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J Biomed Biotechnol ; 2009: 514287, 2009.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-19859553

RESUMO

RNA interference (RNAi) is the process of mRNA degradation induced by double-stranded RNA in a sequence-specific manner. Different types of promoters, such as U6, H1, tRNA, and CMV, have been used to control the inhibitory effect of RNAi expression vectors. In the present study, we constructed two shRNA expression vectors, respectively, controlled by tRNA(lys) and CMV enhancer-tRNA(lys) promoters. Compared to the vectors with tRNA(lys) or U6 promoter, the vector with a CMV enhancer-tRNA(lys) promoter silenced pokemon more efficiently on both the mRNA and the protein levels. Meanwhile, the silencing of pokemon inhibited the proliferation of MCF7 cells, but the induction of apoptosis of MCF7 cells was not observed. We conclude that the CMV enhancer-tRNA(lys) promoter may be a powerful tool in driving intracellular expression of shRNA which can efficiently silence targeted gene.


Assuntos
Citomegalovirus/genética , Elementos Facilitadores Genéticos , Regiões Promotoras Genéticas , Interferência de RNA , RNA de Transferência de Lisina/genética , Apoptose , Sequência de Bases , Linhagem Celular Tumoral , Primers do DNA/genética , Proteínas de Ligação a DNA/antagonistas & inibidores , Proteínas de Ligação a DNA/genética , Vetores Genéticos , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Células HeLa , Humanos , Dados de Sequência Molecular , Plasmídeos/genética , Proteínas Recombinantes/antagonistas & inibidores , Proteínas Recombinantes/genética , Fatores de Transcrição/antagonistas & inibidores , Fatores de Transcrição/genética , Transfecção
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