[Importance of quality control of baciloscopy in laboratories that perform diagnosis of tuberculosis]. / Importancia del control de la calidad de la baciloscopia en los laboratorios de diagnóstico de tuberculosis.

BACKGROUND: Baciloscopy is the primary tool for pulmonary tuberculosis diagnosis, being this technique the most used internationally in the search for infectious cases. Quality control is the process of the rechecking smears by a highly qualified observer. AIM: To evaluate and highlight the importance of quality control of smear microscopy in the Provincial Laboratories diagnosticians of Tuberculosis in Cuba. METHODS: This study was conducted at the National Reference Laboratory and Research in Tuberculosis, Leprosy and Mycobacteria in the Institute of Tropical Medicine "Pedro Kouri", Havana, Cuba, Were evaluated 2676 smears received from January 2013 to December 2014, from Provincial Centers of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba, including the special municipality Isla de la Juventud. RESULTS: 2,664 (99.5%) were concordant smears, the correlation obtained for the positive smears were 96.5% and 99.8% for negative. Were identified12 reading errors: 7 (3.5%) false positive and 5 (0.2%) false negatives. Slides were classified with adequate quality of smears in 2039 (76.2%), showed difficulties in realizing the extension in 1464 (54.7%) and staining were adequate in 2343 (87.6%). The kappa index was 0.9674. CONCLUSION: Although there was good agreement between observations it is recommended to improve the quality of extended, maintain staff training program that performs this activity, like regular supervision by specialists, to further improve the quality of diagnosis.

Importancia del control de la calidad de la baciloscopia en los laboratorios de diagnóstico de tuberculosis / Importance of quality control of baciloscopy in laboratories that perform diagnosis of tuberculosis

Introducción: La baciloscopia es la herramienta primaria en el diagnóstico de la tuberculosis (TBC) pulmonar activa, siendo esta la técnica más utilizada internacionalmente en la búsqueda de casos infecciosos. El control de calidad consiste en la relectura de las láminas por un observador altamente calificado. Objetivo: Evaluar y destacar la importancia del control de la calidad de la baciloscopia en los laboratorios provinciales encargados del diagnóstico de TBC en Cuba. Material y Métodos: Este estudio fue realizado en el Laboratorio Nacional de Referencia e Investigaciones de Tuberculosis, Lepra y Micobacterias del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí", La Habana, Cuba. Fueron evaluadas 2.676 láminas recibidas en el período de enero de 2013-diciembre de 2014, procedentes de los diferentes Centros Provinciales de Higiene, Epidemiología y Microbiología de Cuba, incluido el Municipio Especial Isla de la Juventud. Resultados: Hubo 2.664 (99,5%) láminas concordantes, la concordancia obtenida para las láminas positivas fue 96,5% y las negativas 99,8%. Se identificaron 12 errores de lectura: 7 (3,5%) falsos positivos, 5 (0,2%) falsos negativos. Se calificaron láminas con calidad de la muestra adecuada en 2.039 (76,2%), presentaron deficiencias en la realización de la extensión 1.464 (54,7%), y la tinción fue adecuada en 2.343 (87,6%). El índice de kappa fue de 0.9674. Conclusión: Aunque hubo una adecuada concordancia entre las observaciones realizadas, se recomienda mejorar la calidad del extendido, mantener programa de entrenamiento al personal que realiza esta actividad, al igual que las supervisiones periódicas por parte de especialistas, para continuar mejorando la calidad del diagnóstico.

Background: Baciloscopy is the primary tool for pulmonary tuberculosis diagnosis, being this technique the most used internationally in the search for infectious cases. Quality control is the process of the rechecking smears by a highly qualified observer. Aim: To evaluate and highlight the importance of quality control of smear microscopy in the Provincial Laboratories diagnosticians of Tuberculosis in Cuba. Methods: This study was conducted at the National Reference Laboratory and Research in Tuberculosis, Leprosy and Mycobacteria in the Institute of Tropical Medicine "Pedro Kouri", Havana, Cuba, Were evaluated 2676 smears received from January 2013 to December 2014, from Provincial Centers of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba, including the special municipality Isla de la Juventud. Results: 2,664 (99.5%) were concordant smears, the correlation obtained for the positive smears were 96.5% and 99.8% for negative. Were identified12 reading errors: 7 (3.5%) false positive and 5 (0.2%) false negatives. Slides were classified with adequate quality of smears in 2039 (76.2%), showed difficulties in realizing the extension in 1464 (54.7%) and staining were adequate in 2343 (87.6%). The kappa index was 0.9674. Conclusion: Although there was good agreement between observations it is recommended to improve the quality of extended, maintain staff training program that performs this activity, like regular supervision by specialists, to further improve the quality of diagnosis.

