Cytotoxicity and antimicrobial activity of synthetic peptides alone or in combination with conventional antimicrobials against fish pathogenic bacteria.

AIMS: This study aimed to evaluate the in vitro cytotoxicity and efficacy of synthetic host defence peptides (HDPs), alone or in combination with florfenicol (FFC), oxytetracycline (OTC) or thiamphenicol (TAP), against different pathogenic bacteria isolated from diseased fish. METHODS AND RESULTS: Solid-phase synthesis, purification and characterization of several HDPs were performed manually, using the fluorenylmethyloxycarbonyl protecting group in different resins and via high-performance liquid chromatography-mass spectrometry, respectively. The in vitro cytotoxicity and antimicrobial activity of HDPs, FFC, OTC and TAP against Nile tilapia red blood cells (RBCs) and relevant fish pathogenic bacteria (Aeromonas, Citrobacter, Edwardsiella, Streptococcus, Lactococcus and Vibrio) was determined using the haemolysis assay and broth microdilution method, respectively. The checkerboard assay was used to evaluate the synergy between the most active HDPs and other antimicrobials against the tested strains. MUC 7 12-mer, FFC, OTC and TAP were not cytotoxic to Nile tilapia RBCs, in all tested concentrations. LL-37, (p-BthTX-I)2 and Hylin-a1 were not cytotoxic at concentrations up to 78·13, 19·53 and 9·77 µg ml-1 , respectively. HDPs demonstrated potent antimicrobial activity (minimum inhibitory concentration ≤31·25 µg ml-1 ) against Aeromonas jandaei (KR-12-a5), Citrobacter freundii (Kr-12-a5; (p-BthTX-I)2 ; LL-37; and Hylin a1), Streptococcus agalactiae (Hylin a1; (p-BthTX-I)2 and LL-37), Lactococcus garviae (Hylin a1), and Vibrio fluvialis (KR-12-a5). The combinations of (p-BthTX-I)2 with TAP and LL-37 with FFC showed synergistic activity against C. freundii (fractional inhibitory concentration index of 0·25 and 0·50, respectively). CONCLUSIONS: Synthetic HDPs have the potential as a good treatment option for bacterial diseases in aquaculture. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: The in vivo effectiveness of synthetic HDPs such as KR-12-a5; LL-37; (p-BthTX-I)2 and Hylin a1 can be tested alone or in combination with conventional antimicrobials as a treatment option to reduce the use of antimicrobials in aquaculture.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology / Fagocitose in vivo e hematologia em Astyanax altiparanae, um potencial modelo para tecnologia de propagação mediada

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology.

Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.(AU)

Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.(AU)

Effect of nutraceuticals on acanthocephalan Neoechinorhynchus buttnerae and its toxicity to the host tambaqui Colossoma macropomum.

The production of tambaqui Colossoma macropomum has been undergoing financial losses due to parasitic infection by the acanthocephalan Neoechinorhynchus buttnerae, raising an alert for aquaculture in South America. The lack of adequate treatment and use of unlicensed chemicals encourages research for alternative solutions with minimal side effects. The objectives of this study were to evaluate the in vitro antiparasitic potential of commercial nutraceutical products (Natumix® and BioFish®) against N. buttnerae and to assess the respective in vivo toxic effects on the host tambaqui. For in vitro assays, parasitized fish were necropsied for acanthocephalans sampling. The parasites were exposed to three concentrations (0.078, 0.313 and 1.25 mg/ml) of each product, as well as controls (one without product and another with a solubilizer). For the in vivo acute toxicity test, juvenile fish (<0.1 g) were exposed to five increasing concentrations of each product. Mortality of tambaqui was recorded at 24, 48, 72 and 96 h. The estimated lethal concentration (LC) for 10, 50, 90 and 99% of fish was determined to classify the toxicity of the products on the target species. After in vitro efficacy tests, the highest concentrations (1.25 mg/ml) caused 100% mortality of the parasites in both products, but only Natumix® caused 100% mortality using the intermediate concentration (0.313 mg/ml) after 24 h. According to the acute toxicity result, the LC50 classified the nutraceutical products as slightly toxic for tambaqui. The tested products had a parasiticidal effect on N. buttnerae, and the toxicity test showed that both products have therapeutic potential when added to the diet.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

Essential oils to control ichthyophthiriasis in pacu, Piaractus mesopotamicus (Holmberg): special emphasis on treatment with Melaleuca alternifolia.

