Correlation between the cytology of urine sediment in fresh sample and smears stained by Papanicolaou and Giemsa methods.

BACKGROUND: Urine excreted by the body has a variable composition in different physiological and pathological conditions. The cells that come from the renal pelvis, ureters, bladder, and urethra are carried by the urine, and therefore, they can be observed in fresh samples and in smears with Giemsa and Papanicolaou stain. AIM: The aim of this study was to show that high correlation that exists between the cytological examination of fresh urine samples and smears stained with Papanicolaou and Giemsa methods. MATERIALS AND METHODS: A total of 45 cases with no tumor of the urinary tract and 36 patients with lower urinary tract neoplasms were included in the study (20: Low-grade urothelial tumors; 16: High-grade urothelial tumors, squamous carcinomas, and adenocarcinomas). The sediments in the urine samples were observed in fresh specimen and in smears stained with Papanicolaou method. RESULTS: The meticulous observation of fresh urinary sediments allowed identification of diverse cellular types associated with varied pathologies. CONCLUSIONS: The cytological examination of urinary samples in fresh smears, and its later diagnostic confirmation with the Papanicolaou stain is important not only as a diagnostic procedure of tumoral or non-tumoral pathologies, but also as a method for the 'screening' of pre-cancerous lesions or carcinoma in situ, especially in high-risk populations.

Argentophilic nucleolus organizer region as a proliferation marker in cervical intraepithelial neoplasia grade 1 of the uterine cervix.

AIM: p16INK4a and argentophilic nucleolus organizer region (AgNOR) can be used as markers for progression of cervical intraepithelial neoplasia grade 1 (CIN1) of the uterine cervix. Our objective was to study the predictive value of the AgNOR technique as a progression marker of CIN1 and its correlation with p16INK4A. MATERIAL AND METHODS: One uterine cervix biopsy from each of 75 patients with diagnosis of CIN1 was selected. All of these patients underwent a second biopsy, and these were also used for the study. RESULTS: The second biopsies showed: regression (20 patients), persistent CIN1 (38 patients), progression to CIN2 (10 patients) and progression to CIN3 (seven patients). p16INK4A showed reactivity in 67 of the 75 first CIN1 biopsies: 12 of the 20 cases that cleared the lesions and the 55 cases with persistent or progressive lesions were positive for p16INK4a (specificity: 40%; sensitivity: 100%; positive predictive value [PPV]: 82%; negative predictive value [NPV]: 100%). Samples with AgNOR areas less than 3.0 µ(2) returned in all cases, but patients whose lesions persisted or progressed to CIN2/CIN3, showed AgNOR areas greater than 3.0 µ(2) in 50/55 cases (specificity: 100%; sensitivity: 91%; PPV: 100%; NPV: 80%). CONCLUSIONS: p16INK4a is expressed in a high percentage of returning lesions. AgNOR might be a better marker of proliferation of CIN1 than p16INK4a (PPV = 100%), which means that a value greater than 3.0 µ(2) indicates the persistence or progression of the lesion. As its NPV is 80%, a value of AgNOR area less than 3.0 µ(2) in CIN1 leaves a margin of doubt about the future behavior of the lesion.

Respuesta inflamatoria genital en la detección de alteraciones por virus del papiloma humano / The inflammatory genital reaction in the detection of alterations by human papilloma virus / Reagào inflamatoria genital na detecgào de alteragòes por Papilomavírus Humano

Disfunción vaginal (DV) (vaginosis/vaginitis) es el síndrome genérico de mayor prevalencia, alcanzando el 50% de todas las mujeres en edad fértil (sintomáticas y asintomáticas). El virus del Papiloma Humano (HPV) se detecta en 30 a 40% de mujeres en edad fértil (sintomáticas y asintomáticas) y se asocia a alteraciones pre-neoplásicas y a carcinoma invasor del cuello uterino. El diagnóstico sindrómico de DV y alteraciones inducidas por HPV es ineficiente y en la actualidad la morfología (macro y microscópica) es el gold standard, pero requiere ordenamiento. El Estudio del Contenido Vaginal es la prueba de laboratorio bacteriológico de mayor solicitud luego del urocultivo. BACOVA normatiza el diagnóstico de vaginosis/vaginitis y ERIGE aumenta el valor predictivo de células que alertan sobre alteraciones epiteliales. Desde 2007 al presente en los talleres BACOVA ERIGE (tinción de Giemsa) se evaluó la sensibilidad de la detección de células anormales exfoliadas. Un 99% de los participantes coincidió con la detección de koi-locitos. BACOVA/ERIGE no reemplaza al Papanicolaou de ninguna manera, pero puede y debe realizarse en laboratorios periféricos, con lo que además del diagnóstico de vaginosis/vaginitis con 100% de valor predictivo, aumentan la cobertura preventiva de estados proliferativos.