[Isolation frequency of the Mycobacterium genus in urine samples]. / Frecuencia de aislamiento del género Mycobacterium en muestras de orina.

Kidney infections caused by Mycobacterium genus are torpid and chronic evolution. In this study were analyzed 177 urine samples (included 110 from HIV patients) received between January 2006 and July 2014 in the National Reference Laboratory of Tuberculosis at Tropical Medicine Institute "Pedro Kourí" (IPK). The results were 17 isolates Mycobacterium tuberculosis, and 30 isolates of nontuberculous mycobacteria were detected. This study confirms the diagnostic importance of these infections especially in HIV/AIDS patients.

Vigilancia de la resistencia a los fármacos antituberculosos en Cuba, 2000–2009 / Surveillance of resistance to antitubercular drugs in Cuba, 2000–2009

Objetivo. Determinar la prevalencia de la resistencia a los fármacos antituberculosos en Cuba en el decenio 2000–2009. Métodos. Se realizó un estudio prospectivo longitudinal. El universo de trabajo estuvo constituido por un total de 2 285 aislamientos de Mycobacterium tuberculosis obtenidos de todo el país en el período comprendido entre el 1 de enero de 2000 y el 31 de diciembre de 2009. Se empleó el método de las proporciones en medio Löwenstein-Jensen con los fármacos de primera línea: isoniazida, estreptomicina, etambutol y rifampicina. Resultados. La resistencia entre los casos nuevos y los pacientes con antecedente de tratamiento previo fue de 8,5% y 37,0%, respectivamente; para estas mismas categorías de caso, la multirresistencia fue de 0,4% y 8,8%, respectivamente. Conclusiones. El presente estudio muestra baja prevalencia de cepas multirresistentes en Cuba. Estos resultados reflejan los avances logrados por el programa nacional de control, que trabaja en la actualidad hacia la eliminación de la tuberculosis como problema de salud pública en el país.

Objective. Determine the prevalence of resistance to antitubercular drugs in Cuba in the 2000–2009 decade. Methods. A prospective longitudinal study was conducted. The sample group consisted of 2 285 Mycobacterium tuberculosis isolates obtained from throughout the country in the period from 1 January 2000 to 31 December 2009. The proportion method was used in Löwenstein-Jensen media with the first-line drugs: isoniazid, streptomycin, ethambutol, and rifampicin. Results. In the new cases and patients with a history of previous treatment, resistance was 8.5% and 37.0%, respectively. In these case categories, multidrug resistance was 0.4% and 8.8%, respectively. Conclusions. This study shows low prevalence of multidrug-resistant strains in Cuba. The results reflect the progress made by the national control program, which is currently working on the elimination of tuberculosis as a public health problem in the country.

Concomitant Mycobacterium avium infection and Hodgkin's disease in a lymph node from an HIV-negative child.

We report a case of an immunocompetent child with simultaneously an infection with Mycobacterium avium and Hodgkin's disease in a cervical lymph node. A positive PCR result for M. avium on a biopsy of the lymph node directed the definitive diagnosis for both etiologies and avoided a possible dissemination of this infection after chemotherapy was started.

[Surveillance of resistance to antitubercular drugs in Cuba, 2000-2009]. / Vigilancia de la resistencia a los fármacos antituberculosos en Cuba, 2000-2009.

