Use of platelet-rich plasma on in vitro maturation during bovine embryo production.

One of the crucial aspects to be considered for successful in vitro production (IVP) of embryos is the composition of the various media used throughout the stages of this reproductive biotechnology. The cell culture media employed should fulfill the metabolic requirements of both gametes during oocyte maturation and sperm development, as well as the embryo during its initial cell divisions. Most IVP protocols incorporate blood serum into the media composition as a source of hormones, proteins, growth factors, and nutrients. Numerous studies have suggested Platelet-Rich Plasma (PRP) as a substitute for fetal sera in cell culture, particularly for stem cells. Therefore, the objective of this study is to assess the potential use of PRP as a replacement for fetal bovine serum (FBS) during oocyte maturation for in vitro production of bovine embryos. During in vitro maturation (IVM), cumulus-oocyte complexes (COCs) were allocated into the following experimental groups: Group G1 (IVM medium with 5% PRP); Group G2 (MIV medium with 5% PRP and 5% SFB); Group G3 (MIV medium with 5% SFB); and Group G4 (MIV medium without either PRP or SFB). Subsequently, the cumulus-oocyte complexes were fertilized with semen from a single bull, and the resulting zygotes were cultured for seven days. Cleavage and blastocyst formation rates were assessed on days 2 and 7 of embryonic development, respectively. The quality of matured COCs was also evaluated by analyzing the gene expression of HSP70, an important protein associated with cellular stress. The results demonstrated that there were no significant differences among the experimental groups in terms of embryo production rates, both in the initial cleavage stages and blastocyst formation (except for the G4 group, which exhibited a lower blastocyst formation rate on D7, as expected). This indicates that PRP could be a cost-effective alternative to SFB in the IVP of embryos.

Effects of plasma rich in growth factors on wound healing in patients with venous ulcers.

Introduction: Significant evidence suggests that plasma-rich in growth factors (PRGF) favor the repair of chronic wounds, enabling a rapid return to functionality. However, components of PRGF and their effects on persistent ulcers and epithelial tissues are not well characterized. The goals of this research were to analyze the biological properties of platelet-derived factors, to examine their effectiveness on healing of venous ulcers, and to establish a correlation with clinical and sociodemographic data. Methods: For the preparation of PRGF, the centrifugation technique was used, obtaining a 100 % autologous and biocompatible blood sample that was treated with sodium citrate and calcium chloride. The patients were attended weekly at the outpatient clinic for nursing consultation and wound dressing changes, with PRGF application every 15 days. The treatment protocols are described, and follow-up results are reported. Results: Initially, the patients' ulcers ranged in sizes from 4 to 84 cm2. After 12 weeks of treatment, there was a significant mean reduction of 46.2 % in ulcer area. At baseline, epithelial tissue was absent in all venous ulcers, but its presence grew significantly by the treatment period. However, the reduction of the area of the ulcers did not show significant correlation with the concentrations of the patient's growth factors. Conclusions: Using the established protocol for PRGF isolating, it was possible to obtain a product with the presence of the six growth factors related to tissue regeneration and observed a positive response on wound healing following treatment of venous ulcers, with capacity to accelerate re-epithelialization and restore the skin functional integrity.

Ligneous conjunctivitis: Fresh-frozen plasma and heparin use intra-and postoperatively, a report of two cases

ABSTRACT Ligneous conjunctivitis is a rare chronic form of recurrent membranous inflammation and plasminogen deficiency. Ocular manifestations may be associated with sites other than mucous membranes, such as the oral cavity, internal ear, respiratory, genitals, and kidney. Treatment is extremely difficult because of the lack of topic plasminogen drops, and a high volume is required for systemic supplementation. This report aimed to present two patients with ligneous conjunctivitis treated with membrane excision, topical fresh-frozen plasma, and heparin intra-, and postoperatively. No recurrence was found in the ligneous membrane in the 12-month follow-up. The use of topical fresh-frozen plasma and heparin after membrane excision could be effective to avoid recurrence.

Argon plasma application on the surface of titanium implants: osseointegration study / Aplicação de plasma de argônio na superfície de implantes de titânio: estudo de osseointegração

Introduction: The development of new biomaterials with improved properties is a trend in regenerative medicine. The successful healing of implants is related to their osseointegration and the topographic geometry of their surface. Treatment with argon plasma acts on the surface of the implants, bringing several benefits to their osseointegration in the body. Material and Methods: Previously the in vivo study, the topography implants were observed by scanning electron microscopy (SEM). Following the implants were inserted in 14 male rats, and one perforation was made in the right and left tibias for implant placement without the surface treatment (control group), and with the argon plasma surface treatment (experimental group), respectively. The rats were euthanized at 4 weeks, a time in which tibia fragments were submitted for histological and histomorphometric examination, and torque removal test for comparison and analysis of osseointegration. Results: The SEM images showed the argon plasma surface treatment altered the topography. At the end of the study, both greater bone formation and better osseointegration were verified in the experimental group, and a statistically significant difference between the groups was observed. Conclusion: It was concluded that implants with this surface treatment can bring more practicality in the rehabilitation treatment, and more comfort in the patients' postoperative time (AU)