Vaginal dysfunction (DV) (vaginosis/vaginitis) is the generic syndrome of major prevalence, reaching 50% of all women in fertile age (symptomatic and asymptomatic). The Human Papillomavirus (HPV) is detected in 30-40% of women in fertile age (symptomatic and asymptomatic) and is associated to pre-neoplastic lesions and invading carcinoma of the uterine cervix. The diagnosis for the symptoms of DV and the alterations induced by HPV are inefficient and at present, the morphology (macroscopic and microscopic) is the standard gold, but it needs better classification. The Study of the Vaginal Content is the test of major request after urocultives in bacteriological laboratories. BACOVA establishes the procedure for the diagnosis of vaginosis/vaginitis and ERIGE increases the predictive value of cells that give the alarm on epithelial alterations. From 2007 to the present sensitivity in the detection of abnormal exfoliated cells from vagina and uterine cervix was evaluated during the BACOVA - ERIGE, (Giemsa's stain) workshops, 99% of the participants coincided with the detection of koilocytes. BACOVA/ERIGE does not replace the Papanicolaou by any means, but it can and must be performed in peripheral laboratories, where apart from the diagnosis of vaginosis/vaginitis with 100% of predictive value, it is possible to increase the detection of precocious proliferative changes of the squamous epithelium.

Disfungào vaginal (DV) (vaginose / vaginite) é a síndrome mais prevalente genérica, atingindo 50% de todas as mulheres em idade fértil (sintomáticas e assintomáticas). O Papilomavírus Humano (HPV) é detectado em 30-40% das mulheres em idade fértil (sintomáticas e assintomáticas) e está associado a alteragòes pré-neoplásicas e a carcinoma invasivo do colo do útero. O diagnóstico sindrómico de DV e alteragòes induzidas pelo HPV é ineficiente e atualmente a morfologia (macroscópica e microscópica) é o padrào ouro, mas precisa de ordenamento. O Estudo do Conteúdo Vaginal é o exame de laboratòrio bacteriológico mais solicitado, seguido da urocultura. BACOVA normatiza o diagnòstico de vaginose/ vaginite e ERIGE aumenta o valor preditivo de células que alertam a respeito de alteragòes epiteliais. Desde 2007 até hoje, nos workshops BACOVA/ERIGE (coloragào de Giemsa), foi avaliada a sensibili-dade da detecgào de células anormais esfoliadas. 99% dos participantes coincidiram com a detecgào de coilócitos. Bacova/Erige nào substitui o Papanicolaou de forma alguma, mas pode e deve ser feito em laboratórios periféricos, com o qual além do diagnóstico de vaginose / vaginite com 100% de valor preditivo, aumentam a cobertura preventiva de estados proliferativos.

Respuesta inflamatoria genital en la detección de alteraciones por virus del papiloma humano / The inflammatory genital reaction in the detection of alterations by human papilloma virus / ReagOo inflamatoria genital na detecgOo de alteragòes por Papilomavírus Humano

Disfunción vaginal (DV) (vaginosis/vaginitis) es el síndrome genérico de mayor prevalencia, alcanzando el 50% de todas las mujeres en edad fértil (sintomáticas y asintomáticas). El virus del Papiloma Humano (HPV) se detecta en 30 a 40% de mujeres en edad fértil (sintomáticas y asintomáticas) y se asocia a alteraciones pre-neoplásicas y a carcinoma invasor del cuello uterino. El diagnóstico sindrómico de DV y alteraciones inducidas por HPV es ineficiente y en la actualidad la morfología (macro y microscópica) es el gold standard, pero requiere ordenamiento. El Estudio del Contenido Vaginal es la prueba de laboratorio bacteriológico de mayor solicitud luego del urocultivo. BACOVA normatiza el diagnóstico de vaginosis/vaginitis y ERIGE aumenta el valor predictivo de células que alertan sobre alteraciones epiteliales. Desde 2007 al presente en los talleres BACOVA ERIGE (tinción de Giemsa) se evaluó la sensibilidad de la detección de células anormales exfoliadas. Un 99% de los participantes coincidió con la detección de koi-locitos. BACOVA/ERIGE no reemplaza al Papanicolaou de ninguna manera, pero puede y debe realizarse en laboratorios periféricos, con lo que además del diagnóstico de vaginosis/vaginitis con 100% de valor predictivo, aumentan la cobertura preventiva de estados proliferativos.(AU)