OBJECTIVE: Determine the prevalence of resistance to antitubercular drugs in Cuba in the 2000-2009 decade. METHODS: A prospective longitudinal study was conducted. The sample group consisted of 2,285 Mycobacterium tuberculosis isolates obtained from throughout the country in the period from 1 January 2000 to 31 December 2009. The proportion method was used in Löwenstein-Jensen media with the first-line drugs: isoniazid, streptomycin, ethambutol, and rifampicin. RESULTS: In the new cases and patients with a history of previous treatment, resistance was 8.5% and 37.0%, respectively. In these case categories, multidrug resistance was 0.4% and 8.8%, respectively. CONCLUSIONS: This study shows low prevalence of multidrug-resistant strains in Cuba. The results reflect the progress made by the national control program, which is currently working on the elimination of tuberculosis as a public health problem in the country.

Structural studies of cord factors from Mycobacterium simiae related to the capacity for tumour necrosis factor alpha (α-TNF) induction.

The structure of cord factor was studied in several strains of Mycobacterium simiae, including 'habana' TMC 5135, considered as highly immunogenic in experimental tuberculosis and leprosy. The mycolic acids liberated from cord factor were identified in all cases as α'-, α- and keto-mycolates. According to the general NMR and MS data, α'-mycolates were mono-unsaturated and contained from 64 to 68 carbon atoms, whereas α-mycolates mainly presented two 2,3-disubstituted cyclopropane rings and a chain length of 80-91 carbon atoms; keto-mycolates mostly contained one cyclopropane ring and 85-91 carbon atoms. Taking into account the (1)H-NMR results, strains varied in the ratio of the different mycolates, and the high levels of keto-mycolates found in the cord factors of TMC 5135 and ATCC 25275(T) stood out. Notably, MS revealed that the odd carbon number series of α-mycolates (C87-C89) predominated in the cord factor of TMC 5135, in contrast to the remaining studied strains, in which the even (C84-C86) and odd carbon number series appeared more equal. The fine structural differences detected among the cord factors studied did not seem to be relevant to the general capacity of these molecules to induce the secretion of tumour necrosis factor alpha, as the cord factors from several strains of M. simiae (TMC 5135, IPK-342 and ATCC 25275(T)) induced similar amounts of this cytokine in RAW 264.7 cells.

Diagnóstico de mycobacterium tuberculosis en pacientes sintomáticos incluyendo los infectados con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) / Diagnosis of mycobacterium tuberculosis in symptomatic patients including those infected with the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)

Con la aparición del Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH), la tuberculosis ha tenido un significativo aumento, se ha planteado que esta coinfección es denominada como el "dúo mortal": uno acelera el avance de la otra y viceversa, por lo que cada día su temprano diagnóstico se hace más necesario. El objetivo de nuestro trabajo fue analizar, en el periodo de enero 2000 a diciembre 2006, la positividad en el diagnóstico bacteriológico de Mycobacterium tuberculosis en pacientes sintomáticos, incluyendo los pacientes VIH+/SIDA tratados en nuestra Institución Hospitalaria. Las muestras estudiadas fueron procesadas por las técnicas establecidas para el diagnóstico convencional; examen directo, examen de cultivo, e identificación. Mycobacterium tuberculosis solamente fue aislado de un total de 8151 muestras analizadas, en 205 muestras para un 2.5 por ciento de positividad; conjuntamente a las cepas identificadas se les realizó estudios de resistencia y/o sensibilidad por el método de Canetti, donde no se encontró cepas resistentes a ninguna de las drogas antibacilares empleadas, por lo que afirmamos que estudios como éste son imprescindibles para la vigilancia epidemiológica de esta enfermedad. Los resultados obtenidos muestran que la asociación VIH/SIDA/TB en nuestro país ha evolucionado en forma lenta, el incremento no es comparable con los reportados en la literatura internacional, demostrando la eficiencia de los Programas Nacionales de Control establecidos para estas dos enfermedades.

Analysis of the structure of mycolic acids of Mycobacterium simiae reveals a particular composition of alpha-mycolates in strain 'habana' TMC 5135, considered as immunogenic in tuberculosis and leprosy.

