Evaluation of the In Vitro Antiparasitic Effect of the Essential Oil of Cymbopogon winterianus and Its Chemical Composition Analysis.

Cymbopogon winterianus, known as "citronella grass", is an important aromatic and medicinal tropical herbaceous plant. The essential oil of C. winterianus (EOCw) is popularly used to play an important role in improving human health due to its potential as a bioactive component. The present study aimed to identify the components of the essential oil of C. winterianus and verify its leishmanicidal and trypanocidal potential, as well as the cytotoxicity in mammalian cells, in vitro. The EOCw had geraniol (42.13%), citronellal (17.31%), and citronellol (16.91%) as major constituents. The essential oil only exhibited significant cytotoxicity in mammalian fibroblasts at concentrations greater than 250 µg/mL, while regarding antipromastigote and antiepimastigote activities, they presented values considered clinically relevant, since both had LC50 < 62.5 µg/mL. It can be concluded that this is a pioneer study on the potential of the essential oil of C. winterianus and its use against the parasites T. cruzi and L. brasiliensis, and its importance is also based on this fact. Additionally, according to the results, C. winterianus was effective in presenting values of clinical relevance and low toxicity and, therefore, an indicator of popular use.

Triazole-Resistance in Environmental Aspergillus fumigatus in Latin American and African Countries.

Triazole-resistance has been reported increasingly in Aspergillus fumigatus. An international expert team proposed to avoid triazole monotherapy for the initial treatment of invasive aspergillosis in regions with >10% environmental-resistance, but this prevalence is largely unknown for most American and African countries. Here, we screened 584 environmental samples (soil) from urban and rural locations in Mexico, Paraguay, and Peru in Latin America and Benin and Nigeria in Africa for triazole-resistant A. fumigatus. Samples were screened using triazole-containing agars and confirmed as triazole-resistant by the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) broth dilution reference method. Isolates were further characterized by cyp51A sequencing and short-tandem repeat typing. Fungicide presence in samples was likewise determined. Among A. fumigatus positive samples, triazole-resistance was detected in 6.9% (7/102) of samples in Mexico, 8.3% (3/36) in Paraguay, 9.8% (6/61) in Peru, 2.2% (1/46) in Nigeria, and none in Benin. Cyp51A gene mutations were present in most of the triazole-resistant isolates (88%; 15/17). The environmentally-associated mutations TR34/L98H and TR46/Y121F/T289A were prevalent in Mexico and Peru, and isolates harboring these mutations were closely related. For the first time, triazole-resistant A. fumigatus was found in environmental samples in Mexico, Paraguay, Peru, and Nigeria with a prevalence of 7-10% in the Latin American countries. Our findings emphasize the need to establish triazole-resistance surveillance programs in these countries.

Antiparasitic Activity and Essential Oil Chemical Analysis of the Piper Tuberculatum Jacq Fruit.

With the increase of neglected diseases such as leishmaniasis and Chagas disease, there was a need for the search for new therapeutic alternatives that reduce the harm caused by medicine available for treatment. Thus, this study was performed to investigate the antiparasitic activity of the essential oil from the fruits of Piper tuberculatum Jacq, against lines of Leishmania braziliensis (MHOM/CO/88/UA301), Leishmania infantum (MHOM/ES/92/BCN83) and Trypanosoma cruzi (LC-B5 clone). Before running protocols, an analysis of the chemical composition of essential oil was conducted, which presented monoterpenes and sesquiterpenes. As major constituents, ß-pinene and α-pinene were identified. Regarding to antiparasitic activity, the essential oil had an EC50 values of 133.97 µg/mL and 143.59 µg/mL against variations promastigotes of L. infantum and L. braziliensis, respectively. As for trypanocidal activity, the oil showed EC50 value of 140.31 µg/mL against epimastigote form of T. cruzi. Moreover, it showed moderate cytotoxicity in fibroblasts with LC50 value of 204.71 µg/mL. The observed effect may be related to the presence of terpenes contained in the essential oil, since it has its antiparasitic activity proven in the literature.