Introdução: O desenvolvimento de novos biomateriais com propriedades aprimoradas é uma tendência na medicina regenerativa. A cicatrização bem-sucedida dos implantes está relacionada à sua osseointegração e à geometria topográfica de sua superfície. O tratamento com plasma de argônio atua na superfície dos implantes, trazendo diversos benefícios para sua osseointegração no corpo. Materiais e Métodos: Antes do estudo in vivo, a topografia dos implantes foi observada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Em seguida, os implantes foram inseridos em 14 ratos machos, e uma perfuração foi feita nas tíbias direita e esquerda para a colocação do implante sem o tratamento de superfície (grupo controle) e com o tratamento de superfície de plasma de argônio (grupo experimental), respectivamente. Os ratos foram sacrificados após 4 semanas, momento em que fragmentos das tíbias foram submetidos a exame histológico e histomorfométrico, além do teste de remoção de torque para comparação e análise da osseointegração. Resultados: As imagens de MEV mostraram que o tratamento de superfície com plasma de argônio alterou a topografia. Ao final do estudo, foi verificada maior formação óssea e melhor osseointegração no grupo experimental, e foi observada diferença estatisticamente significativa entre os grupos. Conclusão: Concluiu-se que os implantes com esse tratamento de superfície podem trazer mais praticidade no tratamento de reabilitação e maior conforto no pós-operatório dos pacientes (AU)

Cost-consequence analysis of diagnosis and early treatment of acquired thrombotic thrombocytopenic purpura in Colombia.

INTRODUCTION: The objective of the study was to evaluate the costs and benefits of early identification and treatment (within 24 hours of admission) of patients with aTTP in Colombia. METHODS: A cost-consequence analysis was conducted to evaluate the costs and health outcomes of diagnosis and early treament versus no treatment (scenario 1) and late treatment (scenario 2) in a hypothetical cohort of 100 patients with aTTP. The analysis perspective was that of the third-party payer. RESULTS: In scenario 1, he total cost of early treatment was USD$515,157 compared to USD$293,265 for no treatment. Early treatment avoided 65 deaths in the hypothetical cohort. The cost per death avoided was USD$3,414. In scenario 2, the cost of early treatment was USD$935,507 compared to USD$809,103 in the late start of treatment. By treating patients early, 33 deaths were avoided, 23 patients were estimated to be alive without exacerbations and 16 without relapses. The cost per death avoided was USD$3,879 and the cost per patient alive without exacerbations and relapses was USD$5,611 and USD$7,858, respectively. CONCLUSIONS: The early identification and treatment of patients with aTTP are associated with benefits in survival and recurrence-free survival, and an incremental cost in the process of care compared to no treatment or late treatment.

Avaliação do tratamento de alterações estéticas faciais com uso de um protocolo operacional desenvolvido para a aplicação de plasma rico em plaquetas / Evaluation of the treatment of changes aesthetic facial with the use of an operational protocol developed for the application of platelet rich plasm

Introdução: o plasma rico em plaquetas é definido como um concentrado de plaquetas autólogas, obtido por centrifugação de sangue total. Trata-se de uma técnica inovadora, simples e de baixo custo, que apresenta muitos benefícios, podendo ser aplicada em diferentes áreas da saúde. Objetivo: a presente pesquisa buscou desenvolver um protocolo operacional padrão para obtenção e aplicação do plasma sanguíneo rico em plaquetas para o tratamento de alterações estéticas faciais. Metodologia: o estudo tratou de uma pesquisa de campo experimental, de caráter qualitativo e quantitativo. Um processo seletivo foi realizado para recrutar pacientes voluntários para o estudo, que foram selecionados de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Através de testes foi possível chegar ao tempo de centrifugação e velocidade ideais para a produção do plasma rico em plaquetas e testá-lo no tratamento de alterações estéticas faciais. Resultados e discussão: as principais mudanças que foram notadas pelos pacientes durante e após o tratamento foram a redução das cicatrizes de acne e aumento da hidratação e viscosidade da pele. A melhora das alterações estéticas tratadas foi notada por 100% dos pacientes, não havendo piora em nenhum paciente. Conclusão: com base nos testes e resultados obtidos, foi possível padronizar um protocolo operacional padrão ideal para a obtenção e aplicação do plasma rico em plaquetas, comprovando sua eficácia no tratamento de alterações estéticas faciais como rugas, flacidez, linhas de expressões acentuadas, acne, cicatrizes de acne, além de ter-se observado uma melhora significativa na hidratação da pele e redução de poros dilatados.

Introduction: platelet-rich plasma is defined as a concentrate of autologous platelets, obtained by centrifuging whole blood. It is an innovative, simple and low-cost technique that has many benefits, and can be applied in different areas of health. Objective: the present research sought to develop a standard operating protocol for obtaining and applying platelet-rich blood plasma for the treatment of facial aesthetic changes. Metodology: the study was a qualitative and quantitative field research. A selection process was carried out to recruit volunteer patients for the study, who were selected according to the inclusion and exclusion criteria. Through tests it was possible to reach the ideal centrifugation time and speed for the production of platelet-rich plasma and to test it in the treatment of facial aesthetic changes. Results and discussion: the main changes that were noted by patients during and after treatment were the reduction of acne scars and increased hydration and skin viscosity. The improvement of the aesthetic changes treated was noticed by 100% of the patients, with no worsening in any patient. Conclusion: based on the tests and results obtained, it was possible to standardize an ideal standard operating protocol for obtaining and applying platelet-rich plasma, proving its effectiveness in the treatment of facial aesthetic changes such as wrinkles, sagging, accentuated expression lines, acne, scars from acne, in addition to a significant improvement in skin hydration and reduction of enlarged pores.