Structural analysis of mycolic acids from Mycobacterium simiae (including some 'habana' strains) was carried out using (1)H-NMR and MS. Results indicated that this species presents a general pattern of alpha-, alpha'- and keto-mycolates. alpha-Mycolates were composed of a complex mixture of 82 to 89 carbon atoms (C82-C89), with the predominant molecular species containing two di-substituted cyclopropane rings. Among keto-mycolates (C84-C89), those containing one trans di-substituted cyclopropane ring were the most abundant. The alpha'-mycolates were monounsaturated (C64, C66). According to MS and (1)H-NMR data, the strains studied differed in fine structural details of alpha-mycolates and keto-mycolates. Notably, strain 'habana' TMC 5135 (belonging to the 'habana' group, and considered as highly immunogenic in tuberculosis and leprosy) presented a particular composition of alpha-mycolates, with a major component (C87) containing one cis plus one trans di-substituted cyclopropane ring, unlike the type strain of M. simiae and other strains of the 'habana' group (IPK-220 and IPK-337R), in which the major component (C84) contained two cis di-substituted cyclopropane rings. In spite of this finding, the 'habana' strains were closely related to each other and mainly differed from the type strain of M. simiae in some details of the fine structure of keto-mycolates. The present work indicated that within an identical general pattern of mycolic acids, there is a complex composition in M. simiae and structural variation among different strains, as reported for pathogenic species of the genus. Noteworthy was the particular composition of alpha-mycolates in strain 'habana' TMC 5135.

Analysis of the structure of mycolic acids of Mycobacterium simiae reveals a particular composition of a-mycolates in strain ‘habana TMC 5135, considered as immunogenic in tuberculosis and leprosy

Structural analysis of mycolic acids from Mycobacterium simiae (including some 'habana' strains) was carried out using (1)H-NMR and MS. Results indicated that this species presents a general pattern of alpha-, alpha'- and keto-mycolates. alpha-Mycolates were composed of a complex mixture of 82 to 89 carbon atoms (C82-C89), with the predominant molecular species containing two di-substituted cyclopropane rings. Among keto-mycolates (C84-C89), those containing one trans di-substituted cyclopropane ring were the most abundant. The alpha'-mycolates were monounsaturated (C64, C66). According to MS and (1)H-NMR data, the strains studied differed in fine structural details of alpha-mycolates and keto-mycolates. Notably, strain 'habana' TMC 5135 (belonging to the 'habana' group, and considered as highly immunogenic in tuberculosis and leprosy) presented a particular composition of alpha-mycolates, with a major component (C87) containing one cis plus one trans di-substituted cyclopropane ring, unlike the type strain of M. simiae and other strains of the 'habana' group (IPK-220 and IPK-337R), in which the major component (C84) contained two cis di-substituted cyclopropane rings. In spite of this finding, the 'habana' strains were closely related to each other and mainly differed from the type strain of M. simiae in some details of the fine structure of keto-mycolates. The present work indicated that within an identical general pattern of mycolic acids, there is a complex composition in M. simiae and structural variation among different strains, as reported for pathogenic species of the genus. Noteworthy was the particular composition of alpha-mycolates in strain 'habana' TMC 5135(AU)

Análisis estructural de ácidos mycolic de Mycobacterium simiae (incluidos algunos' habana 'cepas) se llevó a cabo mediante (1) H-RMN y MS. Los resultados indican que esta especie presenta un patrón general de alfa-, y alpha'-ceto-mycolates. alfa-Mycolates se compone de una mezcla compleja de 82 a 89 átomos de carbono (C82-C89), con la predominante especies moleculares que contienen dos di-sustituidos cyclopropane anillos. Entre ceto-mycolates (C84-C89), los que contengan un transporte di-sustituidos cyclopropane anillo son los más abundantes. El alpha'-mycolates se monoinsaturados (C64, C66). EM y de acuerdo con (1) H-RMN de datos, las cepas estudiadas difieren en los detalles estructurales multa de alfa-ceto-mycolates y mycolates. En particular, la cepa 'habana' TMC 5135 (pertenecientes a la 'habana' grupo, y consideradas como altamente inmunogénica de la tuberculosis y la lepra), presentó una composición de alfa-mycolates, con un importante componente (C87) con un más uno cis trans di -sustituidos cyclopropane anillo, a diferencia de la cepa tipo de M. simiae y otras cepas de la "habana Grupo (IPK-220-337R y IPK), en la que el componente principal (C84), que figura dos di-cis sustituido cyclopropane anillos. A pesar de este hallazgo, la 'habana' cepas están estrechamente relacionadas entre sí y sobre todo diferente de la cepa tipo de M. simiae en algunos detalles de la estructura fina de ceto-mycolates. El presente trabajo se indica que dentro de un mismo patrón general de mycolic ácidos, hay una compleja composición de M. simiae y la variación estructural entre las diferentes cepas, como se informa de las especies patógenas del género. Destaca la particular composición de la alfa-mycolates en tensión 'habana' TMC 5135

