Protective effect of genistein pre-treatment on paraquat hepatotoxicity in rats.

Paraquat (PQ), an herbicide widely used in agriculture, is considered a highly toxic compound. In hepatocytes, P-glycoprotein (P-gp/Abcb1) is a canalicular transporter involved in PQ extrusion from the cell. Previously, we demonstrated that genistein (GNT) induces P-gp in rat liver. In this study, the protective role of GNT pretreatment towards hepatic damage in a model of acute intoxication with PQ in rats, was investigated. Wistar rats were randomized in 4 groups: Control, GNT (5 mg/kg/day sc, 4 days), PQ (50 mg/kg/day ip, last day) and GNT+ PQ. Hepatic lipoperoxidation (LPO) was evaluated by the thiobarbituric acid reactive substances method. Hepatic levels of 4-hydroxynonenal protein adducts (4-HNEp-add) and glutathione-S-transferase alpha (GSTα) protein expression were evaluated by Western blotting. Hepatic glutathione levels and plasma levels of alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) were also measured. Biliary excretion of PQ was studied in vivo and in isolated perfused liver. PQ was quantified by HPLC. PQ significantly increased AST and ALT activities, malondialdehyde and 4-HNEp-add levels, whereby pretreatment with GNT ameliorated this effect. PQ biliary excretion remained unchanged after treatments in both experimental models. Hepatic GSTα expression was augmented in GNT group. GNT pretreatment increased hepatic glutathione levels in PQ + GNT group. These results agree with the lower content of 4-HNEp-adds in GNT + PQ group respect to PQ group. Unexpectedly, increased activity of P-gp did not enhance PQ biliary excretion. Thus, GNT protective mechanism is likely through the induction of GSTα which results in increased 4-HNE metabolism before formation of protein adducts.

Effect of fluoride on bone and growth plate cartilage.

The use of fluoride (F) for therapeutic purposes is controversial and its toxicity is a health problem. The aim of this study was to evaluate the effect of F on endochondral ossification in growing rats. Twenty-four rats of 21 days were divided into 4 groups which received 0, 20, 40 or 80 µmol F/100 g body weight/day for 30 days, through an orogastric tube. Histological evaluation of growth plate cartilage (GPC) and primary and secondary bone were analyzed on sections of the metaphysis of tibias. Total thickness of the GPC (GPC.Th), thickness of resting zone (RZ.Th), proliferative zone (PZ.Th) and hypertrophic zone (HZ.Th); bone volume (BV/TV), trabecular thickness (Tb.Th), trabecular number (Tb.N), trabecular separation (Tb.Sp), and apoptosis by the TUNEL were measured. A hyperplasia of the proliferative zone and a significant increase in PZ.Th with 40 and 80 µmol F without changes in GPC.Th were found. In the secondary trabecular bone, presence of immature trabeculae, peritrabecular inflammatory foci and sinusoidal dilatation were observed. A significant decrease in BV/TV was also found due to a decrease in Tb.Th and a progressive increase was observed in the number of apoptotic nuclei as the dose of F increased. In conclusion, results suggest that prolonged administration (30 days) of F negatively affect the endochondral ossification with increased chondrocyte proliferation and delayed maturity of new bone, causing inflammatory damage, edema, and increased apoptotic bone cells.

Inflamación en el tejido óseo de ratas inducida por fluoruro de sodio / Inflammation in rat bone induced by sodium fluoride