Vaginal dysfunction (DV) (vaginosis/vaginitis) is the generic syndrome of major prevalence, reaching 50% of all women in fertile age (symptomatic and asymptomatic). The Human Papillomavirus (HPV) is detected in 30-40% of women in fertile age (symptomatic and asymptomatic) and is associated to pre-neoplastic lesions and invading carcinoma of the uterine cervix. The diagnosis for the symptoms of DV and the alterations induced by HPV are inefficient and at present, the morphology (macroscopic and microscopic) is the standard gold, but it needs better classification. The Study of the Vaginal Content is the test of major request after urocultives in bacteriological laboratories. BACOVA establishes the procedure for the diagnosis of vaginosis/vaginitis and ERIGE increases the predictive value of cells that give the alarm on epithelial alterations. From 2007 to the present sensitivity in the detection of abnormal exfoliated cells from vagina and uterine cervix was evaluated during the BACOVA - ERIGE, (Giemsas stain) workshops, 99% of the participants coincided with the detection of koilocytes. BACOVA/ERIGE does not replace the Papanicolaou by any means, but it can and must be performed in peripheral laboratories, where apart from the diagnosis of vaginosis/vaginitis with 100% of predictive value, it is possible to increase the detection of precocious proliferative changes of the squamous epithelium.(AU)

DisfungOo vaginal (DV) (vaginose / vaginite) é a síndrome mais prevalente genérica, atingindo 50% de todas as mulheres em idade fértil (sintomáticas e assintomáticas). O Papilomavírus Humano (HPV) é detectado em 30-40% das mulheres em idade fértil (sintomáticas e assintomáticas) e está associado a alteragòes pré-neoplásicas e a carcinoma invasivo do colo do útero. O diagnóstico sindrómico de DV e alteragòes induzidas pelo HPV é ineficiente e atualmente a morfologia (macroscópica e microscópica) é o padrOo ouro, mas precisa de ordenamento. O Estudo do Conteúdo Vaginal é o exame de laboratòrio bacteriológico mais solicitado, seguido da urocultura. BACOVA normatiza o diagnòstico de vaginose/ vaginite e ERIGE aumenta o valor preditivo de células que alertam a respeito de alteragòes epiteliais. Desde 2007 até hoje, nos workshops BACOVA/ERIGE (coloragOo de Giemsa), foi avaliada a sensibili-dade da detecgOo de células anormais esfoliadas. 99% dos participantes coincidiram com a detecgOo de coilócitos. Bacova/Erige nOo substitui o Papanicolaou de forma alguma, mas pode e deve ser feito em laboratórios periféricos, com o qual além do diagnóstico de vaginose / vaginite com 100% de valor preditivo, aumentam a cobertura preventiva de estados proliferativos.(AU)

A rare case of respiratory disorders associated with two autosomal recessive diseases and male infertility.

The study of nasal ciliary beat frequency (CBF) and ultrastructure may contribute to the understanding of pathognomonic cases of male infertility associated with defects in sperm motility. This study was designed to report a particular case of male infertility, characterized by the association of two respiratory autosomal recessive genetic diseases (alpha-1-antitrypsin deficiency [AAT-D] and primary ciliary dyskinesia [PCD]). A 39-year-old patient with complete sperm immotility, AAT-D, and bronchiectasis was studied in the Laboratory of Male Fertility, the Department of Urology, the Respiratory Center of a Pediatric Hospital, and in the Department of Clinical Medicine of a Rehabilitation Respiratory Hospital. Family history, physical examination, hormonal analysis, microbial assays, semen analysis, nasal ciliary function, and structure study by digital high-speed video photography and transmission electron microscopy are described. A noninvasive nasal biopsy to retrieve ciliated epithelium lining the inferior surface of the inferior nasal turbinates was performed and CBF was determined. Beat pattern was slightly curved and rigid, not wide, and metacronic in all the observed fields analyzed. CBF was 8.2 Hz in average (reference value, 10-15 Hz) Ultrastructural assay revealed absence of the inner dynein arms in 97% of the cilia observed. The final infertility accurate diagnosis was achieved by the study of nasal CBF and ultrastructure contributing to the patient health management and genetic counseling while deciding fatherhood. Beyond this particular case, the present report may open a new field of studies in male infertility, mainly in cases of asthenozoospermia.