Identificación de micobacterias no tuberculosas en pacientes VIH/SIDA por métodos convencionales y de fracciones de ácidos micólicos / Identification of non tuberculosis mycobacteria from HIV/AIDS patients by conventional methods and by study of mycolic acid fractions

Las micobacterias no tuberculosas son patógenos oportunistas capaces de producir infecciones pulmonares y extrapulmonares. El aumento de su incidencia se ha acelerado después de la aparición del Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). En este trabajo se estudiaron 40 cepas aisladas de pacientes infectados por el Virus de Inmunodeficiencia Humana, A los aislamientos con significación patogénica se le aplicó el estudio de los patrones de las fracciones de ácidos micólicos. Los resultados fueron: 9 Mycobacterium avium, 8 Mycobacterium fortuitum, 4 Mycobacterium flavescens, 4 Mycobacterium smegmatis, 3 Mycobacterium marinum, 4 Mycobacterium gastri, 2 Mycobacterium gordonae, 2 Mycobacterium chelonae, 1 Mycobacterium xenopi, 1 Mycobacterium phlei, 1 Mycobacterium triviale, y 1 Mycobacterium malmoense. Sólo 5 de estas cepas estaban asociadas a cuadros clínicos: 2 Mycobacterium avium (micobacteriosis diseminada y renal respectivamente), 1 Mycobacterium gordonae (lesiones en piel), 1 Mycobacterium fortuitum (linfadenitis submaxilar), 1 Mycobacterium malmoense (linfadenitis submaxilar). Las especies más frecuentemente aisladas fueron M. avium y M. fortuitum acorde con lo revisado en la literatura. La aplicación simultánea de las técnicas convencionales y el estudio de las fracciones de ácidos micólicos ha permitido obtener resultados más confiables por lo que recomendamos su aplicación en estos estudios.

Non tuberculosis mycobacteria are opportunist pathogens whose frequency in human infections has increased after the appearance of the Acquired Immunodefficiency Syndrome (AIDS). In this work we studied 40 strains isolated from patients infected by the Human Immunodefficiency Virus and isolates with pathogenic significance were further analyzed for diagnostic confirmation by the method that studies mycolic acid fractions. After identification, the results were: 9 Mycobacterium avium, 8 Mycobacterium fortuitum, 4 Mycobacterium flavescens, 4 Mycobacterium smegmatis, 3 Mycobacterium marinum, 4 Mycobacterium gastri, 2 Mycobacterium gordonae, 2 Mycobacterium chelonae, 1 Mycobacterium xenopi, 1 Mycobacterium phlei, 1 Mycobacterium triviale, and 1 Mycobacterium malmoense. Only five of these strains were associated to clinical symptoms: 2 Mycobacterium avium (disseminated and renal mycobacteriosis respectively), 1 Mycobacterium gordonae (skin lesions), 1 Mycobacterium fortuitum (submaxilar lymphoadenitis), and 1 Mycobacterium malmoense (submaxilar lymphoadenitis). The species most frequently isolated were: M. avium and M. fortuitum, in agreement with a bibliographic revision. The simultaneous application of conventional techniques and the study of mycolic acid allowed us to obtain more trustworthy results.

