Detecção do vírus da artrite encefalite caprina no sêmen através das técnicas de PCR e nested-PCR / Caprine arthritis encephalitis virus detected by PCR and nested PCR in goat semen

A Artrite Encefalite Caprina é uma enfermidade de caráter multissistêmico afetando animais de qualquer idade e sexo; causado por um Lentivirus caprino pertencente ao grupo de Lentivirus de Pequenos Ruminantes. Os sintomas conhecidos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite intersticial endurativa. Foi descrito que machos soropositivos apresentavam sêmen infectado pelo Lentivirus e processo inflamatório gradual do testículo. A detecção em amostras de sêmen pelas técnicas de PCR e nested-PCR são caracterizadas como métodos de altas especificidade e sensibilidade provendo resultados rápidos. O objetivo do estudo foi detectar, por meio da técnica molecular de PCR e nested-PCR, a presença de DNA pró-viral do Lentivirus caprino em amostras de sêmen de reprodutores criados no Estado de São Paulo. Das 17 amostras, cinco (29,4%) apresentaram a detecção do vírus provando que há a presença de partículas virais no sêmen dos caprinos reprodutores soropositivos a Atrite Encefalite Caprina estudados.

Caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a lentivirus and may affect animals of any age or sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, chronic interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It has been reported that the testicles of infected animals present infected semen and a gradual inflammatory process. For the detection of the agent in semen samples, PCR and nested PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provide fast results. The objective of this study was to detect the presence of pro-lentiviral DNA in the semen of caprine males in São Paulo State, Brazil, by the PCR and nested PCR molecular techniques. Five (29.4%) of the 17 samples presented positivity for the detection of the virus, proving the presence of viral particles in the semen of male goats seropositive for caprine arthritis encephalitis in this study.

DETECÇÃO DO VÍRUS DA ARTRITE ENCEFALITE CAPRINA NO SÊMEN ATRAVÉS DAS TÉCNICAS DE PCR E NESTED-PCR

ABSTRACT Caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a lentivirus and may affect animals of any age or sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, chronic interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It has been reported that the testicles of infected animals present infected semen and a gradual inflammatory process. For the detection of the agent in semen samples, PCR and nested PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provide fast results. The objective of this study was to detect the presence of pro-lentiviral DNA in the semen of caprine males in São Paulo State, Brazil, by the PCR and nested PCR molecular techniques. Five (29.4%) of the 17 samples presented positivity for the detection of the virus, proving the presence of viral particles in the semen of male goats seropositive for caprine arthritis encephalitis in this study.

RESUMO A Artrite Encefalite Caprina é uma enfermidade de caráter multissistêmico afetando animais de qualquer idade e sexo; causado por um Lentivirus caprino pertencente ao grupo de Lentivirus de Pequenos Ruminantes. Os sintomas conhecidos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite intersticial endurativa. Foi descrito que machos soropositivos apresentavam sêmen infectado pelo Lentivirus e processo inflamatório gradual do testículo. A detecção em amostras de sêmen pelas técnicas de PCR e nested-PCR são caracterizadas como métodos de altas especificidade e sensibilidade provendo resultados rápidos. O objetivo do estudo foi detectar, por meio da técnica molecular de PCR e nested-PCR, a presença de DNA pró-viral do Lentivirus caprino em amostras de sêmen de reprodutores criados no Estado de São Paulo. Das 17 amostras, cinco (29,4%) apresentaram a detecção do vírus provando que há a presença de partículas virais no sêmen dos caprinos reprodutores soropositivos a Atrite Encefalite Caprina estudados.

CAPRINE ARTHRITIS ENCEPHALITIS VIRUS DETECTED BY PCR AND NESTED-PCR IN MILK / DETECÇÃO DO VIRUS DA ARTRITE ENCEFALITE CAPRINA EM LEITE POR PCR E NESTED-PCR

The caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a Lentivirus may affect animals at all ages and sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, cronical interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It was described that mammary glands from infected animals had a gradual non inflammatory diffuse nodular hardening, and also decreased milk production and abnormal physical-chemical milk parameters. The detection on milk samples by PCR and nested-PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provides fast results. The techniques are able to identify nucleic acids on samples with no living virus. In this study, 72 milk samples from infected and seroreagent to IDAG test animals were evaluated. DNA generation with specifics primers, PCR and nested-PCR was conducted for individual amplification from a genomic fragment corresponding to the Pol gene. Fourteen samples (19, 4%) presented positive by PCR at 600 bp length bands and 16 samples (22, 2%) by nested-PCR at 278 bp length bands. Our results show the adequacy for detecting pro viral DNA on milk samples and may be used as a complementary means of Caprine Arthritis and Encephalitis diagnosis.