Terapia regenerativa con plasma rico en plaquetas en adultos afectados por lesiones endoperiodontales / Regenerative therapy with platelets rich-plasm in adults affected by endoperiodontal lesions

Introducción: El uso de plasma rico en plaquetas para la regeneración de defectos óseos periodontales constituye una terapéutica eficaz. Objetivo: Identificar la evolución de pacientes con lesiones endoperiodontales tratados con plasma rico en plaquetas. Métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo y longitudinal de 11 adultos con enfermedad endoperiodontal y tratamiento endodóntico finalizado, atendidos en la consulta de Periodoncia y Medicina Regenerativa del Hospital General Docente Dr. Juan Bruno Zayas Alfonso de Santiago de Cuba, desde febrero del 2018 hasta diciembre del 2019, quienes requerían intervención quirúrgica periodontal y cumplían los criterios para recibir plasma rico en plaquetas. A tal efecto, se analizaron variables sociodemográficas, clínicas, radiográficas y de respuesta terapéutica, las que fueron expresadas estadísticamente por medio de frecuencias absolutas y relativas y de la media aritmética. Resultados: En la serie resultaron más frecuentes, antes de la terapia, el sangrado al sondaje (81,8 %), las características alteradas de las encías (72,7 %), la movilidad dentaria (72,7 %) y las bolsas periodontales de 7 a 9 milímetros, con pérdida ósea en el tercio apical (63,6 %); todo lo cual se revirtió a menores porcentajes luego de 6 meses de tratamiento. Conclusiones: La evolución de los pacientes afectados por lesiones periodontales fue satisfactoria con el empleo del plasma rico en plaquetas, lo que se evidenció clínica y radiográficamente.

Introduction: The use of platelets rich-plasm for the regeneration of periodontal bony defects constitutes an effective therapy. Objective: To identify the clinical course of patients with endoperiodontal lesions treated with platelets rich-plasm. Methods: An observational, descriptive and longitudinal study of 11 adults with endoperiodontal disease and concluded endodontics treatment was carried out. They were assisted in the Periodontics and Regenerative Medicine Service of Dr. Juan Bruno Zayas Alfonso Teaching General Hospital in Santiago de Cuba, from February, 2018 to December, 2019; who required periodontal surgical intervention and fulfilled the approaches to receive platelets rich-plasm. To such an effect, sociodemographic, clinical, radiographic and of therapeutic response variables were analyzed, which were statistically expressed by means of absolute and relative frequencies and of mean arithmetic. Results: In the series, bleeding on probing (81.8 %), altered characteristics of the gums (72.7 %), dental mobility (72.7 %) and 7 to 9 millimeters periodontal bags, with bony loss in the third apical (63.6 %) were more frequent before therapy; all of which was reverted to lower percentages after 6 months of treatment. Conclusions: The clinical course of the patients affected by periodontal lesions was satisfactory with the use of platelets rich-plasm, which was clinical and radiographically evidenced.

Bone, periodontal and dental pulp regeneration in dentistry: a systematic scoping review

Abstract The aim of presented systematic scoping review was to investigate the actual and future clinical possibilities of regenerative therapies and their ability to regenerate bone, periodontal and pulp with histological confirmation of the nature of formed tissue. Electronic search was conducted using a combination between Keywords and MeSH terms in PubMed, Scopus, ISI-Web of Science and Cochrane library databases up to January 2016. Two reviewers conducted independently the papers judgment. Screened studies were read following the predetermined inclusion criteria. The included studies were evaluated in accordance with Arksey and O'Malley's modified framework. From 1349 papers, 168 completed inclusion criteria. Several characterized and uncharacterized cells used in Cell Therapy have provided bone regeneration, demonstrating bone gain in quantity and quality, even as accelerators for bone and periodontal regeneration. Synthetic and natural scaffolds presented good cell maintenance, however polyglycolid-polylactid presented faster resorption and consequently poor bone gain. The Growth Factor-Mediated Therapy was able to regenerate bone and all features of a periodontal tissue in bone defects. Teeth submitted to Revascularization presented an increase of length and width of root canal. However, formed tissues not seem able to deposit dentin, characterizing a repaired tissue. Both PRP and PRF presented benefits when applied in regenerative therapies as natural scaffolds. Therefore, most studies that applied regenerative therapies have provided promising results being possible to regenerate bone and periodontal tissue with histological confirmation. However, pulp regeneration was not reported. These results should be interpreted with caution due to the short follow-up periods.

Resumo O objetivo da presente Scoping review foi investigar as possibilidades clínicas atuais e futuras das terapias regenerativas e sua capacidade de regenerar tecido ósseo, periodontal e polpar em humanos com confirmação histológica da natureza do tecido formado. Uma busca eletrônica foi realizada utilizando uma combinação entre as palavras-chave e termos MeSH nos bancos de dados PubMed, Scopus, ISI-web of Science e Cochrane library até janeiro de 2016. Dois revisores realizaram de forma independente o julgamento dos documentos. Os estudos selecionados foram lidos seguindo os critérios de inclusão predeterminados. Os estudos incluídos foram avaliados de acordo com a estrutura modificada de Arksey e O'Malley. Dos 1349 artigos, 168 preencheram os critérios de inclusão. Várias células caracterizadas e não caracterizadas promoveram regeneração óssea utilizada em terapias celulares, demonstrando ganho ósseo em quantidade e qualidade, de forma rápida para regeneração óssea e periodontal. Os scaffolds sintéticos e naturais apresentaram boa manutenção celular, no entanto o poliglicol-polilácido apresentou uma reabsorção rápida e, consequentemente, pequeno ganho ósseo. A terapia mediada por fatores de crescimento foi capaz de regenerar tecido ósseo e todas as características de um tecido periodontal. Dentes submetidos à revascularização apresentaram aumento do comprimento e largura do canal radicular. No entanto, os tecidos formados não foram capazes de depositar dentina, caracterizando um tecido reparado. Tanto o PRP quanto o PRF parecem apresentar benefícios quando aplicados em terapias regenerativas sendo um bom scaffold natural. Portanto, a maioria dos estudos que aplicaram terapias regenerativas forneceram resultados promissores sendo possível regenerar tecido ósseo e periodontal com confirmação histológica. No entanto, não foi observada regeneração de polpa dental. Estes resultados devem ser interpretados com cautela.

