Detecção fo genoma de HPV em pacientes com carcinoma espino-celular da laringe: comparação entre os ensaios de PCR convencional e em tempo real / Detection of HPV genome in patients with squamous cell carcinoma of the larynx: comparison between conventional and real time PCR assays

A interação do genoma do HPV com o genoma da célula hospedeira ou de proteínas virais com proteínas celulares necessárias ao controle do ciclo celular desencadeia a morte celular ou age como fator de iniciação e progressão de processos malignos. Diversostrabalhos têm sido desenvolvidos no sentido de associar a infecção de HPV aos cânceres de cabeça e pescoço. O objetivo do presente estudo foi comparar a detecção do genoma de HPV em pacientes com CEC da laringe, considerando os ensaios de PCR convencional e em tempo real. O grupo amostral foi constituído de 15 pacientes do Registro de Câncer de Base Populacional da ACCG. Das peças cirúrgicas, foi obtido DNA total, usado na investigação molecular, para detecção do genoma de HPV, utilizando os primers genéricos GP05/06, que detectam todos os tipos de HPV. O genoma de HPV foi amplificado em 30 dos casos por PCR convencional e no ensaio de PCR em tempo real apresentaram amplificação em 46,7 das amostras, evidenciando uma diferença em 40 . Os estudosde associação entre o HPV e os cânceres da laringe são importantes no sentido de ampliar o conhecimento acerca dos mecanismos de infecção, iniciação e promoção tumoral potencializada por estes vírus.

Antibacterial activity of indole alkaloids from Aspidosperma ramiflorum.

We evaluated the antibacterial activities of the crude methanol extract, fractions (I-V) obtained after acid-base extraction and pure compounds from the stem bark of Aspidosperma ramiflorum. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by the microdilution technique in Mueller-Hinton broth. Inoculates were prepared in this medium from 24-h broth cultures of bacteria (10(7) CFU/mL). Microtiter plates were incubated at 37 masculineC and the MICs were recorded after 24 h of incubation. Two susceptibility endpoints were recorded for each isolate. The crude methanol extract presented moderate activity against the Gram-positive bacteria B. subtilis (MIC = 250 microg/mL) and S. aureus (MIC = 500 microg/mL), and was inactive against the Gram-negative bacteria E. coli and P. aeruginosa (MIC > 1000 microg/mL). Fractions I and II were inactive against standard strains at concentrations of < or =1000 microg/mL and fraction III displayed moderate antibacterial activity against B. subtilis (MIC = 500 microg/mL) and S. aureus (MIC = 250 microg/mL). Fraction IV showed high activity against B. subtilis and S. aureus (MIC = 15.6 microg/mL) and moderate activity against E. coli and P. aeruginosa (MIC = 250 microg/mL). Fraction V presented high activity against B. subtilis (MIC = 15.6 microg/mL) and S. aureus (MIC = 31.3 microg/mL) and was inactive against Gram-negative bacteria (MIC > 1000 microg/mL). Fractions III, IV and V were then submitted to bioassay-guided fractionation by silica gel column chromatography, yielding individual purified ramiflorines A and B. Both ramiflorines showed significant activity against S. aureus (MIC = 25 microg/mL) and E. faecalis (MIC = 50 microg/mL), with EC50 of 8 and 2.5 microg/mL for ramiflorines A and B, respectively, against S. aureus. These results are promising, showing that these compounds are biologically active against Gram-positive bacteria.