El fluoruro de sodio (NaF) y el monofluorofosfato de sodio (MFP) son compuestos que generan fluoruro, siendo capaces de aumentar ladiferenciacióny proliferaciónde precursores osteoblóticos. El NaF ha demostrado incrementar la densidad mineral óea de la cadera y la columna vertebral, aunque todavía existen controversias en relació con la calidad del hueso neoformado. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las modificaciones histopatológicas del hueso neoformado y los cambios morfométricos óseos bajo el tratamientocon NaF y MFP. Se utilizaron ratas hembras de 21 días de edad las que se dividieron en 3 grupos (n=8 por grupo): grupo control = 1 ml agua/día; grupo NaF = 80 Ìmol NaF/día; y grupo MFP = 80 Ìmol MFP/día. Se obtuvieron las tibias y femures para los siguientes analisis: 1. Analisis histomorfomítrico a nivel del hueso trabecular (volumen óseo trabecular, espesor y ancho trabecular); 2. Analisis morfométricode hueso cortical (area y ancho cortical, perimetro peristico y endostico); 3. Ensayo biomecanico de flexión a tres puntos; 4. Analisis histopatológico. Se halló que a nivel trabecular, tanto el NaF como el MFP mostraron aumento del volumen óseo. A nivel de la diafisis ninguen tratamiento modificó el anchocortical y la carga de fractura a la flexión en ensayo a tres puntos no evidenció diferencias significativas entre los grupos. El analisis histopatológico de los huesos de ratas tratadas con NaF mostró...(AU)

Inflamación en el tejido óseo de ratas inducida por fluoruro de sodio / Inflammation in rat bone induced by sodium fluoride

El fluoruro de sodio (NaF) y el monofluorofosfato de sodio (MFP) son compuestos que generan fluoruro, siendo capaces de aumentar ladiferenciacióny proliferaciónde precursores osteoblóticos. El NaF ha demostrado incrementar la densidad mineral óea de la cadera y la columna vertebral, aunque todavía existen controversias en relació con la calidad del hueso neoformado. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las modificaciones histopatológicas del hueso neoformado y los cambios morfométricos óseos bajo el tratamientocon NaF y MFP. Se utilizaron ratas hembras de 21 días de edad las que se dividieron en 3 grupos (n=8 por grupo): grupo control = 1 ml agua/día; grupo NaF = 80 Ìmol NaF/día; y grupo MFP = 80 Ìmol MFP/día. Se obtuvieron las tibias y femures para los siguientes analisis: 1. Analisis histomorfomítrico a nivel del hueso trabecular (volumen óseo trabecular, espesor y ancho trabecular); 2. Analisis morfométricode hueso cortical (area y ancho cortical, perimetro peristico y endostico); 3. Ensayo biomecanico de flexión a tres puntos; 4. Analisis histopatológico. Se halló que a nivel trabecular, tanto el NaF como el MFP mostraron aumento del volumen óseo. A nivel de la diafisis ninguen tratamiento modificó el anchocortical y la carga de fractura a la flexión en ensayo a tres puntos no evidenció diferencias significativas entre los grupos. El analisis histopatológico de los huesos de ratas tratadas con NaF mostró...

Effect of the treatment with monofluorophosphate on survival and tissular damage in rats with pancreatitis.

BACKGROUND: Monofluorophosphate (MFP) binds to plasma alpha-macroglobulins modifying their structure and antiproteasic activity. The latter is required during pancreatitis, when proteinases are released by the damaged tissue. Previously, it was demonstrated that the treatment with MFP increases the survival of.rats with experimental pancreatitis. METHODS: In this work, the pancreatic damage was quantified through a numerical score evaluating edema, fibrin deposits, neutrophils and mononuclear cells infiltration, necrosis, congestive blood vessels, hemorrhage, vascular thrombosis, and fibrosis in rats with pancreatitis and under treatment with MFP. Ten male Sprague-Dawley rats per group were used: group A: treatment with MFP 30 days before pancreatitis, control A: treatment with vehicle, 30 days before pancreatitis; group B: treatment with MFP for 14 days after pancreatitis; control B: treatment with vehicle for 14 days after pancreatitis, group Sham: rats with simulated surgery. Surviving rats were euthanized after 14 days of the induction of pancreatitis. The score was measured by light microscopy analysis and comparisons were done with One Way ANOVA. The percentage of survival was evaluated by Kaplan-Meier. The score (mean- +/- SEM) and the percentage of survival were considered different with a P < 0,05. RESULTS: Group A: score 8.6 +/- 2.3 (NS vs. control A), survival 70% (P < 0.05 vs. control A); control A: score 11.0 +/- 2.2, survival 40%; group B: score 1.7 +/- 0.9 (P < 0.05 vs. control B), survival 40% (NS vs. control B)); control B: score 7.0 +/- 4.0, survival 40%: group Sham: score 5.3 +/- 1.3, survival 100%. CONCLUSIONS: The treatment with MFP before pancreatitis increased survival without differences in pancreatic damage. The administration of MFP after pancreatitis decreased tissular damage without differences in survival. The treatment of rats with MFP before or after the induction of pancreatitis would improve morbi-mortality.