O plasma rico em fatores de crescimento no tratamento de pacientes com úlceras venosas / Plasma rich in growth factors in the treatment of patients with venous ulcers

Objetivo geral: Analisar as propriedades do plasma rico em fatores de crescimento (PRGF) autólogo, para tratar pacientes com úlceras venosas. Método: Trata-se de um estudo quase- experimental realizado em um Hospital Universitário, cuja coleta de dados ocorreu no período de maio de 2016 a dezembro de 2017. Amostra composta por 18 pacientes com úlcera venosa, que atenderam aos critérios de inclusão. Os participantes compareceram por 12 semanas consecutivas, ao ambulatório para consulta de enfermagem e troca do curativo, com aplicação do PRGF a cada 15 dias. O preparo do PRGF utilizou a técnica de uma centrifugação e o gluconato de cálcio como ativador plaquetário. Realização da contagem de plaquetas e identificação dos fatores de crescimento no PRGF usado no tratamento. Resultados: Amostra homogênea quanto às variáveis socioeconômicas e clínicas, com predomínio de idosos, sexo masculino, ensino fundamental incompleto e renda entre um e dois salários mínimos. Obtenção de um PRGF com contagem baixa de plaquetas, mediana de 122 x 103 mm3 plaquetas, mas com principais fatores de crescimento plaquetários envolvidos na cicatrização (PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-ß, VEGF, EGF e FGF2). Houve alta variabilidade na contagem de plaquetas e na concentração de fatores de crescimento, com correlação forte e significativa entre a quantidade de plaquetas e os fatores de crescimento PDGF-AB e PDGF-BB. As médias de cada fator de crescimento foram 1,52 ng/ml para o PDGF-AB, 1,38 ng/ml para o PDGF-BB, 1,40 ng/ml para o TGF-ß, 0,99 ng/ml para VEGF, 1,57 ng/ml para o EGF e 1.04 ng/ml para o FGF2. O tamanho inicial médio das úlceras neste estudo foi de 29,6 ± 23,9 /cm2 e o percentual médio de redução da área após 12 semanas de tratamento foi de 46,2%. O tamanho das úlceras após tratamento era significativamente menor do que o tamanho inicial das úlceras (p-valor do teste de Wilcoxon igual a 0,001). Entretanto, a redução da área das úlceras, no período das 12 semanas, não apresentou correlação com as concentrações dos fatores de crescimento no PRGF. A percentagem de tecido de epitalização apresentou crescimento em todo período do estudo com aumento significativo ao final de 12 tratamento (média = 58,1%) e o tecido desvitalizado apresentou decrescimento durante todo o período do estudo com redução significativa ao final de 12 semanas (média = 11%). Ao final de 12 semanas observou-se uma melhora significativa do tipo de exsudato nas úlceras e uma diminuição significativa da quantidade de exsudato nas úlceras. Conclusão: Neste estudo, foi confirmada a hipótese nula em que a concentração dos fatores de crescimento presentes no PRGF não apresentou relação estatisticamente significativa com a redução da área das úlceras venosas.

Objective: To analyze the properties of autologous plasma rich in growth factors (PRGF), to treat patients with venous ulcers. Method: It is a quasi-experimental clinical study performed in a University Hospital, the data collection occurred from May 2016 to December 2017. Sample of 18 patients with venous ulcer, who met the inclusion criteria. The participants attended weekly for 12 weeks to the outpatient clinic for nursing consultation and dressing change, with application of the plasma rich in growth factors (PRGF) for each 15 days. The PRGF preparation used the single- centrifugation technique and calcium gluconate as a platelet activator. Realization of platelet count and identification of growth factors in PRGF used in treatment. Platelet counting and identification of growth factors in the PRGF used in the treatment. Results: Homogeneous sample regarding socioeconomic and clinical variables, with predominance of the elderly, male gender, incomplete primary education and income between 1 and 2 minimum wages. A PRGF with a low platelet count, median of 122 x 103 mm3 platelets, but with the main platelet growth factors involved in the healing (PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-ß, VEGF, EGF and FGF2). There was a high variability in platelet counts and in the concentration of growth factors, with a strong and significant correlation between the amount of platelets and the growth factors PDGF-AB and PDGF-BB. The means of each growth factor were 1.52 ng / ml for PDGF-AB, 1.38 ng / ml for PDGF-BB, 1.40 ng / ml for TGF-ß, 0.99 ng / ml for VEGF, 1.57 ng / ml for EGF and 1.04 ng / ml for FGF2. The initial mean size of the ulcers in this study was 29.6 ± 23.9 / cm2 and the percentage mean reduction in area after 12 weeks of treatment was 46.2%. The ulcer size after treatment was significantly smaller than the initial ulcer size (Wilcoxon p-value = 0.001). However, the area of ulcer reduction over the 12-week period did not correlate with growth factor concentrations in PRGF. The percentage of epitalization tissue increased throughout the study period with a significant increase at the end of 12 treatments (mean = 58.1%) and devitalized tissue decreased throughout the study period with a significant reduction at the end of 12 weeks (mean = 11%). At the end of 12 weeks there was a significant improvement in the type of exudate in the ulcers and a significant decrease in the amount of exudate in the ulcers. Conclusion: In this study, the null hypothesis was confirmed that the concentration of growth factors present in PRGF did not present statistically significant relationship with the reduction of venous ulcers area.

