-membrane glycoprotein-receptor for HIV has been cloned. The 179 amino acids fragment of the CD4-receptor responsible for binding of gp120 HIV glycoprotein has been fused with beta-galactosidase and shown to be expressed in Escherichia coli cells. The recombinant protein in ELISA and immunoblotting techniques reacts with the monoclonal antibodies OKT4A and Leu3A known to block the interaction between the CD4 and gp120 HIV glycoprotein. The recombinant protein can be used for different scientific and practical purposes including studying of the mechanisms for HIV interaction with the sensitive cells as well as for viral gp120 protein purification, etc.


Assuntos
Antígenos CD4/genética , Expressão Gênica , Proteína gp120 do Envelope de HIV/genética , Linfócitos T/imunologia , Sequência de Bases , Western Blotting , Antígenos CD4/imunologia , Clonagem Molecular , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Antígenos HIV/genética , Antígenos HIV/imunologia , Humanos , Dados de Sequência Molecular , Plasmídeos , Mapeamento por Restrição
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