A citotoxicidade e a avaliação da atividade antiprotozoária de Melissa officcinalis L (CIDRO-MELISA) / Actividad citotóxica y evaluación antiparasitaria de Melissa officcinalis L. (CIDRO-MELISA) / The cytotoxicity activity and evaluation of antiprotozoa Melissa officcinalis L (CIDRO-MELISA)

Introdução: as Leishmanioses correspondem a um complexo de doenças tropicais causada por mais de vinte diferentes espécies de protozoários intracelulares pertencentes ao gênero Leishmania. A Doença de Chagas é uma doença que representa um dos principais problemas de saúde pública em vários países, afetando sobretudo a população carente e rural. Melissa officinalis L., é uma erva perene, uma planta exótica, cuja família é Lamiaceae, que tem sido amplamente utilizada na medicina popular com finalidades terapêuticas. O seu óleo essencial tem sido usado como antioxidante, antimicótica, antifúngica, sedativa e antivirótica. Objetivo: avaliar a citotoxicidade, composição química e atividade antiparasitária do óleo essencial da espécie M. officinalis. Métodos: M. officcinalis foi coletada no município do Crato, CE, Brasil, e foi depositada no herbário da Universidade Regional do Cariri URCA. A análise da composição química do óleo essencial de M. officcinalis, foi realizada através de Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas. No estudo da atividade leishmanicida in vitro, utilizou-se formas promastigotas de L. braziliensis e epimastigotas de Trypanosoma cruzi. Para a atividade citotóxica utilizou-se a linhagem de fibroblastos de mamífero NCTC clone 929. Resultados: a través da análise do óleo essencial de M. officcinalis feita por CG/EM, foi possível identificar 12 constituintes que totalizavam 99,83 por cento, dentre os quais alguns foram majoritários: Geranial, Z Citral, 1- Limonene e Carvone. Foi verificado baixa toxicidade contra os fibroblastos. M. officcinalis exibiu maior capacidade para impedir a replicação contra a forma promastigota do protozoário, nas concentrações testadas. Conclusão: a espécie pode ser uma fonte importante na busca de agentes novos e seletivos para o tratamento de doenças tropicais causadas por protozoários, cujas propriedades necessitam ser investigadas quanto aso seus mecanismos(AU)

Introducción: Leishmaniasis corresponde a un complejo de enfermedades tropicales causadas por más de veinte especies diferentes de protozoos intracelulares que pertenece al género Leishmania. La enfermedad de Chagas es una enfermedad que es uno de los principales problemas de salud pública en muchos países, que afectan especialmente a la población pobre y rural. Melissa officinalis L., es una hierba perenne, una planta exótica, cuya familia Lamiaceae, ha sido ampliamente utilizado en la medicina popular para fines terapéuticos. Su aceite esencial se ha usado como un antioxidante, antimicótico, antifúngica, antiviral y sedante. Objetivo: evaluar la citotoxicidad, la composición química y la actividad antiparasitaria del aceite esencial de la especie M. officinalis. Métodos: M. officinalis se recogió en el municipio de Crato, CE, Brasil, y fue depositado en el herbario de la Universidad Regional del Cariri URCA. El análisis de la composición química del aceite esencial de M. officcinalis se realizó por espectrometría de masa de cromatografía de gas. En el estudio de la actividad invitro leishmanicida se utilizó promastigotes L. braziliensis y Trypanosoma cruzi. Para la actividad citotóxica se utilizó la cepa de fibroblastos de mamífero NCTC clon 929. Resultados: a través de análisis de aceite esencial de M. officinalis hizo por GC/ EM se identificó un total de 12 constituyentes 99,83 por ciento, entre los cuales algunos eran mayoría: geranial, Z citral, limoneno y carvona 1. Se comprobó una baja toxicidad contra fibroblastos. M. officcinalis exhibió mayor capacidad para evitar la replicación contra la forma promastigote de parásito, a las concentraciones ensayadas. Conclusión: la especie puede ser una fuente importante en la búsqueda de nuevos agentes y selectivos para el tratamiento de enfermedades tropicales causadas por protozoos, cuyas propiedades deben ser investigados con respecto a sus mecanismos(AU)