Utilidad clínica de la citología espermática / Clinical usefulness of seminal cytology / Utilidade clínica da citologia espermática

En el examen del semen son importantes las determinaciones de la movilidad, el número y la morfología espermática, sin embargo no resultan suficientes. La observación de las células de la progenie espermática o de otras células epiteliales puede contribuir al mejoramiento del diagnóstico clínico. En el presente trabajo se presentan tres casos de estudios de muestras de sémenes donde la observación citológica fue el criterio más importante para la definición de la patología. Finalmente se discuten imágenes celulares publicadas en el Manual de OMS para el Examen y Procesamiento de Semen Humano, 5a edición, donde se confunden células germinales inmaduras con macrófagos. El propósito del trabajo es poner en evidencia la importancia del conocimiento citológico para una correcta interpretación de ciertas patologías seminales.

Utilidad clínica de la citología espermática / Clinical usefulness of seminal cytology / Utilidade clínica da citologia espermática

En el examen del semen son importantes las determinaciones de la movilidad, el número y la morfología espermática, sin embargo no resultan suficientes. La observación de las células de la progenie espermática o de otras células epiteliales puede contribuir al mejoramiento del diagnóstico clínico. En el presente trabajo se presentan tres casos de estudios de muestras de sémenes donde la observación citológica fue el criterio más importante para la definición de la patología. Finalmente se discuten imágenes celulares publicadas en el Manual de OMS para el Examen y Procesamiento de Semen Humano, 5a edición, donde se confunden células germinales inmaduras con macrófagos. El propósito del trabajo es poner en evidencia la importancia del conocimiento citológico para una correcta interpretación de ciertas patologías seminales.(AU)

Motility, number and morphology of sperms are very important in semen examination. Nevertheless, observation of germ cells or other epithelial cells can contribute to the improvement of the clinical diagnosis. In the present paper three clinical cases are presented where the cytological characteristic were the most important criteria to define the pathologies. Finally, some images published by the WHO in the last edition of the "Laboratory Manual for the Examination and Processing of Human Semen" , Fifth Edition, 2010 are discussed; in these images, germ cells are erroneously diagnosed as macrophages. The objective of the present work is to underline the importance of the cytology for a correct interpretation of certain seminal pathologies.(AU)

No exame de sÛmen sÒo importantes as determinaþ§es da motilidade, o número e a morfologia espermática, mas tudo isso nÒo é suficiente. A observaþÒo das células da progÛnie espermática ou de outras células epiteliais pode contribuir para a melhoria do diagnóstico clínico. No trabalho em questÒo sÒo apresentados trÛs casos de estudo das amostras dos sÛmens onde a observaþÒo citológica foi o critério mais importante para a definiþÒo da patologia. Finalmente sÒo discutidas imagens celulares publicadas no Manual da OMS para o Exame e Processamento do SÛmen Humano, 5¬ ediþÒo, onde as células germinativas imaturas sÒo confundidas com macrófagos. O objetivo deste trabalho é destacar a importÔncia do conhecimento citológico para a correta interpretaþÒo de certas patologias seminais.(AU)

Utilidad clínica de la citología espermática / Clinical usefulness of seminal cytology

En el examen del semen son importantes las determinaciones de la movilidad, el número y la morfología espermática, sin embargo no resultan suficientes. La observación de las células de la progenie espermática o de otras células epiteliales puede contribuir al mejoramiento del diagnóstico clínico. En el presente trabajo se presentan tres casos de estudios de muestras de sémenes donde la observación citológica fue el criterio más importante para la definición de la patología. Finalmente se discuten imágenes celulares publicadas en el Manual de OMS para el Examen y Procesamiento de Semen Humano, 5a edición, donde se confunden células germinales inmaduras con macrófagos. El propósito del trabajo es poner en evidencia la importancia del conocimiento citológico para una correcta interpretación de ciertas patologías seminales.(AU)

Urothelial cells in smears from cervix uteri.

