Contribuição ao imunodiagnóstico da leptospirose humana: ênfase ao uso de anticorpos monoclonais

A prova sorológica de referência na leptospirose ainda é a soroaglutinação microscópica (SAM). Devido á complexidade desta prova avaliamos alguns testes rápidos para triagem dos anticorpos anti-leptospiras na fase aguda da infecção. Na década de 80, uma hemaglutinação passiva, utilizando frações polissacarídicas de leptospiras, foi considerada apropriada ao diagnóstico precoce, porém esta preparação antigênica incluia muitos "antigenos comuns" reconhecidos por anticorpos de 4% dos indivíduos normais. Um novo Elisa (enzyme-linked immunosorbent assay) utilizando uma suspensão de antigenos imunodominantes, resistentes à proteinase K, foi padronizado e avaliado quando ao seu valor diagnóstico. Com 89,9% de sensibilidade e 97,4% de especificidade, esta técnica, referida como PK-ELISA, satisfaz os requisitos necessários para as provas de triagem da leptospirose humana. No entanto, em virtude de alguns reagentes usados nesta preparação antigênica serem importados e muito instáveis, foi proposta a introdução de novos métodos empregando-se anticorpos monoclonais. Em um "Acordo de Pesquisa Cooperativa" entre o Instituto Adolfo Lutz e o Laboratório Fleury foram produzidos hibridomas...

Contribuição ao imunodiagnóstico da leptospirose humana: ênfase ao uso de anticorpos monoclonais / Contribution by imunodiagnosis of the human leptospiroses: emphasis by use of the monoclonal antibodies

A prova sorológica de referência na leptospirose ainda é a soroaglutinação microscópica (SAM). Devido à complexidade desta prova avaliamos alguns testes rápidos para triagem dos anticorpos anti-leptospiras na fase aguda da infecção. Na década de 80, uma hemaglutinação passiva, utilizando frações polissacarídicas de leptospiras, foi considerada apropriada ao diagnóstico precoce, porém esta preparação antigênica incluía muitos ®antígenos comuns¼ reconhecidos por anticorpos de 4 por cento dos indivíduos normais. Um novo ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) utilizando uma suspensão de antígenos imunodominantes, resistentes à proteinase K, foi padronizado e avaliado quanto ao seu valor diagnóstico...

C-reactive protein follow-up of children with acute bacterial meningitis

Twenty-two children with bacterial meningitis were prospectively studied to follow serum levels of C-reactive protein (CRP) at admission, and the 2nd, 5th and 7th days of treatment, and in the cerebrospinal fluid (CSF) at admission, to investigate whether there is any relationship of its levels with the clinical evolution. CRP was measured by latex agglutination and/or ELISA techniques with detection limits of 0.15mg/L and 0.9mg/L, respectively. Patients were classified according to clinical evolution in two groups: uneventful recovery (n=12) and complicated evolution (n=10). Clinical complications observed were: relapse of fever (8), persistent fever (4), arthritis (4), ventricle enlargement (2), subdural effusion (1), subdural empyema (1), ataxia (1), cervical hypotonia (1), deafness (1), endophthalmitis (1), accute otitis media (1), secondary skin infection (1) and treatment change due to poor clinical response (1). A significant decrease in CRP levels was observed among the uneventful recovery group after admission. In contrast, in the group with complicated evolution, CRP levels showed either secondary elevation or remained high continously. Mean serum CRP levels were significantly lower in the uneventful recovery group than in the complicated evolution group on the 5th and 7th days. CRP levels below 20mg/L on the 5th and 7th days were associated with an uneventful recovery, and CRP levels higher than 20mg/L on those same days were associated with a complicated clinical evolution (p=0.01* and p=0.0015*, respectively). We conclude that serumm CRP level monitoring in children with bacterial meningitis provides useful and objective information about their clinical evolution. This procedure is inexpensive and suitable for use in endemic areas lacking sophisticated laboratories.

