Morpho-anatomy of in vitro germination and cryopreservation of the orchid Cattleya crispa (Orchidaceae Morfoanatomía de la germinación in vitro y criopreservación de la orquídea Cattleya crispa (Orchidaceae) / Morfoanatomía de la germinación in vitro y criopreservación de la orquídea Cattleya crispa (Orchidaceae)

Introduction: Cattleya crispa is an ornamental epiphytic orchid with geographic distribution restricted to the Brazilian Atlantic Forest. Due to predatory extractivism and human-induced habitat loss, this species appears on the Red List of Brazilian Flora. Objective: To characterize morpho-anatomical aspects regarding germination and post-seminal development from C. crispa seeds; as well as studying the effect of cryopreservation on these seeds. Methods: We used light microscopy and electron microscopy to describe the microstructure of a 100 ripe seeds. We evaluated seed viability, seed germination, survival rate and protocorm weight in cryopreserved and non-cryopreserved material, with four replicas per treatment using 20 mg of plant material. Results: The seeds are fusiform, whitish yellow with a length from 700 to 900 µm and a water content of 5 %. Germination began seven days after sowing, the formation of the globular protocorm at 30 days and the formation of the seedling occurred 150 days. The persistent seed coat can compress the protocorm and cause it to collapse. The cryopreserved seeds presented 87.15 % viability, 78.32 % germination, 8.48 % survival and protocorms with 104.27 mg five months after sowing. Data wasn't different to non-cryopreserved seeds. Conclusions: The cryocapability of the seeds shows that cryopreservation can be used for long-term conservation. The results of this work contribute to the overall biology of C. crispa and to the propagation and storage of genetic material for conservation purposes.

Introducción: Cattleya crispa es una orquídea epífita ornamental con distribución geográfica restringida a la Mata Atlántica brasileña. Debido al extractivismo depredador y a la pérdida de hábitat inducida por el hombre, esta especie aparece en la Lista Roja de la Flora Brasileña. Objetivo: Caracterizar aspectos morfoanatómicos de la germinación y desarrollo inicial de semillas de C. crispa; así como estudiar el efecto de la criopreservación de estas semillas. Métodos: Utilizamos microscopía óptica, microscopía electrónica de barrido y microscopía electrónica de transmisión para describir la microestructura en 100 semillas maduras. Evaluamos la viabilidad de la semilla, la germinación de la semilla, la tasa de supervivencia y el peso de los protocormos en el material criopreservado y no criopreservado, con cuatro réplicas por tratamiento de 20 mg de material vegetal. Resultados: Las semillas son fusiformes, amarillo blanquecinas, con una longitud de 700 a 900 µm y un contenido de agua del 5 %. La germinación comenzó siete días después de la siembra, la formación del protocormo globular a los 30 días y la formación de la plántula a los 150 días. La cubierta de semilla persistente puede comprimir el protocormo y provocar su colapso. Las semillas criopreservadas presentaron 87.15 % de viabilidad, 78.32 % de germinación, 8.48 % de supervivencia y protocormos con 104.27 mg a los cinco meses de la siembra. Los datos no fueron diferentes a las semillas no criopreservadas. Conclusiones: La capacidad criogénica de las semillas muestra que la crioconservación puede utilizarse para la conservación a largo plazo. Los resultados de este trabajo contribuyen a la biología general de C. crispa y a la propagación y almacenamiento de material genético con fines de conservación.

Thidiazuron influences the endogenous levels of cytokinins and IAA during the flowering of isolated shoots of Dendrobium.

This study reports the effects of thidiazuron (TDZ) on the endogenous levels of indoleacetic acid (IAA), zeatin, zeatin riboside ([9R]Z), isopentenyladenine and isopentenyladenosine ([9R]iP) as well as structural changes in the apical meristem of Dendrobium Second Love shoots during flower induction and initial development in vitro. The results revealed that the presence of 1.8microM TDZ had a profound effect on the endogenous cytokinins (CKs) and IAA levels of the explants, when compared to those grown on a TDZ-free medium. A significant increase in CKs (especially [9R]iP and [9R]Z) and IAA in the first samples (taken at day 5) grown on TDZ-enriched medium was associated with flower induction, while a second increase in the level of these hormones after 25d of culture was related to flower development. The histological changes detected in the shoot apical meristem of explants grown in the presence of 1.8microM TDZ during 30d of culture are also described. Based on these findings, it is suggested that both auxin and CKs seem to be involved with the floral transition of Dendrobium Second Love in vitro. However, a possible direct effect of TDZ on flower formation is not discarded.