Objetivo general: Analizar las propiedades del plasma rico en factor de crecimiento autólogo (PRGF) para tratar pacientes con úlcera venosa. Método: Estudio cuasi experimental realizado en un hospital universitario. Datos recolectados entre mayo de 2016 y diciembre de 2017. Muestra compuesta por 18 pacientes con úlcera venosa que cumplieron los criterios de inclusión. Los participantes asistieron semanalmente, durante 12 semanas, a la clínica ambulatoria para consulta de enfermería y cambio de apósito, con aplicación de plasma rico en factor de crecimiento (PRGF) en frecuencia bisemanal. La preparación de PRGF utilizó la técnica de centrifugación; se empleó gluconato de calcio como activador plaquetario. Se efectuó recuento de plaquetas e identificación de los factores de crecimiento en el PRGF utilizado en el tratamiento. Resultados: Muestra homogénea en sus variables socioeconómicas y clínicas, con predominio de ancianos, varones, estudios primarios incompletos, con ingresos de entre 1 y 2 salarios mínimos. Se obtuvo un PRGF con bajo recuento de plaquetas, con mediana de 122 x 103 mm3 de plaquetas, aunque con importantes factores de crecimiento plaquetario involucrados en la curación (PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-ß, VEGF, EGF y FGF2). Existió marcada variabilidad en el recuento plaquetario y en la concentración del factor de crecimiento, con marcada y significativa correlación entre la cantidad de plaquetas y factores de crecimiento PDGF-AB y PDGF-BB. Los promedios de cada factor de crecimiento fueron 1.52 ng / ml para PDGF-AB, 1.38 ng / ml para PDGF-BB, 1.40 ng / ml para TGF-ß, 0.99 ng / ml para VEGF, 1,57 ng / ml para EGF y 1,04 ng / ml para FGF2. El tamaño inicial promedio de las úlceras observadas en este estudio fue de 29,6 ± 23,9 / cm2, y la reducción porcentual media en el área luego de 12 semanas de tratamiento fue del 46,2%. El tamaño de las úlceras luego del tratamiento resultó ser significativamente inferior a su tamaño inicial (p-valor del test de Wilcoxon igual a 0,001). Sin embargo, la reducción del área de las úlceras, durante el período de 12 semanas, no se correlacionó con las concentraciones de los factores de crecimiento en el PRGF. El porcentaje de tejido epitelial aumentó durante todo el período del estudio, con un aumento significativo final en 12 tratamientos (media = 58,1%). El tejido desvitalizado disminuyó a lo largo del estudio, con reducción significativa luego de 12 semanas (promedio = 11%). Finalizadas las 12 semanas, hubo mejora significativa en el tipo de exudado de las úlceras y disminución significativa de la cantidad de exudado de las úlceras. Conclusión: En este estudio, se confirmó la hipótesis nula en que la concentración de los factores de crecimiento presentes en el PRGF no presentaba una relación estadísticamente significativa con la reducción del área de las úlceras venosas.

Surface morphological and physical characterizations of glass ionomer cements after sterilization processes.

The aim of this study was to investigate if sterilization methods would promote changes in the selected adhesion-related surface properties of glass ionomer cements (GICs). Riva self-cure (RSC) and Riva light-cure (RLC) GICs were tested. Thirty samples were prepared according to the type of material (RSC and RLC) and sterilization method: hydrogen peroxide gas plasma (HPGP), steam sterilization (SS), and no sterilization (n = 5 per group). A Teflon matrix (5 × 2 mm) was filled with one of the GICs to produce the samples. For the groups with the RLC material, the samples were light cured using a light curing unit for 20 s. After 24 hr, finishing and polishing were performed in all samples and then they were sterilized. Surface roughness, wettability, and micromorphology were accessed using a profilometer, a goniometer, and a scanning electron microscopy, respectively. Data were statistically analyzed through a two-way ANOVA and Tukey post-hoc test (p < .05). Both sterilization methods promoted similar roughness values to the nonsterilized samples (p > .05). HPGP decreased contact angle for RSC (p < .01), and SS increased contact angle for RLC (p < .01). Samples subjected to HPGP presented similar surface micromorphology to nonsterilized ones, regardless of the material. SS promoted exposition of smaller filler particles in both materials. Although sterilization methods did not alter surface roughness and wettability, the sterilization methods selectively altered the micromorphology of the materials tested. RESEARCH HIGHLIGHTS: This study's main finding suggests that each sterilization method altered the surface of glass ionomers in different ways. Thus, the choice of sterilization methods prior to bacterial adhesion can lead to a bias in antimicrobial studies.