In vitro effect of the Melaleuca alternifolia, Lavandula angustifolia and Mentha piperita essential oils (EOs) against Ichthyophthirius multifiliis and in vivo effect of M. alternifolia for treating ichthyophthiriasis in one of the most important South American fish, Piaractus mesopotamicus (Holmberg), were evaluated. The in vitro test consisted of three EOs, each at concentrations of 57 µL L(-1) , 114 µL L (-1) , 227 µL L(-1) and 455 µL L (-1) , which were assessed once an hour for 4 h in microtitre plates (96 wells). The in vitro results demonstrated that all tested EOs showed a cytotoxic effect against I. multifiliis compared to control groups (P < 0.05). The in vivo treatment for white spot disease was performed in a bath for 2 h day(-1) for 5 days using the M. alternifolia EO (50 µL L (-1) ). In this study, 53.33% of the fish severely infected by I. multifiliis survived after the treatment with M. alternifolia (50 µL L (-1) ) and the parasitological analysis has shown an efficacy of nearly 100% in the skin and gills, while all the fish in the control group died. Furthermore, the potential positive effect of M. alternifolia EO against two emergent opportunistic bacteria in South America Edwardsiella tarda and Citrobacter freundii was discussed.

Pharmacokinetic study of enrofloxacin in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) after a single oral administration in medicated feed.

The objective of this study was to evaluate the disposition kinetics of enrofloxacin (ENR) in the plasma and its distribution in the muscle tissue of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) after a single oral dose of 10 mg/kg body weight via medicated feed. The fish were kept at a temperature between 28 and 30 °C. The collection period was between 30 min and 120 h after administration of the drug. The samples were analyzed by high-performance liquid chromatography with a fluorescence detector (HPLC-FLD). The ENR was slowly absorbed and eliminated from the plasma (Cmax = 1.24 ± 0.37 µg/mL; Tmax = 8 h; T1/2Ke  = 19.36 h). ENR was efficiently distributed in the muscle tissue and reached maximum values (2.17 ± 0.74 µg/g) after 8 h. Its metabolite, ciprofloxacin (CIP), was detected and quantified in the plasma (0.004 ± 0.005 µg/mL) and muscle (0.01 ± 0.011 µg/g) for up to 48 h. After oral administration, the mean concentration of ENR in the plasma was well above the minimum inhibitory concentrations (MIC50 ) for most bacteria already isolated from fish except for Streptococcus spp. This way the dose used in this study allowed for concentrations in the blood to treat the diseases of tilapia.

Phytotherapy as an alternative for treating fish disease.

Intensification of livestock rearing often promotes an increase in inappropriate practices that disregard care for the environment, animal health, and workers' health. Intensive fish farming systems are often associated with higher stocking density and massive use of artificial feed. Currently, outbreaks of parasitic, bacterial, and fungal diseases act as major limiting factors for fish farming, meaning that producers have to make use of massive amounts of antibiotics, disinfectants, and pesticides in order to control mortality and avoid huge economic losses. Because of adverse effects on the aquatic environment, terrestrial organisms, and human health (both fish handlers and consumers), this therapy has been criticized. Use of herbal medicines within animal production has shown promise, in that it is natural and biodegradable and has antimicrobial activity against various pathogens, including those relating to fish. Recently, researchers have reported promising effects from many herbal medicines for treating parasitic diseases caused by protozoa and metazoa, and broad activity against bacteria and fungi. This review addresses the current issues regarding indiscriminate use of chemicals and antibiotics in aquaculture and discusses the main findings and methodologies of the latest research on herbal medicines to stimulate and accelerate research in this field, especially in developing countries.