OBJECTIVES: To establish the cytological criteria to identify the urothelial cells in cervical smears in order to avoid mistakes in the cytological diagnosis. MATERIALS AND METHODS: Cervical smears from 34 post menopausal women with vesicovaginal fistulas, advanced bladder prolapse and genital erosive lichen planes (vulvar kraurosis) (Group 1) and transitional cell metaplasia of the cervix (TCM, Group 2) were stained with Papanicolaou technique. The cervical samples were taken during the routine annual examination for prevention of the uterine cancer. RESULTS: The smears of cervix from Group 1 showed urothelial cells from the three layers of the transitional epithelium. The umbrella cells are the bigger ones with relatively large nuclei. Frequently, they are multinucleated with single or multiple nucleoli and a typical "frothy" cytoplasm (cytoplasmic vacuoles). The cells of the Group 2 showed nuclei with oval to spindled shapes, some tapered ends, less cytoplasm than squamous metaplastic cells, powdery chromatin, small nucleoli and nuclear grooves. CONCLUSIONS: The umbrella cells may be mistaken for dysplastic cells originating in low grade squamous intraepithelial lesions lesions (LSILs) due to their nuclear and cytoplasm sizes. Therefore, it is important to know the possibility of their appearance in the cervical smears, especially in post menopausal patients in order to avoid a false diagnosis of an intraepithelial lesion. It is unlikely that deeper cells of urothelium would be confused with high grade squamous intraepithelial lesion (HSIL) cells. However, their presence might be a reason of mistake in the diagnosis. TCM is an under-recognized metaplastic phenomenon of the cervix and vagina, which is a mimicker of high-grade squamous intraepithelial lesion. The differential characteristic between umbrella cells, cells from TCM and the deeper urothelial cells, and LSIL and HSIL are detailed in the present paper.

Utilidad de los marcadores tumorales en líquidos de punción pleural / Usefulness of tumor markers in pleural fluids

El diagnóstico de la neoplasia pleural se basa en la demostración de células neoplásicas en fluido pleural (FP) o en biopsias de pleura. Sin embargo, aún en casos de malignidad hay un elevado porcentaje de informes falsos negativos (30-60%). Los FP neoplásicos presentan valores detectables de marcadores tumorales (MT) producidos por las células neoplásicas de la pleura. El objetivo de este trabajo ha sido evaluar la utilidad diagnóstica de algunos marcadores tumorales, de uso corriente en el laboratorio, en los fluidos de punción pleural. En 20 de ellos se analizaron: Antígeno cárcinoembrionario (CEA), fragmentos de la citoqueratina 19 (CYFRA 21-1) y Antígeno CA 125. Se efectuó el estudio fisicoquímico, recuento celular y examen citológico (Papanicolaou). En algunos casos se realizó diagnóstico anátomo-patológico. Los MT se dosaron por inmunoensayo de electroquimioluminiscencia. La comparación se efectuó por Kruskal-Wallis. Las muestras fueron clasificadas en 4 grupos y se determinó en cada uno mediana y rango para CEA (ng/mL), CYFRA (ng/mL) y CA 125 (UI/mL), respectivamente: 1) Citología positiva con diagnóstico previo de cáncer de pulmón (n: 5) 112 (2,3-1.610), 134,4 (45,8-600), 1.048 (498-2999); 2) Citología positiva con diagnóstico previo de cáncer de otro origen (n: 4) 15,28 (1,1-93,80), 108,1 (7,42-497,2), 1.827 (1.103-14.130); 3) Citología negativa con diagnóstico incierto (n: 4) 1,89 (0,91-2,96), 17,1 (1,5-29,6), 578,2 (27,8-12); 4) Citología no concluyente con diagnóstico incierto (n: 7) 31,8 (1,28-370,2), 96,3 (23,8-860), 585 (94,4-4.584). Se observó diferencia significativa entre los grupos. La combinación de citología y MT aumentó el diagnóstico de neoplasia pleural en 25%. Los resultados preliminares permiten concluir que un panel de marcadores tumorales en FP, sumado a los estudios tradicionales, representa una ayuda diagnóstica.

The diagnosis of pleural cancer is supported by the demonstration of neoplastic cells in pleural fluid or in pleural biopsies. However, even in malignancy there are a great number of false negatives results (30-60%). Tumor fluids. To establish the value of different tumor markers, frequently used in clinical laboratories, in the diagnosis of pleural fluids. 20 pleural fluids were processed for physical and chemical study, cellular counting, morphological examination (Papanicolaou stain) and electrochemiluminescense immunoassay for carcinoembryonic antigen (CEA), CYFRA 21-1 and CA 125. The results were analysed by Kruskal-Wallis. In some cases, biopsies were performed. The samples were classified in four groups, and the median and rank were calculated in each case (CEA, CYFRA and CA 125). 1) Positive cytology with previous diagnosis of lung cancer (n: 5) 112 (2.3-1610), 134.4 (45.8-600), 1048 (498-2999) 2) Positive cytology with previous diagnosis of not-lung cancer(n: 4) 15.28 (1.1-93.80), 108.1 (7.42- 497.2),1827 (1103-14130), 3) Negative cytology with uncertain diagnosis (n: 4)1.89 (0.91- 2.96), 17.1 (1.5-29.6), 578.2 (27.8-12, 4) Inconclusive cytology with uncertain diagnosis (n: 7) 31.8 (1.28-370.2), 96.3 (23.8-860), 585 (94.4 -4584). There were stastistic differences among the four groups. Joining the cytology to the assays for tumor markers raised sensitivity by 25%. The assay for tumor markers can be a complementary tool in the diagnosis of effusions.