Effect of the administration of monofluorophosphate on alpha-macroglobulin levels and the clinical course of pancreatitis in rats.

Clinical course of pancreatitis depends partially on the proteinases-antiproteinases balance. Monofluorophosphate (CAS 10163-15-2, MFP) binds to plasmatic antiproteinase alpha-macroglobulin (AM), modifies its homeostasis and, as a consequence, has potential effects on the progression of pancreatitis and other inflammatory processes. The progress of incomplete closed duodenal loop induced pancreatitis was studied in rats with AM homeostasis perturbed by the oral administration of MFP. Twelve rats received 80 micromol MFP/day orally for one month before the induction of pancreatitis. Controls did not receive MFP. Plasmatic amylase activity and AM levels were measured. The day of death was recorded and histopathology of pancreas was performed. Higher survival and less histopathologic changes were observed in rats treated with MFP previous to pancreatitis compared to rats without MFP. Amylase activities were higher in controls and AM levels decreased significantly in controls respect to MFP-treated animals. Higher survival, lower amylasemia and less pancreatic damage in MFP-treated animals suggest a protective effect of the drug in the clinical course of pancreatitis.

Sperm binding glycoprotein is differentially present surrounding the lumen of isthmus and ampulla of the pig's oviduct.

In several mammals a sperm reservoir is formed at the isthmus of the Fallopian tube, providing viable, potentially fertile sperm for an extensive period. In pig (Sus scrofa) the spermadhesin AQN-1 seems to be involved in the establishment of the sperm reservoir. The pig oviductal protein, sperm binding glycoprotein (SBG), binds to sperm and exposes carbohydrate groups that can be recognized by AQN-1. In this study we obtain anti-SBG polyclonal antibodies and use them to localize SBG in the oviduct. Immunohistochemical analysis shows that SBG is present at the apical surface of isthmic and ampullar epithelial cells. The presence of SBG is limited to the upper two-thirds of the crypts of the isthmus and to cells located near the oviductal lumen in the ampulla. The ratio of the amount of SBG detected by western blot is 1:3 (ampulla:isthmus). Sperm entering the Fallopian tube probably contact the epithelial cells at the lumen before they reach the cells at the bottom of the folds. In vitro sperm can bind to isthmus and, at less extent, to ampulla. Thus, the localization and the relative amount of SBG in the isthmus and ampulla of pig's oviduct are compatible with its possible function in sperm binding to oviductal epithelial cells.

[CD11b-positive cells expression in rectal mucosa from ovalbumin sensitized and challenged rabbits]. / Expresión de células CD11b-positivas en mucosa rectal de conejos sensibilizados y desafiados con ovoalbúmina.

Rabbit MAC-1 receptor, homologue to human CD11b is present in macrophages. The aim of the study was to determine quantitative and distributive modifications of CD11b-positive cells that participate in immune response at rectal mucosa, in an animal model of mucosal immunity. New Zealand rabbits were divided into three groups. G1: control; G2: ovalbumin (OVA) sensitized; G3: OVA-senstitized and rectal challenged. Animals were subcutaneously sensitized twice with 70 microg OVA and 30 ml aluminium hydroxide in 2 ml saline solution. Rectal challenge was developed with a solution of 50 mg OVA in 5 ml saline solution. Sensitized groups (G2 and G3) showed a positive PCA (Passive Cutaneous Anaphylaxis) at 1/160 fold dilutions. In G3 we observed a patchy mucosal edema, lymphangiectasis and eosinophil leucocyte infiltration. Cells were counted as the number of cells per high power field. G1: 9.64 (SE 0.22); G2: 18.10 (SE 0.09) and G3: 23.60 (SE 0.29). (G2 vs G1 p < 0.001; G3 vs G1 p < 0.001; G3 vs G2 p < 0.001). We conclude that there is a close relationship between the food antigen OVA penetration (after challenge) and the increase of CD11b positive cells in rectal mucosa. This fact could be due to the cellular influx to the inflammatory site by the action of chemotactic factors released after challenge.