Introduction: Leishmaniasis is a complex of tropical diseases caused by more than twenty different species of intracellular protozoa from the genus Leishmania. Chagas disease is one of the main public health problems in many countries. It mostly affects the poor, rural population. Melissa officinalis L. is a perennial herb, an exotic plant from the family Lamiaceae which has been widely used in folk medicine for therapeutic purposes. Its essential oil has been used as antioxidant, antifungal, antiviral and sedative. Objective: Evaluate the cytotoxicity, chemical composition and antiparasitic activity of essential oil of the species M. officinalis. Methods: M. officinalis specimens were collected from the municipality of Crato, CE, Brazil, and deposited in the herbarium at the Regional University of Cariri (URCA). Analysis of the chemical composition of essential oil of M. officinalis was performed by gas chromatography / mass spectrometry. L. braziliensis and Trypanosoma cruzi promastigotes were used for the study of in vitro leishmanicidal activity. Mammalian fibroblast strain NCTC clone 929 was used to evaluate cytotoxic activity. Results: Analysis of essential oil from M. officinalis by GC / MS led to identification of a total 12 constituents 99.83 percent, among which some were a majority: geranial, Z citral, limonene and 1-carvone. Toxicity against fibroblasts was found to be low. M. officinalis displayed greater capacity to avoid replication against the promastigote form of the parasite at the concentrations assayed. Conclusion: The species may be an important source of new agents and selective media for the treatment of tropical diseases caused by protozoa, whose properties should be studied with respect to their mechanisms(AU)

Avaliação da atividade anti-Leishmania e anti-Trypanosoma do extrato etanólico das folhas de Annona squamosa L / Evaluation of the anti-leishmania and anti-trypanosoma activity of ethanolic extract from the leaves of Annona squamosa L

As doenças parasitárias, também chamadas de “doenças negligenciadas”, continuam sendo uma grande dificuldade para o desenvolvimento social e econômico dos países mais pobres. Podemos citar como exemplo dessas doenças, a leishmaniose e a doença de Chagas. A leishmaniose é causada por parasitas do gênero Leishmania e afeta cerca de 12 milhões de pessoas. A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, causa aproximadamente 50.000 mortes por ano. Os fármacos disponíveis para o tratamento dessas doenças são altamente tóxicos, sendo este um dos motivos que leva à busca por drogas eficazes e seguras para seus tratamentos. As folhas da Annona squamosa, espécie da família Annonaceae, já foram descritas na literatura por suas atividades hepatoprotetora, antiparasitária, pesticida e antimicrobiana. Nesse estudo avaliamos a atividade anti-leishmania e tripanocida do extrato etanólico das folhas de Annona squamosa L. (EEAS) em formas promastigota do parasita Leishmania braziliensis e Leishmania infantum e epimastigota de Trypanosoma cruzi, além de avaliar a atividade citotóxica em fibroblasto. Os resultados demonstram que o extrato apresentou uma melhor atividade contra Leishmania infantum e Leishmania brasiliensis quando comparados com Trypanosoma cruzi; e que apresentou uma maior toxicidade nas concentrações de 500 e 1000 μg/ml, com mortalidade dos fibroblastos de aproximadamente 85% e 100%, respectivamente. Esse estudo aponta para uma perspectiva terapêutica alternativa que se mostrou eficaz frente aos parasitas aqui estudados, exceto a forma epimastigota de Trypanosoma cruzi. Com relação aos testes de citotoxicidade fazem-se necessários novos testes, uma vez que apresentou um alto nível de toxicidade, viabilizando assim futuros ensaios in vivo.

The parasitic diseases, also calls by “neglected diseases”, continue being a major difficulty for the social and economic development of the poorest countries. We can cite as an example of these diseases, the leishmaniasis and the Chagas disease. Leishmaniasis is caused by parasites of the genus Leishmania and affects about 12 million people. The Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, causes approximately 50,000 deaths per year. The drugs available for the treatment of these diseases are highly toxic, being this one of the reasons that leads to the search for effective and safe drugs for their treatments. The leaves of the Annona squamosa, species of the family Annonaceae, have already been described in the literature by their hepatoprotective activities, antiparasitic, pesticide and antimicrobial. In this study we assessed the activity tripanocidal and antileishmania of ethanolic extract from the leaves of Annona squamosa L. (EEAS) in promastigota forms of the parasite Leishmania braziliensis and Leishmania infantum and epimastigota of Trypanosoma cruzi, in addition to evaluating the cytotoxic activity in fibroblasts. The results demonstrate that the extract presented a better activity against Leishmania infantum and Leishmania brasiliensis when compared with Trypanosoma cruzi; and which presented a greater toxicity at concentrations of 500 and 1000 μg/ml, with mortality of fibroblasts of approximately 85% and 100%, respectively. This study points to an alternative therapeutic perspective that showed effective against the parasites here studied, except the epimastigota form of Trypanosoma cruzi. With relation to cytotoxicity tests are required new tests, once presented a high level of toxicity, thus enabling future in vivo assays.

