Desenvolvimento de modelo experimental de endometriose em ratas / Development of an experimental model of endometriosis in rats

OBJETIVO: Desenvolver um modelo de endometriose experimental em ratas. MÉTODOS: Foram utilizadas 30 ratas adultas da linhagem Wistar. A técnica cirúrgica consistiu em laparotomia mediana com identificação do útero bicorno e ressecção de um segmento de 2 cm do corno uterino direito. Um retalho de 0,25 cm² foi retirado dessa estrutura e suturado na parede abdominal com a face endometrial voltada para a cavidade peritoneal. As ratas foram divididas aleatoriamente em dois grupos de acordo com o tempo para a reoperação: grupo 1 (n=15), reoperado em 30 dias, e grupo 2 (n=15), em 60 dias. No momento da segunda laparotomia os implantes foram avaliados macroscopicamente, ressecados e encaminhados para análise microscópica com coloração hematoxilina-eosina e imunohistoquímica (HEMA, AE1 e AE2). RESULTADOS: Os implantes se desenvolveram em 83,3 por cento do Grupo 1 e 71,4 por cento no Grupo 2. Não houve diferença estatisticamente significativa entre o peso dos animals dos dois grupos. Também não houve diferença estatisticamente significativa no tamanho da área das lesões induzidas: no Grupo 1 a média foi 0,37 cm² e no Grupo 2, de 0,25 cm². Segundo a classificação histológica semi-quantitativa de Keenan (de acordo com a preservação da camada epitelial de endométrio), o Grupo 1 teve média de 1,9 e o Grupo 2, de 2,4. CONCLUSÃO: A técnica utilizada para o desenvolvimento de endometriose em ratas foi satisfatória.

OBJECTIVES: To develop an experimental model of endometriosis in rats. METHODS: Thirty adult female Wistar rats were used. The surgical technique consisted of median laparotomy with identification of the bicornuate uterus and resection of a 2-cm segment of the right uterine horn. A 0.25 cm² flap was removed from that structure and sutured to the abdominal wall with the endometrial side facing the peritoneal cavity. The rats were randomly divided into two groups according to the reoperation date: group 1 (n=15) was reoperated in 30 days, and group 2 (n=15), in 60 days. On the occasion of the second laparotomy, the implants were evaluated macroscopically, resected and referred for microscopic analysis with hematoxylin-eosin and immunohistochemical staining (HEMA, AE1 and AE2). RESULTS: The implants developed in 83.3 percent of group 1 and 71.4 percent of group 2. There was no statistically significant difference between the weights of the animals in the two groups. No statistically significant difference was found in the surface area of the induced lesions: in group 1, the mean was 0.37 cm² and in group 2, 0.25 cm². According to Keenan's semiquantitative histological classification (based on the preservation status of the epithelial layer of the endometrium), the mean for group 1 was 1.9 and for group 2, 2.4. CONCLUSION: The technique used for inducing the development of endometriosis in rats was satisfactory.

Development of an experimental model of endometriosis in rats.

OBJECTIVES: To develop an experimental model of endometriosis in rats. METHODS: Thirty adult female Wistar rats were used. The surgical technique consisted of median laparotomy with identification of the bicornuate uterus and resection of a 2-cm segment of the right uterine horn. A 0.25 cm(2) flap was removed from that structure and sutured to the abdominal wall with the endometrial side facing the peritoneal cavity. The rats were randomly divided into two groups according to the reoperation date: group 1 (n=15) was reoperated in 30 days, and group 2 (n=15), in 60 days. On the occasion of the second laparotomy, the implants were evaluated macroscopically, resected and referred for microscopic analysis with hematoxylin-eosin and immunohistochemical staining (HEMA, AE1 and AE2). RESULTS: The implants developed in 83.3 % of group 1 and 71.4% of group 2. There was no statistically significant difference between the weights of the animals in the two groups. No statistically significant difference was found in the surface area of the induced lesions: in group 1, the mean was 0.37 cm(2) and in group 2, 0.25 cm(2). According to Keenan's semiquantitative histological classification (based on the preservation status of the epithelial layer of the endometrium), the mean for group 1 was 1.9 and for group 2, 2.4. CONCLUSION: The technique used for inducing the development of endometriosis in rats was satisfactory.

An assessment of neutrophils/lymphocytes ratio in patients suspected of acute coronary syndrome.

