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Sci Rep ; 6: 23976, 2016 Apr 07.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-27052670

RESUMO

Growth cones of extending axons navigate to correct targets by sensing a guidance cue gradient via membrane protein receptors. Although most signaling mechanisms have been clarified using an in vitro approach, it is still difficult to investigate the growth cone behavior in complicated extracellular environment of living animals due to the lack of tools. We develop a system for the light-dependent activation of a guidance receptor, Deleted in Colorectal Cancer (DCC), using Arabidopsis thaliana Cryptochrome 2, which oligomerizes upon blue-light absorption. Blue-light illumination transiently activates DCC via its oligomerization, which initiates downstream signaling in the illuminated subcellular region. The extending axons are attracted by illumination in cultured chick dorsal root ganglion neurons. Moreover, light-mediated navigation of the growth cones is achieved in living Caenorhabditis elegans. The photo-manipulation system is applicable to investigate the relationship between the growth cone behavior and its surrounding environment in living tissue.


Assuntos
Orientação de Axônios/fisiologia , Axônios/fisiologia , Crescimento Neuronal/fisiologia , Optogenética/métodos , Receptores de Superfície Celular/metabolismo , Animais , Animais Geneticamente Modificados , Orientação de Axônios/efeitos da radiação , Axônios/metabolismo , Axônios/efeitos da radiação , Caenorhabditis elegans/genética , Caenorhabditis elegans/metabolismo , Caenorhabditis elegans/efeitos da radiação , Embrião de Galinha , Galinhas , Gânglios Espinais/citologia , Gânglios Espinais/embriologia , Gânglios Espinais/metabolismo , Células HEK293 , Humanos , Immunoblotting , Luz , Camundongos , Microscopia de Fluorescência , Crescimento Neuronal/efeitos da radiação , Neurônios/metabolismo , Neurônios/fisiologia , Neurônios/efeitos da radiação , Receptores de Superfície Celular/genética , Proteínas Supressoras de Tumor/genética , Proteínas Supressoras de Tumor/metabolismo
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