A artrite encefalite caprina (CAE) é uma doença infecciosa multissistêmica causada por um Lentivirus, que pode infectar animais de idade e sexo variados. Os principais sinais clínicos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite indurativa intersticial. Foi descrito que cabras infectadas apresentavam endurecimento gradativo e difuso do parênquima glandular e com a presença de vários nódulos de consistência dura, além de apresentarem diminuição na produção leiteira e alterações físico-químicas no leite. O exame de amostras de leite pelas técnicas de PCR e nested-PCR para detecção da CAE é caracterizada como métodos com alta especificidade e sensibilidade, oferecendo resultados rápidos. A técnica possibilita identificar vírus em amostras com virus não viável. Nesse estudo, 72 amostras de leite de cabras sororreagentes ao teste de imunodifusão em ágar gel (IDGA) foram avaliadas. Utilizou-se para a produção de DNA primers específicos o gene Pol. As técnicas de PCR e nested-PCR foram conduzidas para amplificar fragmentos genômicos correspondentes ao gene Pol. Catorze amostras (19,4%) apresentaram formação de banda positiva na altura de 600 pb para PCR, e 16 amostras (22,2%) para nested-PCR na altura de 278 pb. Os resultados mostraram que a técnica foi adequada para detectar o DNA pró-viral em amostras de leite e pode ser utilizado como uma ferramenta c

Detecção do vírus da artrite encefalite caprina em amostras de leite de cabras pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e nested-PCR / Caprine arthritis encephalitis virus detected by PCR and nested-PCR in milk

A artrite encefalite caprina (CAE) é uma doença infecciosa multissistêmica causada por um Lentivirus, que pode infectar animais de idade e sexo variados. Os principais sinais clínicos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite indurativa intersticial. Foi descrito que cabras infectadas apresentavam endurecimento gradativo e difuso do parênquima glandular e com a presença de vários nódulos de consistência dura, além de apresentarem diminuição na produção leiteira e alterações físico-químicas no leite. O exame de amostras de leite pelas técnicas de PCR e nested-PCR para detecção da CAE é caracterizada como métodos com alta especificidade e sensibilidade, oferecendo resultados rápidos. A técnica possibilita identificar vírus em amostras com virus não viável. Nesse estudo, 72 amostras de leite de cabras sororreagentes ao teste de imunodifusão em ágar gel (IDGA) foram avaliadas. Utilizou-se para a produção de DNA primers específicos o gene Pol. As técnicas de PCR e nested-PCR foram conduzidas para amplificar fragmentos genômicos correspondentes ao gene Pol. Catorze amostras (19,4%) apresentaram formação de banda positiva na altura de 600 pb para PCR, e 16 amostras (22,2%) para nested-PCR na altura de 278 pb. Os resultados mostraram que a técnica foi adequada para detectar o DNA pró-viral em amostras de leite e pode ser utilizado como uma ferramenta complementar no estudo da transmissão natural do vírus pela ingestão do leite de cabras sororreagentes a CAE.

The caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a Lentivirus may affect animals at all ages and sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, cronical interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It was described that mammary glands from infected goats had a gradual non inflammatory diffuse nodular hardening, and also decreased milk production and abnormal physical-chemical milk parameters. The detection on milk samples by PCR and nested-PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provides fast results. The techniques are able to identify nucleic acids on samples with no living virus. In this study, 72 milk samples from infected and seroreagent to IDAG test animals were evaluated. DNA generation with specifics primers Pol gene, PCR and nested-PCR was conducted for individual amplification from a genomic fragment corresponding to the Pol gene. Fourteen samples (19, 4%) presented positive by PCR at 600 bp length bands and 16 samples (22, 2%) by nested-PCR at 278 bp length bands. The results show that PCR and nested-PCR tecniques were able to detect pro-viral DNA in goat milk samples and may be used as a complementary means of Caprine Arthritis and Encephalitis diagnosis.

Molecular epidemiology and antimicrobial susceptibility testing. Testing of quinolone-resistant Staphylococcus aureus strains isolated in Brazil.

An outbreak of 20 oxacillin-resistant Staphylococcus aureus (ORSA) bloodstream infections (BSIs) was detected in the intensive care unit (ICU) at Hospital Sao Paulo, Brazil. In a surveillance study, 10% of ICU personnel were defined as chronic nasal carriers of ORSA. Thirteen BSIs and five nasal isolates were available for phage typing, restriction endonuclease analysis of plasmid (REAP) and chromosomal DNA hybridized with 32P rRNA gene probe. Susceptibility testing against select antimicrobial agents, including 11 quinolones, six glycopeptides, and five topical agents, was performed by broth microdilution and the disk diffusion tests. Ten of the 13 BSI isolates and four of the five nasal strains were oxacillin and quinolone resistant. The new fluoroquinolones CI-960 and WIN57273, the glycopeptides, and the topical agents ramoplanin, bacitracin, mupirocin, and novobiocin were most active. Fourteen strains, 12 BSI isolates, and three nasal isolates showed the same REAP profile. Moreover, the same REAP and chromosomal profile was detected in at least nine BSI isolates and in two nasal isolates. These strains were nontypable by phage typing. We concluded that nosocomial cross-transmission of a single, multiresistant strain of S. aureus occurred and that the epidemic reservoir was nasal carriage by ICU personnel.