A citotoxicidade e a avaliação da atividade antiprotozoária de Melissa officcinalis L (CIDRO-MELISA) / The cytotoxicity activity and evaluation of antiprotozoa Melissa officcinalis L (CIDRO-MELISA)

Introdução: as Leishmanioses correspondem a um complexo de doenças tropicais causada por mais de vinte diferentes espécies de protozoários intracelulares pertencentes ao gênero Leishmania. A Doença de Chagas é uma doença que representa um dos principais problemas de saúde pública em vários países, afetando sobretudo a população carente e rural. Melissa officinalis L., é uma erva perene, uma planta exótica, cuja família é Lamiaceae, que tem sido amplamente utilizada na medicina popular com finalidades terapêuticas. O seu óleo essencial tem sido usado como antioxidante, antimicótica, antifúngica, sedativa e antivirótica. Objetivo: avaliar a citotoxicidade, composição química e atividade antiparasitária do óleo essencial da espécie M. officinalis. Métodos: M. officcinalis foi coletada no município do Crato, CE, Brasil, e foi depositada no herbário da Universidade Regional do Cariri URCA. A análise da composição química do óleo essencial de M. officcinalis, foi realizada através de Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas. No estudo da atividade leishmanicida in vitro, utilizou-se formas promastigotas de L. braziliensis e epimastigotas de Trypanosoma cruzi. Para a atividade citotóxica utilizou-se a linhagem de fibroblastos de mamífero NCTC clone 929. Resultados: a través da análise do óleo essencial de M. officcinalis feita por CG/EM, foi possível identificar 12 constituintes que totalizavam 99,83 por cento, dentre os quais alguns foram majoritários: Geranial, Z Citral, 1- Limonene e Carvone. Foi verificado baixa toxicidade contra os fibroblastos. M. officcinalis exibiu maior capacidade para impedir a replicação contra a forma promastigota do protozoário, nas concentrações testadas. Conclusão: a espécie pode ser uma fonte importante na busca de agentes novos e seletivos para o tratamento de doenças tropicais causadas por protozoários, cujas propriedades necessitam ser investigadas quanto aso seus mecanismos(AU)

Introducción: Leishmaniasis corresponde a un complejo de enfermedades tropicales causadas por más de veinte especies diferentes de protozoos intracelulares que pertenece al género Leishmania. La enfermedad de Chagas es una enfermedad que es uno de los principales problemas de salud pública en muchos países, que afectan especialmente a la población pobre y rural. Melissa officinalis L., es una hierba perenne, una planta exótica, cuya familia Lamiaceae, ha sido ampliamente utilizado en la medicina popular para fines terapéuticos. Su aceite esencial se ha usado como un antioxidante, antimicótico, antifúngica, antiviral y sedante. Objetivo: evaluar la citotoxicidad, la composición química y la actividad antiparasitaria del aceite esencial de la especie M. officinalis. Métodos: M. officinalis se recogió en el municipio de Crato, CE, Brasil, y fue depositado en el herbario de la Universidad Regional del Cariri URCA. El análisis de la composición química del aceite esencial de M. officcinalis se realizó por espectrometría de masa de cromatografía de gas. En el estudio de la actividad invitro leishmanicida se utilizó promastigotes L. braziliensis y Trypanosoma cruzi. Para la actividad citotóxica se utilizó la cepa de fibroblastos de mamífero NCTC clon 929. Resultados: a través de análisis de aceite esencial de M. officinalis hizo por GC/ EM se identificó un total de 12 constituyentes 99,83 por ciento, entre los cuales algunos eran mayoría: geranial, Z citral, limoneno y carvona 1. Se comprobó una baja toxicidad contra fibroblastos. M. officcinalis exhibió mayor capacidad para evitar la replicación contra la forma promastigote de parásito, a las concentraciones ensayadas. Conclusión: la especie puede ser una fuente importante en la búsqueda de nuevos agentes y selectivos para el tratamiento de enfermedades tropicales causadas por protozoos, cuyas propiedades deben ser investigados con respecto a sus mecanismos(AU)