C-Reactive protein: re-evaluation of a diagnostic laboratory test

C-reactive protein has been a measure of acute phase reactions to inflammatory for 40 years. Recently improved quantitative assays in serum and cerebrospinal fluid (CSF) have allowed a re-evaluation of its potential as a diagnostic laboratory test. The main advances in the newer methods have been that they can provide rapid (hours) information on the hepatocyte synthesis of this molecule during immune response. We have tested its value in patients with presumed bacterial meningitis. Based on our experience, newer standardized, quantitative assessments of C-reactive protein can be very useful in distinguishing between bacterial and other forms of meningeal irritation during during the first few days of hospitalization. Other investigators have indicated that by serial measurement important information on the resolution or continuation of inflammatory processes can be obtained. We recommend improved standardization of this test, and recalculation of its usefulness as a diagnostic laboratory test.

Determinação dos níves de lisozima, IgM total e proteína C-reativa em líquido cefalorraquiano como parâmetros auxiliares no diagnóstico diferencial das meningites / Determination of the níves lisozima, total IgM and C-reactive protein in cerebrospinal fluid as auxiliary parameters in the differential diagnosis of meningitis

O diagnóstico diferencial das meningites bacterianas agudas apresenta, frequentemente, dificuldade na prática clínica. Na tentativa de contribuir para a elucidação deste diagnóstico foram determinados os níveis de lisozima (LZM), IgM total e proteína C-reativa (PCR) em amostras de líquido cefalorraquiano (LCR) de crianças e adultos com meningite bacteriana (N=33) ou linfomonocitária (N=21) e de pacientes dos quais foram afastadas quaisquer possibilidades de infecção do sistema nervoso central (grupo controle N=54). As determinações de IgM e PCR foram realizadas mediante ensaio imunoenzimático (ELISA) com limite de detecção de aproximadamente 0,8 e 0,9 ug/litro respectivamente. A concentração de LZM foi determinada pelo método de "Lysoplate" com limite de detecção de ' ug/ml. As porcentagens de classificação correta dos pacientes do grupo bacteriano, obtidas através de análises discriminantes, com a determinação de cada um desses parâmetros...

Niveles de inmunoglobulinas y lisozimas en sangre de cordon umbilical en recien nacidos de diversas edades gestacionales / Immunoglobulins and lisozyme levels in umbilical cord blood of different gestational age newborns

Fueron determinadas las concentraciones IgG, IgM, IgA y lisozima en 126 muestras de sangre de cordon umbilical de recien nacidos (RN), agrupados de acuerdo con la edad gestacional, que vario entre 31 y 41 semanas de gestacion. Se verifico el aumento de los niveles de IgG a medida que la gestacion se aproxima al termino, siendo este aumento mas acentuado entre las 36 y 37 semanas, con una detencion en los niveles de IgG entre las 40 y 41 semanas de gestacion. No se verifico diferencia significativa entre los niveles de IgG de fetos gemelares, cuando comparados con fetos unicos de una misma edad getacional, tampoco se verificaron cambios importantes en los niveles de IgG entre RN de sexo masculino y femenino. La IgM fue detectada en apenas 25% de nuestras muestras cuyos valores equivalen a los de otros autores. La IgA no fue detectada en ninguna de las muestras. Se determinaron los niveles de lisozima y aunque se ha notado una tendencia al aumento de sus niveles a medida que la gestacion evoluciona a termino, las cifras, en prematuros equivalen a los de termino, mostrando una maduracion precoz de los mecanismos de produccion de esta enzima

Avaliação da prova de hemaglutinação passiva no diagnóstico da leptospirose humana em diversos períodos evolutivos da doença / Evaluation of passive hemagglutination test in the diagnosis of human leptospirosis in different evolutive periods of the illness

Foram realizadas provas de hemaglutinação passiva em amostras séricas de 189 pacientes com leptospirose, distribuídas quanto ao período decorrido após início dos sintomas. Os resultados foram comparados aos obtidos com a prova de referência, a soroaglutinação microscópica. A hemaglutinação passiva revelou, na primeira amostra examinada, maior número de resultados positivos, estatisticamente significante, a nível de 1%, no intervalo de 6 a 10 dias de doença, quando comparada à soroaglutinação. Nos demais intervalos, os valores diagnósticos das provas foram aceitos como iguais, Os resultados sugerem que a prova de hernaglutinação passiva pode ser empregada no acompanhamen to sorológico, como subsídio no estabelecimento do estágio da infecção leptospirótica (AU).