BACKGROUND: Leukocytes total count is an independent risk marker for cardiovascular events. The ratio between neutrophils and lymphocytes (N/L) count has been investigated as a new predictor for cardiovascular risk, although its diagnostic role when assessing patients suspected of an acute coronary syndrome (ACS) condition is not yet known. OBJECTIVE: To evaluate the diagnostic power of N/L ratio in patients who have been admitted at a Chest Pain Unit (CPU) with the suspicion of ACS. METHODS: Evaluation was conducted in 178 patients admitted with chest pain. Diagnostic flowchart including clinical, electrocardiographic, and laboratory data. Diagnosis obtained was: acute myocardial infarction (AMI) with (AMI-STE) and with no segment T elevation (AMI-NSTE), unstable angina (UA ) and non-cardiac pain (NC). Total and differential leukocyte count was conducted in peripheral blood sample collected at admission. RESULTS: Patients diagnosed with non-cardiac pain reported the lowest N/L ratio (n=45; 3.0 +/- 1.6), followed by UA (n=65; 3.6 +/- 2.9), AMI-NSTE (n=33; 4.8 +/- 3.7) and AMI-STE (n=35; 6.9 +/- 5.7); p < 0.0001. N/L ratio above 5.7 (highest quartile) reported 91.1% specificity, 4.51 odds ratio (CI 95% 1.51 to 13.45) for the final diagnosis of ACS when compared to the groups at lower quartiles. CONCLUSION: The N/L ratio presents correlation with final diagnosis of patients with suspicion of ACS at admission. Considering this is a low cost, good reproductibility test, new studies should ellucidate whether the ratio may be of relevance for diagnosis flowcharts currently in use.

Combined transplantation of skeletal myoblasts and mesenchymal cells (cocultivation) in ventricular dysfunction after myocardial infarction.

OBJECTIVE: Cell therapy in the myocardium has been mainly performed with satisfactory results using 2 cell types: skeletal myoblasts (myogenic) and mesenchymal cells (angiogenic). This study assessed the combined transplantation of those 2 cell types (SMM) into infarcted rats. METHODS: Myocardial infarction was induced by ligature of the left coronary artery in 26 Wistar rats. After one week, the animals underwent echocardiography for assessing ejection fraction (EF%) and left ventricular end-diastolic and systolic volumes (EDV, ESV, mL). After 2 days, the animals were reoperated on and divided into 2 groups: 1) control (n = 10), which received 0.15 mL of culture medium; and 2) SMM (n = 16), which received 7.5x10(6) heterologous skeletal myoblasts and mesenchymal cells in the infarcted region. The cells were obtained from puncture of the iliac crest and biopsy of skeletal muscle, and were cultured in vitro. After one month, the animals underwent a new echocardiography. RESULTS: No significant difference in EF, EDV, and ESV was observed between the 2 groups on baseline echocardiographic values. One month after transplantation, the following was observed: a reduction in EF in the control group (29.31 +/- 5.6% to 23.54 +/- 6.51%; P = 0.048); and an increase in EF in the SMM group (24.03 +/- 8.68% to 31.77 +/- 9.06%; P = 0.011). The presence of neovascularization and muscle fibers was identified in the regions of myocardial fibrosis in the SMM group. CONCLUSION: Cocultivation of skeletal myoblasts and mesenchymal cells is functionally effective.

O transplante em conjunto de células mioblásticas esqueléticas e mesenquimais (cocultivadas) na disfunção ventricular pós-infarto do miocárdio / Combined transplantation of skeletal myoblasts and mesenchymal cells (cocultivation) in ventricular dysfunction after myocardial infarction