Expresión de células CD11b-positivas en mucosa rectal de conejos sensibilizados y desafiados con ovoalbúmina / CD11 b-positive cells expression in rectal mucosa from ovalbumin sensitized and challenged rabbits

El receptor MAC-1 de conejo, homólogo al CD11b humano, es una proteína presente en los macrófagos. El objetivo del presente trabajo es establecer las modificaciones cuantitativas y distributivas de células CD11bpositivas participantes en la respuesta inmune a nivel de la mucosa rectal, en un modelo animal de inmunidad mucosa. Se estudiaron conejos neocelandeses divididos en tres grupos: G1:control, G2:sensibilizado con ovoalbúmina (OVA) y G3:sensibilizado y desafiado por vía rectal con OVA. Los conejos de los grupos 2 y 3 fueron sensibilizados por vía subcutánea en dos oportunidades, con 2 ml de una suspensión de 70 Ag de OVA en 30 mg de hidróxido de aluminio/ml. El desafío rectal se realizó con una solución de 50 mg OVA en 5 ml de solución salina. La prueba de anafilaxia cutánea pasiva (PCA) fue positiva en G2 y G3 a una dilución de 1/160. En el grupo sensibilizado y desafiado se observó edema mucoso parcheado, imágenes de linfangiectasias e infiltración de eosinófilos. Las células se contaron como número de células por campo de mayor ...(AU)

Expresión de células CD11b-positivas en mucosa rectal de conejos sensibilizados y desafiados con ovoalbúmina / CD11 b-positive cells expression in rectal mucosa from ovalbumin sensitized and challenged rabbits

El receptor MAC-1 de conejo, homólogo al CD11b humano, es una proteína presente en los macrófagos. El objetivo del presente trabajo es establecer las modificaciones cuantitativas y distributivas de células CD11bpositivas participantes en la respuesta inmune a nivel de la mucosa rectal, en un modelo animal de inmunidad mucosa. Se estudiaron conejos neocelandeses divididos en tres grupos: G1:control, G2:sensibilizado con ovoalbúmina (OVA) y G3:sensibilizado y desafiado por vía rectal con OVA. Los conejos de los grupos 2 y 3 fueron sensibilizados por vía subcutánea en dos oportunidades, con 2 ml de una suspensión de 70 µg de OVA en 30 mg de hidróxido de aluminio/ml. El desafío rectal se realizó con una solución de 50 mg OVA en 5 ml de solución salina. La prueba de anafilaxia cutánea pasiva (PCA) fue positiva en G2 y G3 a una dilución de 1/160. En el grupo sensibilizado y desafiado se observó edema mucoso parcheado, imágenes de linfangiectasias e infiltración de eosinófilos. Las células se contaron como número de células por campo de mayor ...

Expresión de células CD11b-positivas en mucosa rectal de conejos sensibilizados y desafiados con ovoalbúmina. / [CD11b-positive cells expression in rectal mucosa from ovalbumin sensitized and challenged rabbits]