PRIMEIRO REGISTRO DE G. CICHLIDARUM PAPERNA, 1968 EM PRODUÇÃO DE TILÁPIAS (OREOCHROMIS NILOTICUS) DO BRASIL

A larvicultura de tilápia - espécie de peixe mais produzida no Brasil, é caracterizada pelo sistema de criação intensivo que predispõe os animais a uma grande variedade de patógenos, como o ectoparasito Gyrodactylus Nordmann,1832 (Monogenea), responsável por surtos de mortalidade em juvenis de tilápia ao redor do mundo. Apesar disso, não existe informações sobre a fauna de gyrodactílideos no Brasil, dificultando o diagnóstico e controle sanitário deste parasito. O objetivo deste estudo foi realizar a identificação da espécie de Gyrodactylus encontradas parasitando tilápias em pisciculturas no Sudeste e Nordeste do Brasil. Durante avaliação sanitária em 1 piscicultura localizada no estado da Bahia e 2 pisciculturas do estado de São Paulo, observou-se alta infestação de Gyrodactylus sp em larvas de tilápia. Os parasitos foram removidos da pele e nadadeiras e fixados em álcool 96% para estudos de morfologia e de molecular. Os espécimes foram montados em meio de Hoyer para avaliação morfológica do haptor em microscópio de contraste de fases (Nikon E200®). Foram realizadas um total de 25 medidas por espécime com programa Moticam 2.300® e posteriormente comparadas com Gyrodactylus sp previamente descritas em ciclídeos. Para análise molecular, o DNA genômico foi extraído com kit DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) e a região ITS1-5.8S-ITS2 do rRNA foi amplificada e sequenciada u

RELAÇÃO DA TEMPERATURA DA ÁGUA COM OS NÍVEIS DE PARASITISMO POR Cichlidogyrus spp. (MONOGENEA: ANCYROCEPHALIDAE) EM Oreochromis niloticus

O objetivo deste estudo foi avaliar a sazonalidade de Cichlidogyrus spp. parasitando as brânquias de tilápias criadas em tanques-rede e correlacionar os níveis de parasitismo com a temperatura da água. As coletas foram realizadas em duas pisciculturas comerciais, produtoras de tilápia, localizadas no Estado de São Paulo. Uma propriedade situada no Rio Tietê (propriedade 1) e outra no Rio Grande (propriedade 2). Foram coletados mensalmente, 30 peixes de cada uma, no período de setembro de 2013 a agosto de 2014. Após a captura, os animais foram medidos, pesados e mortos por meio de secção da medula espinhal, as brânquias removidas e acondicionadas em formol a 5% e os monogenóideos quantificados. A temperatura foi aferida no final de cada coleta utilizando cinco pontos previamente demarcados em cada piscicultura, usando sonda YSI 55. O teste não-paramétrico de Kruskal Wallis e o teste de Dunn foram utilizados e os dados analisados no software GraphPad Prism 6, para determinar possíveis diferenças de parasitismo nas estações do ano e coeficiente de correlação de Spearman r foi usado para associar o nível parasitismo com as temperaturas. Nas pisciculturas 1 e 2, os valores mais elevados de temperatura foram obtidos no Verão (29,0°C e 29,7°C) e Outono (25,9°C e 26,9°C), assim como os níveis de parasitismo, diferindo significativamente da Primavera (25,4°C e 24,2°C) e Inverno (21,1°C

RELAÇÃO DA TEMPERATURA DA ÁGUA COM OS NÍVEIS DE PARASITISMO POR Cichlidogyrus spp. (MONOGENEA: ANCYROCEPHALIDAE) EM Oreochromis niloticus