Análise microbiológica e capacidade de formação de biofilme bacteriano em cepas de Pseudomonas Aeruginosa e Staphylococcus Aureus encontrados em úlceras venosas tratadas com plasma rico em plaquetas / Microbiological analysis and bacterial biofilm formation capacity in Pseudomonas Aeruginosa and Staphylococcus Aureus strains found in venous ulcers treated with platelet-rich plasma

Este estudo tem como objetivo analisar sinais de infecção nas úlceras venosas tratadas com Plasma Rico em Plaquetas (PRP), identificando a presença de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa e sua capacidade de formação de biofilme. Método: Trata-se de coorte prospectiva tendo como campo de pesquisa o Ambulatório de Reparo de Feridas do Hospital Universitário Antônio Pedro (HUAP/UFF). Os pacientes foram alocados no grupo em uso do PRP associada a gaze com perolatum e no grupo controle em uso somente da gaze petrolatum pelo estudo de intervenção concomitante a este projeto. Estabeleceu-se a amostra de 36 participantes por grupo. A técnica de coleta de dados foi realizada por meio do exame clínico com dados de identificação do paciente, dados clínicos, descritivos da lesão e coleta do espécime clínico através do swab. A identificação microbiológica foi realizada por meio do MALDI-TOF e o perfil de suscetibilidade foi determinado pelo teste de disco-difusão seguindo os padrões do CLSI. Para a identificação de genes de virulência foi realizado a Reação em Cadeia da Polimerase. A capacidade de formação de biofilme foi analisada na superfície de placas de poliestireno. A Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR) foi realizada para avaliar a carga quantitativa microbiana das feridas. Resultados: Dos 36 pacientes do estudo, 18 foram alocados no grupo intervenção e 18 no grupo controle, deste total, no ínicio do tratamento, 19 pacientes apresentaram infecção na ferida. Foi identificada melhora da infecção na ferida ao final das 12 semanas tratamento no grupo intervenção (p=0,0078) e no grupo controle (p=0,01). Todavia, não foi identificada diferença significativa entre os grupos quando se compara a melhora de infecção intergrupos (PRP ou gaze petrolatum). De um total de 100 amostras oriundas dos swabs, foram encontradas 39 (39%) P. aeruginosa, sendo 22 (22%) do grupo intervenção e 17 (17%) do grupo controle e apenas 10 (10%) S. aureus foram detectados, sendo seis do grupo intervenção e quatro do grupo controle. Nos dois grupos da pesquisa, nas amostras que foram identificadas como P. aeruginosa, o gene exoU foi predominante. Quanto a capacidade de formação de biofilme em placa de microtitulação, todos os S. aureus identificados foram formadores, classificados como fracamente produtores. Com relação as cepas de P. aeruginosa todas foram formadoras, sendo 17 classificadas como fracamente produtoras de biofilme, 14 moderadamente produtoras e 8 fortemente produtoras de biofilme. Conclusão: Houve melhora de infecção na ferida nos grupos tratados com PRP e Gaze petrolatum; não houve diferença estatisticamente significante entre os microrganismos (P. aeruginosa e S. aureus) nos dois grupos do estudo acerca de maior resistência a antimicrobianos; os pacientes que possuíam os microrganismos que apresentaram capacidade forte para a formação de biofilme, em sua maioria, não possuíam infecção na ferida tanto no grupo tratado com PRP quanto com gaze petrolatum; não houve relação entre apresentar infecção e possuir maior carga microbiana na ferida em ambos os grupos.

This study aims to analyze the signs of infection in venous ulcers treated with Plaque Rich Plasma (PRP), identifying the presence of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa and its biofilm formation capacity. Method: It is a prospective cohort having as research field the Wound Repair Ambulatory of Antônio Pedro University Hospital (HUAP / UFF). Patients were allocated to the group using PRP associated with gauze with perolatum and in the control group using only gaze petrolatum by the intervention study concomitant to this project. The sample of 36 participants was established by group. The data collection technique was performed through clinical examination with patient identification data, clinical data, descriptive of the lesion and collection of the clinical specimen through the swab. The microbiological identification was performed using MALDI-TOF and the susceptibility profile was determined by the disc-diffusion test following the CLSI standards. For the identification of virulence genes the Polymerase Chain Reaction was carried out. The capacity of biofilm formation was analyzed on the surface of polystyrene plates. The real-time Polymerase Chain Reaction (qPCR) was performed to evaluate the microbial quantitative load of the wounds. Results: Of the 36 patients in the study, 18 were allocated in the intervention group and 18 in the control group. Of this total, at the beginning of the treatment, 19 patients presented infection in the wound. Improvement in wound infection at the end of the 12 weeks treatment was identified in the intervention group (p = 0.0078) and in the control group (p = 0.01). However, no significant difference was identified between the groups when comparing improvement of intergroup infection (PRP or gauze petrolatum). From a total of 100 samples from the swabs, 39 (39%) P. aeruginosa were found, 22 (22%) from the intervention group and 17 (17%) from the control group and only 10 (10%) S. aureus were detected, six of the intervention group and four of the control group. In the two groups of the research, in the samples that were identified as P. aeruginosa, the exoU gene was predominant. As for the capacity of biofilm formation in microtiter plate, all identified S. aureus were formers, classified as poorly producing. Regarding the P. aeruginosa strains, all were formative, with 17 being classified as poorly biofilm producers, 14 moderately producing and 8 strongly biofilm producers. Conclusion: There was improvement of wound infection in the groups treated with PRP and Gaze petrolatum; there was no statistically significant difference between the microorganisms (P. aeruginosa and S. aureus) in the two groups of the study on greater antimicrobial resistance; patients who had microorganisms that had a strong capacity for biofilm formation did not have infection in the wound either in the PRP or gaze petrolatum group; there was no relation between presenting infection and having greater microbial load on the wound in both groups.

