Reactive oxygen species production and antioxidant enzyme activity during epididymal sperm maturation in Corynorhinus mexicanus bats.

Prolonged sperm storage in the epididymis of Corynorhinus mexicanus bats after testicular regression has been associated with epididymal sperm maturation in the caudal region, although the precise factors linked with this phenomenon are unknown. The aim of this work is to determine the role of reactive oxygen species (ROS) and changes in antioxidant enzymatic activity occurring in the spermatozoa and epididymal fluid over time, in sperm maturation and storage in the caput, corpus and cauda of the bat epididymis. Our data showed that an increment in ROS production coincided with an increase in superoxide dismutase (SOD) activity in epididymal fluid and with a decrease in glutathione peroxidase (GPX) activity in the spermatozoa in at different time points and epididymal regions. The increase in ROS production was not associated with oxidative damage measured by lipid peroxidation. The results of the current study suggest the existence of a shift in the redox balance, which might be associated with sperm maturation and storage.

Mechanism of granulosa cell death during follicular atresia depends on follicular size.

Changes in granulosa cell lysosomal and mitochondrial functions in relation to follicular size and to the stage of atresia were studied by fluorescent emission spectra and intensity using flow cytometry. Antral follicles were grouped by size in two groups: small, 3-6 mm and large, >6mm in diameter, and classified into three stages of atresia: non-atretic, initially atretic and advanced atretic. Differences in Rhodamine 123 (Rh123) and Acridine Orange (AO) fluorescent intensity indicated that changes in mitochondrial function are the primary mechanism of granulosa cell death in atretic follicles 3-6 mm in diameter, while its role in granulosa cell death in >6 mm atretic follicles seemed to be less important. However, modifications in lysosomal function (shown by a decrease in fluorometric intensity of AO incubated granulosa cells) were mainly associated with cell death in large atretic follicles. Our results support the hypothesis that the pathway of granulosa cell death during follicular atresia depends on the state of energy metabolism or on the production of hypoxic conditions related to follicular size. Changes in mitochondrial membrane potential and production of permeability transition pores were the main changes found in small follicles, while lysosomal function destabilization seemed to be the major cause of granulosa cell death during atresia in large follicles.

[Angiogenesis in reproductive physiology. Follicular development, formation and maintenance of the corpus luteum]. / Angiogénesis en la fisiología reproductiva. Desarrollo folicular, formación y mantenimiento del cuerpo lúteo.

The process of new capillary formations from previously existing mature vessels in healthy individuals has been mainly studied during cycles of the female reproductive tract. This new capillary formation, known as angiogenesis is related to endogenous regulators that both stimulates or inhibits it. Knowledge on the role of both stimulators and inhibitors under physiological and pathological conditions accentuates a main role of VEGF, FGF, angiogenin and angiopoietics among the formers; and main role of angiostatin and endostatin among the latters. In recent years, angiogenesis in the ovaries that leads to follicular and luteal growth and development has been extensively studied. Whether a number of endogenous stimulators and inhibitors have been identified, the molecular link between the endocrine and vascular system is not fully understood. Therefore, efforts to formulate questions that need answers must be made.

Síndrome estrogénico en vacas lecheras por consumo de alfalfas con grandes cantidades de coumestrol / Oestrogenic syndrome in dairy cows by alfalfa comsuption with large amount of coumestrol

Se describe un síndrome que se caracteriza por aumento en el porcentaje de vacas que repiten celo, de abortos, de metriosis y metritis, y de quistes ováricos, así como estros falsos y útero turgente (UT) a la palpación aun con diagnóstico de gestación positivo (40-60 días de preñez) asociado con consumo de alfalfa con grandes cantidades de coumestrol. El estudio se realizó en 608 vacas en riesgo, a la que se les practicaron 1264 inseminaciones en el curso de un año, observándose sólo 376 gestaciones (29.75 por ciento), de las cuales 102 cursaron con UT y moco cérvico vaginal (MCV) fluido, 36 terminaron en abortos y 238 fueron normales. La resistencia eléctrica del MCV en las vacas gestantes con Dx de UT fue significativamente menor que el medio en las vacas gestantes normales (68.8ñ15.17 contra 114.03ñ17.05O, n=30) y semejante al encontrado en las vacas en estro (63.16ñ10.56O, n=30). en 10 vacas gestantes con UT y MCV fluido se determinó la concentración plasmática de estradiol por radioinunoanálisis; se encontraron valores normales (12.9ñ10.04 pg/ml) en seis de los diez animales, que no explican la presencia del síndrome estrogénico. De la alfalfa que consumen los animales se extrajo el coumestrol, se purificó por cromatografía de capa fina y se determinó su concentración por espectrofotometría UV a 243 nm. Las grandes cantidades de coumestrol encontradas en la alfalfa consumida por los animales estudiados (66.8 mg/kg alfalfa seca, sin considerar las pérdidas durante el proceso de extracción y purificación) pueden ser las responsables del síndrome estrogénico descrito y su importancia económica justifica la valoración de los resultados de este estudio y la búsqueda de soluciones apropiadas al problema

Evaluación y preparación de gametos / Evaluation and management of gametes

En primer término se presentan los criterios aceptados internacionalmente para la evaluación cuantitativa, morfológica y bioquímica de las muestras de semen; tanto para su análisis previo al intento de cualquer alternativa de reproducción asistida, como en el momento de realizar el procedimiento correspondiente. En el siguiente rubro se discuten las caracteríticas bioquímicas de las soluciones que se utilizan por la inducción in vitro de la capacitación-reacción acrosomal; eventos indispensables, previos a que se lleve al cabo la interacción in vivo o in vitro de los gametos homólogos. Se presenta también la metodología más utilizada para el manejo extracorpóreo de los espermatozoides y para evaluar la eficiencia con que estas células llevan al cabo in vitro la reacción acrosomal, así como la utilización del bioensayo de la penetración del óvulo de hamster ibre de zona pellucida, para valorar la capacidad de los espermatozoides humanos para penetrar a la gameta femenina. Finalmente, se analizan las características morfológicas de las diferentes estructuras que conforman los complejos cumulus oophorus-corona radiada-zona pellucida-vitelo, así como la composición bioquímica y hormonal del líquido folicular, obtenidos después de la punción folicular. Esto con la finalidad de conocer la calidad de los ovocitos recuperados, su posibilidad de ser fertilizados y su potencialidad de desarrollarse en etapas subsecuentes que culminan con el nacimiento de productos a término, viables y sanos.