Extracción de ADN de tejidos embebidos en parafina por Chelex-100. ADN de tejidos en parafina por resina quelante / DNA extraction from paraffin embedded tissues by Chelex-100

Antecedentes: El tejido embebido en parafina (TEP) es una fuente invaluable para los estudios moleculares retrospectivos. El método de Chelex-100 ha sido empleado para la extracción de ADN en TEP con el objetivo de ser utilizado posteriormente en la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP). En este trabajo, se describe la utilidad del Chelex-100 para la detección de ADN de Mycobacterium tuberculosis de TEP. Métodos: Se realizaron las técnicas de Hematoxilina-Eosina y Ziehl-Neelsen a TEP de pacientes fallecidos por SIDA. Adicionalmente, se utilizó el método de Chelex-100 para extraer ADN y evaluar dos juegos de iniciadores para la detección de M. tuberculosis empleando la RCP. Resultados: Con el empleo del Chelex- 100 se obtuvo un material genético con buena calidad y cantidad suficiente. Se identificó M. tuberculosis en las muestras analizas a través de la amplificación de la secuencia específica de inserción (IS6110), demostrando la utilidad de la resina quelante para la RCP de fragmentos cortos. Conclusión: El método del Chelex-100 brinda una opción menos costosa, rápida, fácil y segura para los estudios moleculares en Anatomía Patológica

Introduction: Paraffin-embedded tissue (PET) is an invaluable resource for retrospective molecular studies. Chelex-100 method has been used to DNA extraction from PET. The DNA obtained is used in Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. In this work, the utility of Chelex-100 method for the detection of Mycobacterium tuberculosis is showed. Methods: The Hematoxilyn-Eosin and Ziehl-Neelsen techniques were performed in PET samples from three patients dying of AIDS. Additionally, Chelex-100 method was used for DNA extraction from these tissues and two PCR with different primers were evaluated for identification of M tuberculosis. Results: Genetic material with a good quality and in enough quantity was obtained the Chelex- 100 method. M tuberculosis was identified in the samples by PCR, using a specific sequence (IS 6110). We showed the utility of Chelex-100 method in PCR from short DNA fragments. Conclusions: The Chelex-100 method is a rapid, easy, safe and inexpensive option in molecular Pathology research

Linfadenitis ulcerativa por Mycobacterium fortuitum en un paciente con sida / Ulcerative lymphadenitis due to Mycobacterium fortuitum in an AIDS patient

No disponible

Linfadenitis causada por Mycobacterium malmoense en paciente infectado con virus de inmunodeficiencia humana / Lymphadenitis caused by Mycobacterium malmoense in HIV infected patient

Se reporta el primer caso cubano de micobacteriosis causada por Mycobacterium malmoense en un paciente infectado por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH), el cual presentaba adenopatías ulcerativas submandibulares. A partir de las muestras tomadas de las lesiones ulceradas, se aisló una cepa de micobacteria no pigmentada de crecimiento lento, perteneciente al grupo I de Runyon, posteriormente fue clasificada por test bioquímico y por el análisis de las fracciones de ácidos micólicos, como Mycobacterium malmoense.

Aislamiento de Mycobacterium avium-intracellulare a partir de biopsia hepática / Isolation of Mycobacterium avium-intracelllulare from a hepatic biopsy

Se estudió un paciente, de profesión obrero agrícola de 64 años de edad y que refería padecer fiebre crónica desde hacía 2 años, pérdida de peso y marcada astenia. Se ingresó en el Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" y en los estudios realizados se encontró una velocidad de sedimentación globular de 116 mm en 2 h, anemia de 9,8 g porciento de hemoglobina. El estudio laparoscópico se concluyó como una granulomatosis hepática, lo que se confirmó por biopsia hepática en la cual se tomó muestra de hígado para estudio microbiológico y citológico. Microbiológicamente se logra el aislamiento de una cepa no pigmentada de crecimiento lento, la cual fue clasificada por técnicas diagnósticas convencionales establecidas para la clasificación de micobacterias no tuberculosas y la técnica alternativa diagnóstica de cromatografía en capa delgada bidimensional, con el objetivo de reafirmar la clasificación realizada y establecer el patrón de las fracciones de ácidos micólicos. La cepa aislada fue identificada como perteneciente al grupo III de Runyon y clasificada como Mycobacterium avium-intracellulare