Padronização da quantificação do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) em plasma bovino por ELISA / Standardization of ELISA for the measurement of Insulin-Like Growth Factor I (IGF-I) in bovine plasm

Esse estudo teve como objetivo a padronização de um ensaio imunoenzimático competitivo (cELISA) in house para a determinação das concentrações plasmáticas do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGF-I) total para a espécie bovina, utilizando o sistema de amplificação biotina-estreptavidina peroxidase. O IGF-I foi extraído das proteínas ligadoras do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGFBP), utilizando o tampão glicina acidificado seguido de neutralização do pH com hidróxido de sódio. As microplacas foram sensibilizadas com anti IgG de coelho, e as dosagens realizadas utilizando duas abordagens, um método com incubação prévia das amostras com o anticorpo anti-h-IGF-I e outro sem incubação prévia (adição simultânea de IGF-I biotilinado e amostra). Os melhores resultados foram obtidos utilizando o método sem incubação prévia, com a sensibilização da placa com 0,25µg/poço de anti-IgG de coelho, o anticorpo específico na diluição 1:250.000 e 0,06ng/poço de IGF-I biotinilado. O ensaio in house apresentou um limite inferior de detecção de 50ng/mL, uma correlação de 0,945 entre doses quando comparado a uma metodologia comercial. Os coeficientes de variação inter-ensaio de 12,94% (345,8ng/mL) para os controles alto e 20,71% (131,6ng/mL) para o baixo. Dessa forma, conclui-se que a metodologia imunoenzimática para quantificação de IGF-I total utilizando o sistema de amplificação biotina-estreptavidina peroxidase em um ensaio competitivo está estabelecida e apresenta-se como uma ferramenta útil para estudos que visem o monitoramento das concentrações de IGF-I.(AU)

This study aimed to standardize an in house competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) to determine plasma concentrations of total insulin-like growth factor I (IGF-I) for the bovine specie using the amplification biotin-streptavidin peroxidase system. The IGF-I was extracted from insulin-like growth factor binding proteins (IGFBPs) using the acidified glycine buffer followed by the pH neutralization with sodium hydroxide. The microplates were coated with anti-rabbit IgG, thereafter the measurements were carried out using two approaches, one with a prior incubation of samples with the anti-h-IGF-I antibody and another without previous incubation (simultaneous addition of IGF-I and biotinylated sample). The best results were obtained using the method without the prior incubation, using the following combination of reagents: microplates were coated with 0.25µg/well of anti-rabbit IgG, the specific antibody at a dilution of 1:250,000 and 0.06ng/well of biotinylated IGF-I. The in house methodology showed sensitivity of 50ng/ml, a correlation between doses of 0.945 when compared to a commercial method. In addition, after 33 assays (quantification of 1114 samples) the proposed methodology presented a good precision, with inter-assay variation coefficients of 12.94% and 20.71% for the high and low controls, respectively. Finally, we concluded that ELISA method for the quantification of total IGF-I using the system biotin-streptavidin-peroxidase amplification in a competitive assay is established and is presented as a useful tool for studies aimed at monitoring the IGF-I concentrations.(AU)

Padronização da quantificação do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) em plasma bovino por ELISA / Standardization of ELISA for the measurement of Insulin-Like Growth Factor I (IGF-I) in bovine plasm

Esse estudo teve como objetivo a padronização de um ensaio imunoenzimático competitivo (cELISA) in house para a determinação das concentrações plasmáticas do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGF-I) total para a espécie bovina, utilizando o sistema de amplificação biotina-estreptavidina peroxidase. O IGF-I foi extraído das proteínas ligadoras do fator de crescimento semelhante a insulina I (IGFBP), utilizando o tampão glicina acidificado seguido de neutralização do pH com hidróxido de sódio. As microplacas foram sensibilizadas com anti IgG de coelho, e as dosagens realizadas utilizando duas abordagens, um método com incubação prévia das amostras com o anticorpo anti-h-IGF-I e outro sem incubação prévia (adição simultânea de IGF-I biotilinado e amostra). Os melhores resultados foram obtidos utilizando o método sem incubação prévia, com a sensibilização da placa com 0,25µg/poço de anti-IgG de coelho, o anticorpo específico na diluição 1:250.000 e 0,06ng/poço de IGF-I biotinilado. O ensaio in house apresentou um limite inferior de detecção de 50ng/mL, uma correlação de 0,945 entre doses quando comparado a uma metodologia comercial. Os coeficientes de variação inter-ensaio de 12,94% (345,8ng/mL) para os controles alto e 20,71% (131,6ng/mL) para o baixo. Dessa forma, conclui-se que a metodologia imunoenzimática para quantificação de IGF-I total utilizando o sistema de amplificação biotina-estreptavidina peroxidase em um ensaio competitivo está estabelecida e apresenta-se como uma ferramenta útil para estudos que visem o monitoramento das concentrações de IGF-I.(AU)