Rabbit MAC-1 receptor, homologue to human CD11b is present in macrophages. The aim of the study was to determine quantitative and distributive modifications of CD11b-positive cells that participate in immune response at rectal mucosa, in an animal model of mucosal immunity. New Zealand rabbits were divided into three groups. G1: control; G2: ovalbumin (OVA) sensitized; G3: OVA-senstitized and rectal challenged. Animals were subcutaneously sensitized twice with 70 microg OVA and 30 ml aluminium hydroxide in 2 ml saline solution. Rectal challenge was developed with a solution of 50 mg OVA in 5 ml saline solution. Sensitized groups (G2 and G3) showed a positive PCA (Passive Cutaneous Anaphylaxis) at 1/160 fold dilutions. In G3 we observed a patchy mucosal edema, lymphangiectasis and eosinophil leucocyte infiltration. Cells were counted as the number of cells per high power field. G1: 9.64 (SE 0.22); G2: 18.10 (SE 0.09) and G3: 23.60 (SE 0.29). (G2 vs G1 p < 0.001; G3 vs G1 p < 0.001; G3 vs G2 p < 0.001). We conclude that there is a close relationship between the food antigen OVA penetration (after challenge) and the increase of CD11b positive cells in rectal mucosa. This fact could be due to the cellular influx to the inflammatory site by the action of chemotactic factors released after challenge.

[Biological model for detection of food antigens]. / Modelo biológico para la detección de antígenos alimentarios.

Antigenic macromolecules present in food can induce inflammatory allergic reaction in sensitized persons. The aim of the present work is the development of an animal model to detect food antigens based on hypersensitivity reaction after food ingestion. New Zealand rabbits were divided in 5 groups. Group 1 (GI): control. G2: Ovalbumin (OVA) sensitized. G3: sensitized and orally challenged with OVA. G4: OVA sensitized and phosphate buffer solution challenged (PBS). G5: sensitized and challenged with OVA. Samples from cecum were stained with Alcian Blue pH < 1 for mast cells and with silver method for enteroendocrine cells (EEC). Other samples were immunostained with anti CD5 and CD25 monoclonal antibodies. Specific IgE levels were detected by PCA. Histopathology of G5 showed patchy edema, lymphangiectasia and eosinophilic infiltration. Results were expressed as cells per HPF (high power field); Mast cells in G1: 1.33; G2: 12.80 and G5: 10.20. Enteroendocrine cells in surface epithelium: G1: 1.6; G2: 6.0; G5: 4.2 and in deep epithelium: G1: 3.0; G2: 12.0 and G5: 7.3. Lymphocytes CD5+ in G1: 24.21: G2: 22.12 and G5: 23.97 and CD25+ in G1: 12.10: G2: 14.30 and G5: 21.68. Group 3 were similar to G1 and G4 to G2. We observed: mast cells increased in number probably due to OVA induced response. EEC showed an increase in sensitized animals because of higher expression of cytoplasmatic granules or differentiation from stem cells. Decrease in EEC number in challenged groups was likely to be based on vesicles release. Total T cells showed no significant differences among groups. CD 25+ cells were higher in sensitized and challenged animals. We concluded that rabbit model of sensitization and oral challenge is valid to study ingested food antigens and potential digestive pathologic reactions.

Modelo biológico para la detección de antígenos alimentarios / Biological model for detection of food antigens

Antigenic macromolecules present in food can induce inflammatory allergic reaction in sensitized persons. The aim of the present work is the development of an animal model to detect food antigens based on hypersensitivity reaction after food ingestion. New Zealand rabbits were divided in 5 groups. Group 1 (GI): control. G2: Ovalbumin (OVA) sensitized. G3: sensitized and orally challenged with OVA. G4: OVA sensitized and phosphate buffer solution challenged (PBS). G5: sensitized and challenged with OVA. Samples from cecum were stained with Alcian Blue pH < 1 for mast cells and with silver method for enteroendocrine cells (EEC). Other samples were immunostained with anti CD5 and CD25 monoclonal antibodies. Specific IgE levels were detected by PCA. Histopathology of G5 showed patchy edema, lymphangiectasia and eosinophilic infiltration. Results were expressed as cells per HPF (high power field); Mast cells in G1: 1.33; G2: 12.80 and G5: 10.20. Enteroendocrine cells in surface epithelium: G1: 1.6; G2: 6.0; G5: 4.2 and in deep epithelium: G1: 3.0; G2: 12.0 and G5: 7.3. Lymphocytes CD5+ in G1: 24.21: G2: 22.12 and G5: 23.97 and CD25+ in G1: 12.10: G2: 14.30 and G5: 21.68. Group 3 were similar to G1 and G4 to G2. We observed: mast cells increased in number probably due to OVA induced response. EEC showed an increase in sensitized animals because of higher expression of cytoplasmatic granules or differentiation from stem cells. Decrease in EEC number in challenged groups was likely to be based on vesicles release. Total T cells showed no significant differences among groups. CD 25+ cells were higher in sensitized and challenged animals. We concluded that rabbit model of sensitization and oral challenge is valid to study ingested food antigens and potential digestive pathologic reactions.