Introduction: Leishmaniasis is a complex of tropical diseases caused by more than twenty different species of intracellular protozoa from the genus Leishmania. Chagas disease is one of the main public health problems in many countries. It mostly affects the poor, rural population. Melissa officinalis L. is a perennial herb, an exotic plant from the family Lamiaceae which has been widely used in folk medicine for therapeutic purposes. Its essential oil has been used as antioxidant, antifungal, antiviral and sedative. Objective: Evaluate the cytotoxicity, chemical composition and antiparasitic activity of essential oil of the species M. officinalis. Methods: M. officinalis specimens were collected from the municipality of Crato, CE, Brazil, and deposited in the herbarium at the Regional University of Cariri (URCA). Analysis of the chemical composition of essential oil of M. officinalis was performed by gas chromatography / mass spectrometry. L. braziliensis and Trypanosoma cruzi promastigotes were used for the study of in vitro leishmanicidal activity. Mammalian fibroblast strain NCTC clone 929 was used to evaluate cytotoxic activity. Results: Analysis of essential oil from M. officinalis by GC / MS led to identification of a total 12 constituents 99.83 percent, among which some were a majority: geranial, Z citral, limonene and 1-carvone. Toxicity against fibroblasts was found to be low. M. officinalis displayed greater capacity to avoid replication against the promastigote form of the parasite at the concentrations assayed. Conclusion: The species may be an important source of new agents and selective media for the treatment of tropical diseases caused by protozoa, whose properties should be studied with respect to their mechanisms(AU)

HPLC-DAD phenolic profile, cytotoxic and anti-kinetoplastidae activity of Melissa officinalis.

Context Melissa officinalis subsp. inodora Bornm. (Lamiaceae) has been used since ancient times in folk medicine against various diseases, but it has not been investigated against protozoa. Objective To evaluate the activities of M. officinalis against Leishmania braziliensis, Leishmania infantum and Trypanosoma cruzi as well as its cytotoxicity in fibroblast cell line. Materials and methods The fresh leaves were chopped into 1 cm(2) pieces, washed and macerated with 99.9% of ethanol for 72 h at room temperature. Antiparasitic activity of M. officinalis was accessed by direct counting of cells after serial dilution, while the cytotoxicity of M. officinalis was evaluated in fibroblast cell line (NCTC929) by measuring the reduction of resazurin. The test duration was 24 h. High-performance liquid chromatography (HPLC) was used to characterise the extract. Results The extract at concentrations of 250 and 125 µg/mL inhibited 80.39 and 54.27% of promastigote (LC50 value = 105.78 µg/mL) form of L. infantum, 80.59 and 68.61% of L. brasiliensis (LC50 value = 110.69 µg/mL) and against epimastigote (LC50 value = 245.23 µg/mL) forms of T. cruzi with an inhibition of 54.45 and 22.26%, respectively, was observed. The maximum toxicity was noted at 500 µg/mL with 95.41% (LC50 value = 141.01 µg/mL). The HPLC analysis identified caffeic acid and rutin as the major compounds. Discussion The inhibition of the parasites is considered clinically relevant (< 500 µg/mL). Rutin and caffeic acids may be responsible for the antiprotozoal effect of the extract. Conclusion The ethanol extract of M. officinalis can be considered a potential alternative source of natural products with antileishmania and antitrypanosoma activities.

Detección de la deleción F508 del gen CFTR por la técnica de mutagénesis dirigida mediante PCR en pacientes con enfermedad fibroquística / Detection of F508 Deletion in the CFTR Gene by PCR Directed Mutagenesis in Patients with fibrocystic Ddsease

La Fibrosis quística es la enfermedad autosómica recesiva más común en la población blanca y se caracteriza por la obstrucción de conductos, principalmente en pulmón, páncreas y tracto genital. Se presenta en uno de cada 2000 a 2500 nacidos vivos y tiene una frecuencia de portadores de uno cada 20 a 25 nacidos vivos. La enfermedad es causada por diferentes mutaciones en el gen regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR). La mutación más frecuente en el gen CFTR es la deleción de tres pares de bases (CTT) denominada F508. Este trabajo se realizó con el fin de estandarizar la técnica de mutagénesis dirigida mediante PCR (PSM) para la detección de.la mutación F508 en pacientes con fibrosis quística. El método utilizado fue validado mediante secuenciación del DNA del exón 10 en todos los individuos. Mediante este análisis genético se detectaron seis individuos con las mutaciones F508 e I507. El método implementado en nuestro laboratorio podría servir para realizar un sondeo poblacional de portadores de mutaciones para la FQ.