Avaliação da prova de hemaglutinação passiva no diagnóstico da leptospirose humana / Evaluation of passive hemagglutination test for human leptospirosis

A prova de hemaglutinação passiva foi avaliada em relação à soroaglutínação microscópica em 437 amostras de soros provenientes de 192 pacientes com quadro clínico sugestivo de leptospirose, internados no Hospital de Isolamento "Emílio Ribas", em São Paulo. A prova de hemaglutinação passiva apresentou associação significativa com a soroaglutinação microscópica, revelando-se, pois, uma prova alternativa de elevado valor diagnóstico (AU).

Investigaçäo epidemiológica de um novo caso de leishmaniose visceral ocorrido na Grande Säo Paulo, Brasil / Epidemiological research of a new case of visceral leishmaniasis in Greater Sao Paulo, Brazil

Descreve-se uma investigaçäo epidemiológica realizada em zona urbana do município de Säo Paulo, Brasil, para esclarecer um caso de leishmaniose visceral ocorrido em criança de 2 anos de idade, nascida e sempre residente no local. Afastou-se a possibilidade de transmisäo por via transfusional e por vetor biológico, tendo como base os dados levantados da anamnese do doente, os resultados de inquéritos realizados na área em populaçäo humana, utilizando testes de imunofluorescência indireta, hemaglutinaçäo passiva e intradermoreaçäo de Montenegro, em populaçäo canina com o teste de imunofluorescência indireta, além de pesquisa entomológica em mata residual próxima (

Imunodiagnóstico da leptospirose humana. 1. Antígeno polissacarídico para a prova de hemaglutinação passiva / Immunodiagnosis of human leptospirosis. 1. Polysaccharide antigen for passive hemagglutination test

Antígenos polissacarídicos F. foram extraídos de leptospiras dos sorotipos icterohaemorrhagiae e pato c, cuja relação proteína/carboidrato foi de 1,24 e 0,54, respectivamente. Sua especificidade sorológica foi avaliada na reação de hemaglutinação passiva para o diagnóstico da leptospirose humana. Para tanto, hemácias de carneiro previamente fixadas com glutaraldeído foram sensibilizadas com ambas as preparações. Esta prova foi experimentada em 91 soros obtidos de 35 pacientes com leptospirose, causada presumivelmente pelos sorotipos icterohae-morrhagiae, copenhageni, grippothyphosa e pomona. Verificou-se que ambas as frações F. comportaram-se de maneira semelhante. A reação de hemaglutinação passiva foi gênero específica, bastante sensível, positivando-se precocemente na fase aguda da doença. Foram salientadas as vantagens do emprego do antígeno F. patoc, por se tratar de sorotipo não patogênico (AU).

Imunodiagnóstico da leptospirose humana. 2. Estudo comparativo das reações de soroaglutinação microscópica, hemaglutinação passiva e imunofluorescência indireta / Immunodiagnosis of human leptospirosis. 2. Comparative study of microscopic agglutination passive hemagglutination and indirect immunofluorescence tests

Foram realizadas provas de hemaglutinação pa.ssiva e de imunefluorescêncía indireta em 98 soros obtidos de 38 pacientes com leptospirose causada presumivelmente pelos soro tipos icterohaemorrhagiae, copenhageni, grippotyphosa ou pomona. Hemácias de carneiro. sensibilizadas com antígeno polissacarfdico F" obtido de leptospira do. sorotípo patoc, foram utilizadas na hemaglutinação passiva. Para a prova de imunofluorescência indireta foram empregados antígenoa íntegros do. mesmo. sorotipo. Os resultados foram comparados com os obtidos através da prova de aglutinação microscópíca, na qual foram empregados .10 soro tipos patogênicos. As reações de hemaglutinação passiva e de imunofluorescência indireta mostraram ser gênero. específicas, sendo. que a primeira caracterizou-se por ser a mais indicada para o. diagnóstico. precoce da leptospirose humana aguda (AU).

Niveis de imunoglobulinas humanas G, A e M em soros de recém nascidos, crianças e adultos / Levels of human immunoglobulins G, A and M in sera from newborns, children and adults

Foram determinadas as concentrações das diferentes classes de imunoglobulinas humanas G, A e M em soros de recém nascidos, crianças e adultos da cidade de São Paulo, SP Brasil. Os valores obtidos foram comparados com os outros autores e submetidos a análise (AU).

Concentrations of different classes of human immunoglobulins G, A and M were determined in sera from newborns, children and adults in the city of São Paulo, SP Brazil. The values ​​obtained were compared with those of other authors and submitted to analysis (AU).