OBJETIVO: A terapia celular no miocárdio tem sido realizada fundamentalmente com dois tipos celulares: as células mioblásticas esqueléticas (miogênicas) e as mesenquimais (angiogênicas) com resultados satisfatórios. Foi analisado o resultado do transplante em conjunto destas células (CEM) em ratos infartados. MÉTODOS: Foram induzidos ao infarto do miocárdio, por meio de ligadura da coronária esquerda 26 ratos Wistar. Após uma semana, os animais foram submetidos à ecocardiografia para avaliação da fração de ejeção (FE, por cento) e dos volumes diastólico e sistólico finais do ventrículo esquerdo (VDF, VSF,ml). Após dois dias os animais foram reoperados e divididos em dois grupos: 1) controle (n=10) que recebeu 0,15 ml de meio de cultura e 2) CEM (n=16) que recebeu 7.5x106 células mioblásticas esqueléticas e mesenquimais, heterólogas, na região do infarto. As células foram obtidas a partir da punção da crista ilíaca e da biópsia do músculo esquelético, ambas submetidas à cultura celular in vitro. Após um mês, os animais foram submetidos a nova ecocardiografia. RESULTADOS: Não houve diferença significativa entre os dois grupos quanto a FE, VDF e VSF nos valores ecocardiográficos de base. Um mês após o transplante, foram observados diminuição da FE no grupo controle (29.31 ± 5.6 por cento para 23.54 ± 6.51 por cento p=0.048) e acréscimo da FE no grupo CEM (24.03 ± 8.68 por cento para 31.77 ± 9.06 por cento, p=0.011). Identificou-se a presença de neovasos e fibras musculares, nas regiões de fibrose miocárdica no grupo CEM. CONCLUSAO: O cocultivo das células mioblásticas esqueléticas e das células mesenquimais é funcionalmente efetivo.

The transplant of cardiac cells and myoblast skeletal cells in myocardial infarction

OBJETIVO:Comparar o resultado funcional e anátomo-patológico entre o transplante de células mioblásticas e cardíacas no infarto do miocárdio. MÉTODO: Realizado infarto da parede ântero-lateral do ventrículo esquerdo em 26 ratos Wistar, com ligadura da artéria coronária esquerda. Após cinco dias, os animais foram submetidos a ecocardiografia transtorácica para cálculo dos volumes sistólico (VSFVE) e diastólico (VDFVE) finais e da fraçäo de ejeçäo do ventrículo esquerdo (FEVE). Os animais foram divididos em três grupos: 1) controle (n=10), 2) células cardíacas adultas (n=8) e 3) células musculares esqueléticas adultas (n=8). Sete dias após o infarto do miocárdio, os animais foram reoperados por esternotomia mediana, sendo identificada a regiäo de fibrose no ventrículo esquerdo e nela, injetado 0.15ml de meio de cultura no grupo I, 8.5x106/0.15ml de células cardíacas heterólogas no grupo II e 8.5x106/0.15ml de células musculares esqueléticas heterólogas no grupo III. Todos os animais receberam ciclosporina (15mg/kg/dia). Após dois meses do transplante, realizou-se nova ecocardiografia avaliando os mesmos parâmetros. RESULTADOS: Após dois meses do transplante celular, o grupo I apresentou um decréscimo da FEVE (48.18 porcento vs. 33.25 porcento p=0.0003), sendo que houve um acréscimo dos VSFVE e VDFVE (0.308ml vs. 0.536ml p=0.026 e 0.597ml vs. 0.776ml p=0.054, respectivamente). No grupo II houve uma estabilizaçäo da FEVE (42.48 porcento vs. 41.31 porcento p=0.4968, respectivamente) e um discreto aumento do VDFVE (0.602ml vs. 0.771ml p=0.0711). O VSFVE variou de 0.358ml a 0.450ml p=0.0400. O grupo III apresentou um acréscimo da FEVE, VDFVE e VSFVE (40 porcento vs. 47.35 porcento p=0.0142, 0.643ml vs. 0.931ml p=0.0026 e 0.388ml vs. 0.491ml p=0.0557 (sem significância), respectivamente. O GIII apresentou um maior valor, considerado estatisticamente significativo, da fraçäo de ejeçäo do ventrículo esquerdo, em comparaçäo ao GI e ao GII (47.35 porcento + 6.89 porcento vs. 41.31 porcento + 8.46 porcento vs. 33.25 porcento + 12.41 porcento p=0.0200, respectivamente). Identificou-se uma diferença estatisticamente significativa da fraçäo de ejeçäo do ventrículo esquerdo entre o GIII e o GI, após dois meses do transplante (47.35 porcento + 6.891 porcento vs. 33.25 porcento + 12.41 porcento p=0.0213, respectivamente)...

Long-term efficacy of myoblast transplantation on regional structure and function after myocardial infarction.