Utility of AgNor, immunocytochemistry for CEA and tumor markers for diagnosis in serous fluids

Objective: The evaluation of serous fluids stained by morphological methods lacks, in many cases, the necessary accuracy to obtain the correct diagnostics. The objective of this work was to establish the value of complementary tools for the improvement of diagnosis in serous effusions. Methods: Fifty-six serous effusions were processed for morphological staining, immunocytochemistry of carcinoembryonic antigen (CEA), AgNOR counting and electrochemiluminescense immunoassay for tumor markers (TM): CEA, Ca125 and CYFRA 21-1. TM assays were also performed in sera from the same patients. The Sensitivity (Se) and Specificity (Sp) were evaluated for all the methods. Results: Cytology: Se 73 per cent, Sp 100 per cent, CEA by immunocytochemistry: Se 96 per cent, Sp 75 per cent, AgNOR:Se 86 per cent, Sp100 per cent, TM: a) in fluids: CEA, Ca125 and CYFRA 21-1, Se: 29 per cent, 66 per cent and 64 per cent respectively and Sp: 100 por cento, 87 por cento and 100 por cento respectively. b) in sera: CEA, Ca125 and CYFRA 21-1: Se: 27 per cent, 77 per cent and 47 per cent respectively and Sp: 100 per cent, 25 per cent and 75 per cent respectively. CEA (in cells) + TM (fluids): Se 100 per cent and Sp 75 per cent AgNOR + TM (fluids): Se 95 per cent and Sp 87 per cent TM Panel (CEA+Ca125+CYFRA 21-1): a) in fluids: Se 81 per cent and Sp 87 per cent b) in sera: Se 86 per cent and Sp 12 per cent Conclusion: AgNOR assay and immunocytochemistry for CEA were useful as complementary tools in the diagnosis using effusions, raising the Sensitivity of the Cytology from 73 per cent to 86 per cent and 96 per cent respectively. Sensitivity increased with the assays for a panel of TM in fluids, but the high costof these methods does not justify their use for non-conclusive smears.

Células Escamosas Atípicas de Significado Indeterminado: un citodiagnóstico subjetivo / Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance: A subjective cytodiagnosis

El objetivo del presente trabajo es intentar la disminución de la subjetividad que acompaña al citodiagnóstico de células escamosas atípicas de significado incierto (ASCUS) por medio de un parámetro que pueda ser medido y sea útil como valor pronóstico. A 20 extendidos provenientes de cuello uterino coloreados con la técnica de Papanicolaou con diagnóstico de ASCUS (11 metaplasias atípicas, 6 casos de HPV con atipías y 3 casos de anomalías marcadas por hipoestrogenismo) se les aplicó la técnica de AgNOR (regiones del organizador nucleolar afines a Ag) y el área de AgNOR fue medida por citometría de imágenes. Los resultados fueron: 6,0 µ², s=1,60 µ² para metaplasia atípica, 0,90 µ², s=1,05 µ²para HPV con atipías y no detectable para extendidos hipoestrogénicos. Las diferencias entre áreas promedio fueron evaluadas con el test de Student. Se propone 4,4 µ² como valor de corte del área de AgNOR como índice de progresión de las metaplasias atípicas. Los casos de HPV con atipías son insuficientes para definir algún valor de área, y en las pacientes con anomalías marcadas por hipoestrogenismo se recomienda la repetición del extendido post-estímulo estrogénico.

The objective of this paper is to diminish the subjectivity of ASCUS (Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance) diagnosis by means of a parameter useful in the prognosis of the pathology. AgNOR technique was applied to 20 cytologic smears from uterine cervix stained by Papanicolaou method and with ASCUS diagnosis: 11 atypical metaplasias, 6 with atypical keratinizing cells related to human papillomavirus (HPV) infection and 3 with regressive changes by estrogen deficiency. The AgNOR area was determined by image cytometry. The mean AgNOR areas were: 6.0 µ², s=1.60 µ² for atypical metaplastic cells, and 0.90 µ², s=1.05 µ² for smears with HPV with atypical keratinizing cells. AgNOR areas were not measurable in the cases of estrogen deficiency. Differences in the mean AgNOR protein areas were tested by Student's test. The cut-off value proposed for smears with atypical metaplastic cells is 4.4 µ² as a limit of progressive lesions. It was not possible to establish a value for cases with atypical keratinizing cells related to HPV because of the low number of smears. In estrogen deficiency, it is advisable to perform the estrogenic stimulus before taking any decision.