Aislamiento de Mycobacterium avium-intracellulare a partir de biopsia hepática / Isolation of Mycobacterium avium-intracellulare starting from hepatic biopsy

Se estudió un paciente, de profesión obrero agrícola de 64 años de edad y que refería padecer fiebre crónica desde hacía 2 años, pérdida de peso y marcada astenia. Se ingresó en el Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí y en los estudios realizados se encontró una velocidad de sedimentación globular de 116 mm en 2 h, anemia de 9,8 g por ciento de hemoglobina. El estudio laparoscópico se concluyó como una granulomatosis hepática, lo que se confirmó por biopsia hepática en la cual se tomó muestra de hígado para estudio microbiológico y citológico. Microbiológicamente se logra el aislamiento de una cepa no pigmentada de crecimiento lento, la cual fue clasificada por técnicas diagnósticas convencionales establecidas para la clasificación de micobacterias no tuberculosas y la técnica alternativa diagnóstica de cromatografía en capa delgada bidimensional, con el objetivo de reafirmar la clasificación realizada y establecer el patrón de las fracciones de ácidos micólicos. La cepa aislada fue identificada como perteneciente al grupo III de Runyon y clasificada como Mycobacterium avium-intracellulare(AU)

[Isolation of Mycobacterium avium-intracellulare from a hepatic biopsy]. / Aislamiento de Mycobacterium avium-intracellulare a partir de biopsia hepática.

A 64 years-old patient, who was a farmer suffering from chronic fever for two years, loss of weight and acute asthenia, was studied. He was admitted to "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute where the studies were conducted and revealed a globular sedimentation rate of 116 mm in 2 hours, and anemia of 9,8g% hemoglobin. The laparoscopic study indicated hepatic granulomatosis that was confirmed by hepatic biopsy in which a sample was taken from the liver to be microbiologically and cytologically examined. By microbiological methods, a non-pigmented slowly-growing strain was isolated, which was classified by conventional diagnostic techniques for the non-tuberculous mycobacteria classification and the alternative diagnosing technique known as bidimensional thin layer chromatography to confirm the previous classification and set the mycolic acid patterns. The isolated strain belonged to group III of Rynyon and was identified as Mycobacterium avium-intracellulare.

Análisis cromatográfico de cepas de Mycobacterium tuberculosis aisladas de un brote en pacientes VIH en Cuba

Se realiza el estudio mediante técnicas cromatográficas, de un grupo de cepas de Mycobacterium tuberculosis aisladas de un brote en pacientes infectados con el virus VIH. Se utilizaron como referencia un grupo de cepas de M. tuberculosis de pacientes sintomáticos respiratorios (SR+14) y cepas patrones de la colección del laboratorio, con el objetivo de comparar cualitativamente los patrones cromatográficos descritos por las cepas aisladas de pacientes. Se obtuvieron y compararon los perfiles cromatográficos de las cepas aisladas de pacientes (ST+) y de VIH+ por la técnica de cromatografía en capa delgada. Se identificó cada uno de los ácidos grasos presentes por la técnica de cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Todas las cepas estudiadas fueron clasificadas como Mycobacterium tuberculosis. Por resultados obtenidos se demuestra la utilidad de las técnicas cromatográficas como técnicas alternativas para el diagnóstico micobacteriano.

A group of strains of Mycobacterium tuberculosis isolated from an outbreak in HIV-infected patients was studied by chromatographic techniques.A group of strains of M. Tuberculosis from symptomatic respiratory patients (SR + 14) and patterns strains from the laboratory collection were used as a reference aimed at making a qualitative comparison of the chromatographic patterns described by the strains isolated from patients. The chromatographic profiles of the strains isolated from patients (SR +) and fro HIV + were obtained and comparede by thin layer chromatography (TLC). Each of the present fatty acids was identified by using the gas chromatography technique (GC) coupled to mass spectrum analysis. All the studied strains were classified as Mycobacterium tuberculosis. According to the results attained, the usefulness of the chromatographic techniques as alternative techniques for the mycobacterial diagnosis is demonstrated.