Modificaciones de las células enteroendocrinas en gastritis por Helicobacter pylori / Enteroendocrine cells modifications in Helicobacter pylori gastritis

Objetivo: Estudiar las modificaciones en número y distribución de las células entero endocrinas (CEE) en el antro gástrico de pacientes con infección por Helicobacter pylori (HP), para demostrar su participación en la respuesta inmune. Material y Método: Se utilizaron biopsias de antro gástrico de veintiseis (26) pacientes, entre 40 y 60 años de edad. Las muestras se colorearon con HE y giemsa modificado e inmunomarcaron con Cromogranina A. Cinco pacientes integraron el grupo control. Once pacientes mostraron gastritis crónica activa y los diez restantes gastritis atrófica multifocal (AMF), ambas asociadas a HP. Las CEE se cuantificaron refiriéndoselas cada 100 células epiteliales y se evaluó el patrón de distribución de las mismas. Resultados: En antros de pacientes controles (normales), la distribución de las CEE relacionadas fue uniforme con una media de 19,51 CEE/100. En los procesos inflamatorios, se detectó 12.01 CEE/100 en las gastritis crónicas y 6.31 CEE/100 en las AMF. Asimismo se observó una distribución irregular de las CEE relacionadas con áreas inflamatorias o con folículos linfoides. Conclusiones: La disminución de las CEE correspondería a una degranulación y luego debido a la agresión del HP, a la desaparición o inhibición de las stem cell hacia la línea endócrina. La persistencia de CEE en proximidad a las áreas de mayor infiltrado inflamatório, sugeriría su participación modulando esta respuesta, probablemente liberando péptidos que interactúan con linfócitos T, macrófagos y eosinófilos. Las CEE en el antro gástrico tendrían una intervención activa en la reacción inmune provocada por el HP. (Au)

Modificaciones de las células enteroendocrinas en gastritis por Helicobacter pylori / Enteroendocrine cells modifications in Helicobacter pylori gastritis

Objetivo: Estudiar las modificaciones en número y distribución de las células entero endocrinas (CEE) en el antro gástrico de pacientes con infección por Helicobacter pylori (HP), para demostrar su participación en la respuesta inmune. Material y Método: Se utilizaron biopsias de antro gástrico de veintiseis (26) pacientes, entre 40 y 60 años de edad. Las muestras se colorearon con HE y giemsa modificado e inmunomarcaron con Cromogranina A. Cinco pacientes integraron el grupo control. Once pacientes mostraron gastritis crónica activa y los diez restantes gastritis atrófica multifocal (AMF), ambas asociadas a HP. Las CEE se cuantificaron refiriéndoselas cada 100 células epiteliales y se evaluó el patrón de distribución de las mismas. Resultados: En antros de pacientes controles (normales), la distribución de las CEE relacionadas fue uniforme con una media de 19,51 CEE/100. En los procesos inflamatorios, se detectó 12.01 CEE/100 en las gastritis crónicas y 6.31 CEE/100 en las AMF. Asimismo se observó una distribución irregular de las CEE relacionadas con áreas inflamatorias o con folículos linfoides. Conclusiones: La disminución de las CEE correspondería a una degranulación y luego debido a la agresión del HP, a la desaparición o inhibición de las stem cell hacia la línea endócrina. La persistencia de CEE en proximidad a las áreas de mayor infiltrado inflamatório, sugeriría su participación modulando esta respuesta, probablemente liberando péptidos que interactúan con linfócitos T, macrófagos y eosinófilos. Las CEE en el antro gástrico tendrían una intervención activa en la reacción inmune provocada por el HP.