Usefulness of AgNOR technique and CEA expression in atypical metaplastic cells from cervical smears.

OBJECTIVE: To evaluate the proliferating capacity of atypical metaplastic cells in cervical smears by AgNOR technique and image analysis and investigate the probable relation with squamous intraepithelial lesions (SIL) using immunocytochemical assay for carcinoembryonic antigen (CEA). STUDY DESIGN: Eight cervical smears were stained with Papanicolaou stain for diagnosis of atypical metaplastic cells. After removal of the stain the smears were processed with a silver colloidal solution and the AgNOR area determined by image cytometry. Differences in the mean AgNOR protein area between reactive metaplastic cells and controls were tested by Student's t test. The CEA was investigated by immunocytochemical staining in smears with atypical metaplastic cells and smears from high-grade squamous intraepithelial lesions (HSIL). RESULTS: The mean AgNOR areas from atypical metaplastic cells (4.55, 6.66, 4.68, 5.30, 4.97, 6.20, 6.28, and 7.35) were significantly greater those that of intermediate metaplastic cells and cells from low-grade squamous intraepithelial lesions (LSIL) (0.77, 0.99, and 0.82, respectively). The atypical metaplastic cells showed values of mean AgNOR area intermediate between that of basal cells (3.28) and HSIL cells (7.73) or neoplastic cells (16.12). The CEA was strongly expressed by the atypical metaplastic cells. CONCLUSION: The expression of CEA in the atypical metaplastic cells underlies the probable relation to SIL. Although the organizer region areas raised high values, it would be necessary to use a greater number of cases to define whether the AgNOR area is indicative of the proliferative activity of the atypical metaplastic cells.

Técnica de detección de la región del organizador nucleolar en células exfoliadas de cuello uterino / Technique for the assay of nucleolus organizer region in exfoliated cells from uterine cervix

La técnica de detección de la región del organizador nucleolar (AgNOR) fue aplicada a 22 extendidos citológicos de exo y endocervix: 5 con células endocervicales, 2 hipotróficos (controles), 2 atróficos, 4 inflamatorios, 2 con células metaplásicas, 4 con células metaplásicas reactivas y 3 de lesiones intraepiteliales de bajo grado. Los promedios de partículas de AgNOR y el área coloreada aumentaron desde los controles hasta las células metaplásicas reactivas. Esta técnica permite identificar células exfoliadas del cuello uterino con mayor capacidad proliferativa, lo que resulta de utilidad en el citodiagnóstico de lesiones sospechosas en las coloraciones de rutina con el método de Papanicolaou

Técnica de detección de la región del organizador nucleolar en células exfoliadas de cuello uterino / Technique for the assay of nucleolus organizer region in exfoliated cells from uterine cervix

La técnica de detección de la región del organizador nucleolar (AgNOR) fue aplicada a 22 extendidos citológicos de exo y endocervix: 5 con células endocervicales, 2 hipotróficos (controles), 2 atróficos, 4 inflamatorios, 2 con células metaplásicas, 4 con células metaplásicas reactivas y 3 de lesiones intraepiteliales de bajo grado. Los promedios de partículas de AgNOR y el área coloreada aumentaron desde los controles hasta las células metaplásicas reactivas. Esta técnica permite identificar células exfoliadas del cuello uterino con mayor capacidad proliferativa, lo que resulta de utilidad en el citodiagnóstico de lesiones sospechosas en las coloraciones de rutina con el método de Papanicolaou (AU)

Células de Langerhans y lesiones intraepiteliales de cuello uterino / Langerhans cells and intraepithelial lesions of the uteri cervix

Las células de Langerhans fueron demostradas por un método inmunohistoquímico con el anticuerpo anti proteína S-100 en 22 cortes histológicos de cuello uterino: 6 controles, 8 lesiones intraepiteliales de bajo grado y 8 lesiones intraepiteliales de alto grado, en las cuales se tipificó virus de Papiloma Humano. El número de células de Langerhans decrece desde los epitelios normales hasta las lesiones de alto grado (controles: 186 ñ 5/mm², lesiones de bajo grado: 155 ñ 33/mm² y lesiones de alto grado: 39 ñ 17/mm²). Siendo dichas células importantes en el reconocimiento y procesamiento de antígenos exógenos, su disminución en casos de infecciones por virus de Papiloma Humano de alto riesgo se relacionaría con la progresión de la lesión

