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1.
J Immunol Methods ; 444: 1-6, 2017 05.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-28189705

RESUMO

To establish a simple and widely accessible technique for rapidly selecting high producing Chinese hamster ovary (CHO) cells engineered to express a monoclonal antibody (mAb), we have exploited the transient display of recombinant protein on their cell surface. In combination with magnetic bead-based methods, we demonstrate the ability to select for cells of high productivity in the absence of any metabolic-based selection method. This technique is sufficient to obtain genetically stable engineered CHO cells via a single step of cell subcloning and yields sought-after stable, high IgG producing clonal cell lines. This technique may also be applied to other types of cells as well as polyclonal Ab cell pools.


Assuntos
Células Produtoras de Anticorpos/metabolismo , Membrana Celular/metabolismo , Clonagem Molecular/métodos , Imunoglobulina G/biossíntese , Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/biossíntese , Cadeias lambda de Imunoglobulina/biossíntese , Separação Imunomagnética/métodos , Animais , Células Produtoras de Anticorpos/imunologia , Células CHO , Membrana Celular/imunologia , Cricetulus , Genes Reporter , Proteínas de Fluorescência Verde/biossíntese , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Humanos , Imunoglobulina G/genética , Imunoglobulina G/imunologia , Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/genética , Cadeias Pesadas de Imunoglobulinas/imunologia , Cadeias lambda de Imunoglobulina/genética , Cadeias lambda de Imunoglobulina/imunologia , Fenótipo , Proteínas Recombinantes/biossíntese , Proteínas Recombinantes/imunologia , Transfecção
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