Células enteroendocrinas intraepiteliales en ciego y apéndice de conejos sensibilizados con ovoalbumina / Intraepithelial enteroendocrine cells in cecum and appendix from ovalbumin sensitized rabbits

Las células enteroendócrinas se relacionan con la motilidad, secreción y absorción de nutrientes. Actualmente está en estudio su relación con la respuesta inmune. El ciego y el apéndice del conejo, contienen en su luz bacterias y nutrientes en distintas etapas de digestión, con potencial acción antígenica. En el presente trabajo se evalúan las modificaciones en número y distribución de las células enteroendócrinas intraepiteliales en ciego y apéndice cecal de conejos sensibilizados con ovoalbúmina (OVA). Se utilizaron conejos neozelandeses adultos divididos en dos grupos, G1: grupo control (n=10). G2: sensibilizados vía intraperitoneal con OVA (n=10). Muestra de ciego y apéndice se fijaron en formol buffer al 10 por ciento marcándose las células enteroendócrinas con anticuerpo monoclonal anti-cromogranina A. En cada animal se contaron 400 campos microscópicos a mayor aumento, refiriéndose el número de células enteroendócrinas cada 100 enterocitos. En ciego se consideró epitelio superficial y criptal, mientras que en apéndice, epitelio superficial, criptas superficiales y criptas profundas. En epitelio superficial de ciego se hallaron 1,6 CEI/100 enterocitos en epitelio superficial y 3/100 en criptas. En G2 6 CEI/100 en epitelio superficial y 12/100 en criptas. La diferencia entre G1 y G2 fue estadísticamente significativa (p<0,05). En apéndice el epitelio superficial del G1 mostró 5,2/100 mientras que en G2 fue de 5.4/100 (no significativo). Las criptas superficiales evidenciaron 8,5/100 (G1) y 11.3/100 (G2) (p<0,05). En criptas profundas 4,9/100 (G1) y 8,5/100 (G2) (p<0,05). En los animales sensibilizados se detectó aumento significativo en la cantidad de células enteroendócrinas en ambos órganos. Dicho incremento podría atribuirse a un aumento de los gránulos intracitoplasmáticos o a la diferenciación de células generatrices a células APUD, como respuesta a la sensibilización.

Células enteroendocrinas intraepiteliales en ciego y apéndice de conejos sensibilizados con ovoalbumina / Intraepithelial enteroendocrine cells in cecum and appendix from ovalbumin sensitized rabbits

Las células enteroendócrinas se relacionan con la motilidad, secreción y absorción de nutrientes. Actualmente está en estudio su relación con la respuesta inmune. El ciego y el apéndice del conejo, contienen en su luz bacterias y nutrientes en distintas etapas de digestión, con potencial acción antígenica. En el presente trabajo se evalúan las modificaciones en número y distribución de las células enteroendócrinas intraepiteliales en ciego y apéndice cecal de conejos sensibilizados con ovoalbúmina (OVA). Se utilizaron conejos neozelandeses adultos divididos en dos grupos, G1: grupo control (n=10). G2: sensibilizados vía intraperitoneal con OVA (n=10). Muestra de ciego y apéndice se fijaron en formol buffer al 10 por ciento marcándose las células enteroendócrinas con anticuerpo monoclonal anti-cromogranina A. En cada animal se contaron 400 campos microscópicos a mayor aumento, refiriéndose el número de células enteroendócrinas cada 100 enterocitos. En ciego se consideró epitelio superficial y criptal, mientras que en apéndice, epitelio superficial, criptas superficiales y criptas profundas. En epitelio superficial de ciego se hallaron 1,6 CEI/100 enterocitos en epitelio superficial y 3/100 en criptas. En G2 6 CEI/100 en epitelio superficial y 12/100 en criptas. La diferencia entre G1 y G2 fue estadísticamente significativa (p<0,05). En apéndice el epitelio superficial del G1 mostró 5,2/100 mientras que en G2 fue de 5.4/100 (no significativo). Las criptas superficiales evidenciaron 8,5/100 (G1) y 11.3/100 (G2) (p<0,05). En criptas profundas 4,9/100 (G1) y 8,5/100 (G2) (p<0,05). En los animales sensibilizados se detectó aumento significativo en la cantidad de células enteroendócrinas en ambos órganos. Dicho incremento podría atribuirse a un aumento de los gránulos intracitoplasmáticos o a la diferenciación de células generatrices a células APUD, como respuesta a la sensibilización. (AU)

