Leptospira spp. in Naturally Infected Dairy Cow from a Brazilian Border Region.

Leptospirosis is an important infectious disease, which can generate large economic losses, especially in the dairy herd. The pathogen that causes this disease may have its entry in Brazilian herds facilitated by the existence of a large extension of land borders. Therefore, the objective of this work was to investigate the presence of DNA and antibodies against Leptospira spp. in samples of vaginal mucus and serum from naturally infected bovine females from small rural dairy farms in a border region. Blood and vaginal mucus samples were collected from 70 Holstein cows, from small rural dairy farms between October 2017 and June 2018. The inclusion criteria for dairy cattle of any breed were aged over 2 years, not vaccinated against leptospirosis, and presenting a history of any reproductive problem such as abortion, stillbirth, repetition of heat, absence of heat, and lack of conception. Blood was collected by puncturing the coccygeal vein; for the collection of vaginal mucus, it was necessary to use a tampon with an applicator. For the detection of anti-Leptospira spp. antibodies, the sera were submitted to microscopic agglutination test (MAT) and, for DNA detection, the vaginal mucus was submitted to the PCR technique. Among the 70 cows, 42.86% had reagents in MAT and the most likely serovar was Wolffi (43.47%). In 74.28% of the vaginal mucus samples, it was possible to amplify the Leptospira spp. DNA. The results of this work show the presence of Leptospira spp. antibodies and DNA in samples of serum and vaginal mucus from naturally infected bovine females from small rural dairy farms in a border region (Brazil × Paraguay). These results demonstrate the importance of considering bovine females as potential vaginal carriers of Leptospira spp. Thus, it highlights the importance of further studies to better understanding of this issue, in addition to carrying out molecular and serological tests, to monitor the infection and further characterize epidemiological studies of leptospirosis in herds from regions that face this international frontier challenge.

Molecular biology as a diagnostic tool for detection of Leptospira spp. in cows of a border region ­ case report

The reproductive efficiency of livestock is the basis for the success of livestock, dairy or beef, and having high reproductive performance depends on several factors within the production system and the presence of infectious diseases of the reproductive sphere in the herd is one of the factors that can compromise that efficiency. The aim of this study was to use molecular biology as a diagnostic tool for the detection of Leptospira spp. DNA in cows with reproductive disorders on a rural property in the municipality of Boca do Acre, Amazonas, Brazil. Vaginal mucus was collected from nine Nelore breeding cows with a history of abortion and birth of weak calves submitted to DNA extraction and nested-PCR technique for 16S gene amplification at the bacterial genus level. Of the nine samples analyzed, five (55.55%) amplified a product of 331bp. The municipality of Boca do Acre is bordered by Peru and Bolivia, and knowledge of the prevalence of the disease, serovars, and circulating Leptospira species is essential for the adoption of measures related to animal husbandry, as well as health education for ranchers and their workers to avoid a possible occupational infection since this disease is considered an important zoonosis. New molecular studies using primers that allow the identification of the Leptospira species and mainly pathogenic species should be conducted in this region in order to elucidate the possible species of this etiological agent and the possible reservoirs of the disease to begin the understanding of the epidemiology of this disease in cattle in this region of border.

Molecular identification of Leptospira interrogans in naturally infected cows from a rural property in the border region: case report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em região fronteiriça: relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.(AU)

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.(AU)

Molecular identification of Leptospira interrogans in naturally infected cows from a rural property in the border region: case report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em região fronteiriça: relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.

Molecular Identification of Leptospira interrogans in Naturally Infected Cows from a Rural Property in the Border Region - Case Report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em Vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em Região Fronteiriça - Relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.

Molecular Identification of Leptospira interrogans in Naturally Infected Cows from a Rural Property in the Border Region - Case Report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em Vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em Região Fronteiriça - Relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.