Células de Langerhans y lesiones intraepiteliales de cuello uterino / Langerhans cells and intraepithelial lesions of the uteri cervix

Las células de Langerhans fueron demostradas por un método inmunohistoquímico con el anticuerpo anti proteína S-100 en 22 cortes histológicos de cuello uterino: 6 controles, 8 lesiones intraepiteliales de bajo grado y 8 lesiones intraepiteliales de alto grado, en las cuales se tipificó virus de Papiloma Humano. El número de células de Langerhans decrece desde los epitelios normales hasta las lesiones de alto grado (controles: 186 ñ 5/mm², lesiones de bajo grado: 155 ñ 33/mm² y lesiones de alto grado: 39 ñ 17/mm²). Siendo dichas células importantes en el reconocimiento y procesamiento de antígenos exógenos, su disminución en casos de infecciones por virus de Papiloma Humano de alto riesgo se relacionaría con la progresión de la lesión (AU)

Lesiones intraepiteliales de cuello uterino: marcadores bioquímicos y virus de papiloma humano / Intraepithelial lesions of the uterine cervix: biochemical markers and human papillomavirus

Con el fin de establecer el valor de ciertos marcadores indicadores del grado de evolución de las neoplasias intraepiteliales cervicales (CIN), se realizó la determinación de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) por enzimoquímica y de antígeno carcinoembrionario (CEA) por inmunomarcación en biopsias y extendidos citológicos, procedentes de cervix uterinos en casos de infección por virus de papiloma humano (HPV) y de CIN de diferentes grados (CIN 1 a CIN 3). La actividad de G6PDH, ensayada en células exfoliadas, fue en aumento desde CIN 1 a CIN 3, donde alcanzó el nivel 3+ en una escala fijada con un máximo de 4+ para el carcinoma pavimentoso. El CEA, demostrado en cortes histológicos y en células exfoliadas de diversas patología de cérvix uterino, varió desde 1+ en las lesiones de bajo grado hasta 3+ en las de alto grado. De los datos obtenidos en G6PDH y CEA, podría inferirse que las lesiones intraepiteliales de cérvix uterino se suceden en forma continua desde la lesión viral hasta CIN 3. Se realizó la tipificación de HPV mediante hibridación in situ. En los condilomas y CIN 1 fue detectado HPV 6/11 episomal y en los CIN 2 se encontraron tipos virales de moderado y alto riesgo predominantemente libres. Todos los CIN 3 fueron positivos para HPV 16/18 en estado integrado. Sin embargo, la presencia de HPV 16/18 no sería un factor por sí mismo suficiente para la completa transformación celular, aunque su presencia sea necesaria para la promoción de la neoplasia cervical

Lesiones intraepiteliales de cuello uterino: marcadores bioquímicos y virus de papiloma humano / Intraepithelial lesions of the uterine cervix: biochemical markers and human papillomavirus

Con el fin de establecer el valor de ciertos marcadores indicadores del grado de evolución de las neoplasias intraepiteliales cervicales (CIN), se realizó la determinación de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) por enzimoquímica y de antígeno carcinoembrionario (CEA) por inmunomarcación en biopsias y extendidos citológicos, procedentes de cervix uterinos en casos de infección por virus de papiloma humano (HPV) y de CIN de diferentes grados (CIN 1 a CIN 3). La actividad de G6PDH, ensayada en células exfoliadas, fue en aumento desde CIN 1 a CIN 3, donde alcanzó el nivel 3+ en una escala fijada con un máximo de 4+ para el carcinoma pavimentoso. El CEA, demostrado en cortes histológicos y en células exfoliadas de diversas patología de cérvix uterino, varió desde 1+ en las lesiones de bajo grado hasta 3+ en las de alto grado. De los datos obtenidos en G6PDH y CEA, podría inferirse que las lesiones intraepiteliales de cérvix uterino se suceden en forma continua desde la lesión viral hasta CIN 3. Se realizó la tipificación de HPV mediante hibridación in situ. En los condilomas y CIN 1 fue detectado HPV 6/11 episomal y en los CIN 2 se encontraron tipos virales de moderado y alto riesgo predominantemente libres. Todos los CIN 3 fueron positivos para HPV 16/18 en estado integrado. Sin embargo, la presencia de HPV 16/18 no sería un factor por sí mismo suficiente para la completa transformación celular, aunque su presencia sea necesaria para la promoción de la neoplasia cervical (AU)