O objetivo deste estudo foi avaliar a sazonalidade de Cichlidogyrus spp. parasitando as brânquias de tilápias criadas em tanques-rede e correlacionar os níveis de parasitismo com a temperatura da água. As coletas foram realizadas em duas pisciculturas comerciais, produtoras de tilápia, localizadas no Estado de São Paulo. Uma propriedade situada no Rio Tietê (propriedade 1) e outra no Rio Grande (propriedade 2). Foram coletados mensalmente, 30 peixes de cada uma, no período de setembro de 2013 a agosto de 2014. Após a captura, os animais foram medidos, pesados e mortos por meio de secção da medula espinhal, as brânquias removidas e acondicionadas em formol a 5% e os monogenóideos quantificados. A temperatura foi aferida no final de cada coleta utilizando cinco pontos previamente demarcados em cada piscicultura, usando sonda YSI 55. O teste não-paramétrico de Kruskal Wallis e o teste de Dunn foram utilizados e os dados analisados no software GraphPad Prism 6, para determinar possíveis diferenças de parasitismo nas estações do ano e coeficiente de correlação de Spearman r foi usado para associar o nível parasitismo com as temperaturas. Nas pisciculturas 1 e 2, os valores mais elevados de temperatura foram obtidos no Verão (29,0C e 29,7C) e Outono (25,9C e 26,9C), assim como os níveis de parasitismo, diferindo significativamente da Primavera (25,4C e 24,2C) e Inverno (21,1C

REDUÇÃO DO USO DE FORMALDEÍDO NO TRATAMENTO DA TRICODINÍASE EM TILÁPIAS

Neste estudo, objetivou-se a redução do uso do desinfetante formaldeído no tratamento da tricodiníase em tilápia do Nilo Oreochromis niloticus, um dos principais peixes cultivados no mundo. A efetividade de um protocolo terapêutico (banho único de 15 minutos) contendo 1 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódio (T1) comumente utilizado em pisciculturas e o potencial para redução de 50 % (0,5 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódio T2) e 75% (0,25 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódioT3) do uso do desinfetante foram avaliados. A fase larval dos peixes é a mais afetada pela doença efoi utilizada como modelo. Larvas de tilápias parasitadas (20/tanque) de piscicultura comercial foram distribuídas em 9 tanquesde plástico (três por tratamento). O parasitismo inicial foi registrado (197,67±202,24 tricodinídeos/peixe) através de análise parasitológica de 10 animais. O parasitismo final do tratamento foi baseado na análise de 18 animais por tratamento.A efetividade do tratamento foi calculada pela fórmula ET=100-(Dx100/A). ET é a eficácia do tratamento (%), D é a média de parasitos depois do tratamento e A é a média de parasitos antes do tratamento. Os dados foram submetidos à análise de variância one-way e teste de Tukey, usando o software R. Probabilidade menor ou igual a 0,05 foi considerada estatisticamente significativa. O protocolo T1 (100% de formaldeído) matou

PRIMEIRO REGISTRO DE G. CICHLIDARUM PAPERNA, 1968 EM PRODUÇÃO DE TILÁPIAS (OREOCHROMIS NILOTICUS) DO BRASIL

A larvicultura de tilápia - espécie de peixe mais produzida no Brasil, é caracterizada pelo sistema de criação intensivo que predispõe os animais a uma grande variedade de patógenos, como o ectoparasito Gyrodactylus Nordmann,1832 (Monogenea), responsável por surtos de mortalidade em juvenis de tilápia ao redor do mundo. Apesar disso, não existe informações sobre a fauna de gyrodactílideos no Brasil, dificultando o diagnóstico e controle sanitário deste parasito. O objetivo deste estudo foi realizar a identificação da espécie de Gyrodactylus encontradas parasitando tilápias em pisciculturas no Sudeste e Nordeste do Brasil. Durante avaliação sanitária em 1 piscicultura localizada no estado da Bahia e 2 pisciculturas do estado de São Paulo, observou-se alta infestação de Gyrodactylus sp em larvas de tilápia. Os parasitos foram removidos da pele e nadadeiras e fixados em álcool 96% para estudos de morfologia e de molecular. Os espécimes foram montados em meio de Hoyer para avaliação morfológica do haptor em microscópio de contraste de fases (Nikon E200®). Foram realizadas um total de 25 medidas por espécime com programa Moticam 2.300® e posteriormente comparadas com Gyrodactylus sp previamente descritas em ciclídeos. Para análise molecular, o DNA genômico foi extraído com kit DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) e a região ITS1-5.8S-ITS2 do rRNA foi amplificada e sequenciada u