Poblacion intraepitelial de linfocitos T en ileon de conejos sensibilizados con ovoalbumina / Intraepithelial T cell population in ileum from ovalbumin sensitized rabbit

Se caracterizó la población de linfocitos T intraepiteliales del íleon terminal de conejos neozelandeses sensibilizados com ovoalbúmina por vía intraperitoneal y desafiados por vía oral. Los nivels de IgE anti-OVA obtenidos durante la sensibilización se evaluaron mediante el test de anafilaxia cutánea pasiva (PCA) positiva para una dilución de 1/160. La respuesta anafilácticta en el intestino luego del desafío oral fue confirmada por la aparición de edema en la vellosidad y marcada degranulación mastocitaria. Se analizaron en cada tejido, células T totales (CD5+), subpoblación de linfocitos T (CD4+) y células que expresaron MHC II R-RQ (marcador de activación celular). Las células positivas se contaron en 30 vellosidades por animal, presentándose los valores como número de células positivas cada 1000 núcleos de células absortivas. El número de células CD5+ en el grupo experimental fue de 122.5/1000 núcleos. Las que expresaron marcadores de activación (MHC II R-RQ) mostraron un incremento: 32.2 en el grupo experimental 8 horas luego del desafío comparado com el grupo control: 12.6 células positivas/1000 núcleos (p<0.05) y dentro del grupo experimental entre los sacrificados a la hora y a las 8 horas (9.3 vs. 32.2). p<0.05. Se demuestra un incremento de células T activadas en el epitelio del íleon terminal en el grupo experimental sensibilizado con ovoalbúmina 8 horas después del desafío oral. (AU)

Poblacion intraepitelial de linfocitos T en ileon de conejos sensibilizados con ovoalbumina / Intraepithelial T cell population in ileum from ovalbumin sensitized rabbit

Se caracterizó la población de linfocitos T intraepiteliales del íleon terminal de conejos neozelandeses sensibilizados com ovoalbúmina por vía intraperitoneal y desafiados por vía oral. Los nivels de IgE anti-OVA obtenidos durante la sensibilización se evaluaron mediante el test de anafilaxia cutánea pasiva (PCA) positiva para una dilución de 1/160. La respuesta anafilácticta en el intestino luego del desafío oral fue confirmada por la aparición de edema en la vellosidad y marcada degranulación mastocitaria. Se analizaron en cada tejido, células T totales (CD5+), subpoblación de linfocitos T (CD4+) y células que expresaron MHC II R-RQ (marcador de activación celular). Las células positivas se contaron en 30 vellosidades por animal, presentándose los valores como número de células positivas cada 1000 núcleos de células absortivas. El número de células CD5+ en el grupo experimental fue de 122.5/1000 núcleos. Las que expresaron marcadores de activación (MHC II R-RQ) mostraron un incremento: 32.2 en el grupo experimental 8 horas luego del desafío comparado com el grupo control: 12.6 células positivas/1000 núcleos (p<0.05) y dentro del grupo experimental entre los sacrificados a la hora y a las 8 horas (9.3 vs. 32.2). p<0.05. Se demuestra un incremento de células T activadas en el epitelio del íleon terminal en el grupo experimental sensibilizado con ovoalbúmina 8 horas después del desafío oral.