BACKGROUND: Transplantation (Tx) of skeletal myoblasts (SM) within an infarcted myocardium improves global left ventricular (LV) function, although a direct systolic effect remains controversial. METHODS AND RESULTS: Global and regional LV functions were studied in a sheep model (n=16) of infarction before (baseline), and 4 (M4), and 12 (M12) months after in-scar injections of autologous SM or culture medium (CM). LV end-diastolic volume (EDV), ejection fraction (EF), wall motion score (WMS), and systolic myocardial velocity gradient (MVG) across the scar were measured by echocardiography with tissue Doppler imaging. Parameters were similar at baseline between groups. At M4, Tx of SM reduced the postinfarction increase in EDV (72+/-8 versus 105+/-13 mL in the CM group, P<0.05) and the decrease in EF (48+/-5 versus 33+/-3% in the CM group, P=0.006) although it improved WMS (5.4+/-1.2 versus 13+/-2.2 in the CM group, P<0.01) and SMVG (0.60+/-0.13 versus -0.04+/-.13 seconds(-1) in the CM group, P<0.05). Results were similar at M12. In-scar accumulation of myotubes and SM were detected in all Tx animals up to M12, with co-expression of fast and slow isoforms of the myosin heavy chain (MHC) (30% of the fibers versus 0% in the normal skeletal muscle) and decreased collagen density (30+/-2% versus 73+/-3%, P<0.0001). CONCLUSIONS: For up to 1 year, Tx of SM limits postinfarction EF deterioration and improves systolic scar function through colonization of fibrosis by skeletal muscle cells with expression of both MHC isoforms, which may confer to the graft the ability to withstand a cardiac-type workload.

Artéria gastroepiplóica direita na cirurgia de revascularização do miocárdio / Gastroepiploic artery in coronary artery bypass grafting

CASUÍSTICA E MÉTODOS: Entre janeiro de 1996 e julho de 1999, a artéria gastroepiplóica direita (AGED) foi usada como enxerto na revascularização do miocárdio (RM) de 26 pacientes, sendo 25 do sexo masculino, com média de idade de 55,2 anos. Indicamos a operação em pacientes que apresentavam obstruções críticas e/ou totais nas artérias coronárias direita, interventricular anterior e ramos da artéria coronária circunflexa. Angina estável foi diagnosticada em 15 (57,8 porcento) pacientes e angina instável em 10 (38,4 porcento); 1 paciente apresentou isquemia silenciosa. Cinco (19,2 porcento) pacientes foram submetidos à reoperação, sendo em 2 a segunda reoperação. A circulação extracorpórea (CEC) foi usada em 24 pacientes, normotérmica em 18 (75 porcento) e hipotérmica em 6 (25 porcento). Dois, 5 e 19 pacientes apresentavam obstruções em um, dois e três vasos coronários, respectivamente. A AGED foi usada na forma pediculada em 24 pacientes, servindo de enxerto para o ramo interventricular anterior (3), artéria coronária direita (8) e seus ramos descendente (11) e ventricular posteriores (1) e ramo descendente posterior da artéria circunflexa (1). Como enxerto livre, a AGED revascularizou o ramo diagonal em 2 pacientes. Utilizamos, concomitantemente as artérias torácicas internas esquerda e direita, radial esquerda e a veia safena magna para a total RM. RESULTADOS: Angiografia seletiva de controle pós-operatório foi realizada em 12 (46,7 porcento) pacientes. Em 10 (83,4 porcento) visibilizou-se que a AGED estava pérvia, em 1 não foi possível cateterizar o tronco celíaco e no outro o enxerto estava ocluído. Não houve óbito hospitalar/30 dias e todos os pacientes tiveram alta hospitalar assintomáticos. CONCLUSÃO: Concluímos que a AGED, neste estudo, mostrou ser um enxerto seguro para ser utilizado na operação de RM

Aneurisma em ponte de veia safena para artéria coronária marginal esquerda, roto para o brônquio esquerdo / Aneurysm in the saphenous vein bypass graft to the left marginal coronary artery, broked up to the left bronchus

Paciente com duas cirurgias prévias de revascularizaçao do miocárdio há 20 e lO anos, respectivamente, apresentou subitamente quadro de dispnéia, dor torácica e hemoptise. Aos exames complementares, foi observado um grande aneurisma da ponte de veia safena para artéria marginal esquerda, parcialmente roto em brônquio esquerdo. O aneurisma foi corrigido, com sucesso, mas o paciente veio a falecer no l5( pós-operatório em conseqüência de uma infecçao pulmonar.