This study aimed to standardize an in house competitive enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) to determine plasma concentrations of total insulin-like growth factor I (IGF-I) for the bovine specie using the amplification biotin-streptavidin peroxidase system. The IGF-I was extracted from insulin-like growth factor binding proteins (IGFBPs) using the acidified glycine buffer followed by the pH neutralization with sodium hydroxide. The microplates were coated with anti-rabbit IgG, thereafter the measurements were carried out using two approaches, one with a prior incubation of samples with the anti-h-IGF-I antibody and another without previous incubation (simultaneous addition of IGF-I and biotinylated sample). The best results were obtained using the method without the prior incubation, using the following combination of reagents: microplates were coated with 0.25µg/well of anti-rabbit IgG, the specific antibody at a dilution of 1:250,000 and 0.06ng/well of biotinylated IGF-I. The in house methodology showed sensitivity of 50ng/ml, a correlation between doses of 0.945 when compared to a commercial method. In addition, after 33 assays (quantification of 1114 samples) the proposed methodology presented a good precision, with inter-assay variation coefficients of 12.94% and 20.71% for the high and low controls, respectively. Finally, we concluded that ELISA method for the quantification of total IGF-I using the system biotin-streptavidin-peroxidase amplification in a competitive assay is established and is presented as a useful tool for studies aimed at monitoring the IGF-I concentrations.(AU)

O estudo proteômico e o seu potencial de avaliação da fertilidade em machos de diferentes espécies domésticas / The proteomic approach and its potential for fertility assessment in males of different domestic species

A abordagem proteômica permite identificar componentes proteicos, celulares e secreções. Desta forma, constitui uma ferramenta viável para o estudo das potenciais funções de proteínas e para a busca por marcadores proteicos de fenótipos específicos e/ou processos fisiológicos. Este trabalho teve por objetivo fazer uma revisão sobre esse tema e sua importância na biotecnologia do sêmen de machos domésticos. A composição da membrana espermática e do plasma seminal é de grande interesse, em virtude da sua influência nos eventos de fusão oócito-espermatozoide, fertilização e subsequente desenvolvimento embrionário. Diversos trabalhos vêm demonstrando o potencial da proteômica ligada à reprodução animal, a qual auxilia na identificação de marcadores de fertilidade ou de ejaculados aptos à congelação.(AU)

The proteomic approach allows the identification of proteins from tissues, cells and secretion. Thus, this tool is useful for the study of potential protein functions and search for markers of specific phenotypes and/or physiological events. This study aimed to review on the subject and its importance in semen biotechnology of several species. The composition of the sperm membrane and seminal plasma is of great interest because of its influence on sperm-oocyte fusion, fertilization and subsequent embryonic development. Several studies have demonstrated the potential of proteomics related to animal breeding, assisting in identifying markers for fertility or able to ejaculate process of freezing / thawing in males of several species.(AU)

O estudo proteômico e o seu potencial de avaliação da fertilidade em machos de diferentes espécies domésticas / The proteomic approach and its potential for fertility assessment in males of different domestic species

A abordagem proteômica permite identificar componentes proteicos, celulares e secreções. Desta forma, constitui uma ferramenta viável para o estudo das potenciais funções de proteínas e para a busca por marcadores proteicos de fenótipos específicos e/ou processos fisiológicos. Este trabalho teve por objetivo fazer uma revisão sobre esse tema e sua importância na biotecnologia do sêmen de machos domésticos. A composição da membrana espermática e do plasma seminal é de grande interesse, em virtude da sua influência nos eventos de fusão oócito-espermatozoide, fertilização e subsequente desenvolvimento embrionário. Diversos trabalhos vêm demonstrando o potencial da proteômica ligada à reprodução animal, a qual auxilia na identificação de marcadores de fertilidade ou de ejaculados aptos à congelação.

The proteomic approach allows the identification of proteins from tissues, cells and secretion. Thus, this tool is useful for the study of potential protein functions and search for markers of specific phenotypes and/or physiological events. This study aimed to review on the subject and its importance in semen biotechnology of several species. The composition of the sperm membrane and seminal plasma is of great interest because of its influence on sperm-oocyte fusion, fertilization and subsequent embryonic development. Several studies have demonstrated the potential of proteomics related to animal breeding, assisting in identifying markers for fertility or able to ejaculate process of freezing / thawing in males of several species.

Electrocoagulación con plasma de argón en gastroenterología / Argon plasma electrocoagulation in gastroenterology

El presente trabajo, es una revisión retrospectiva del uso y aplicación de la coagulación con argón plasma (APC) en Gastroenterología, como terapia endoscópica realizado en el Instituto de Gastroenterología Boliviano Japonés (I.G.B.J.) de Cochabamba, en el periodo comprendido entre enero de 2001 a diciembre de 2004. La coagulación con argón plasma (APC), es un nuevo método de electrocoagulación, de múltiples usos y aplicaciones. Como resultado, permite la aplicación del contacto de energía eléctrica para lograr la destrucción del tejido o realizar una hemostasia. El APC usa una frecuencia alta de corriente eléctrica entregada por el ion de gas del argón. Este gas, mientras ioniza, permite la conducción de electricidad. Nuestro objetivo es analizar la utilidad, efectividad y frecuencia del tratamiento con APC. Se revisaron un total de 76 historias clínicas de pacientes sometidos a endoscopía más aplicación de argón plasma, observamos 96% de éxito terapéutico general, y 95,5% como tratamiento terapéutico hemostático sólo o combinado. Es una alternativa terapéutica útil en los pacientes con esófago de Barret y la utilidad en la proctitis actínica está en aumento con resultados satisfactorios en caso de hemorragia digestiva baja.

The present work, is a retrospective review about use and application of the argón plasm coagulation (APC) in Gastroenterology, as endoscopic thcrapy; made in the Japanese Institute of Bolivian Gastroenterology (I.G.B.J.) of Cochabamba, in the period between January of 2001 to December of 2004. The APC is a new method of electrocoagulación, and has múltiple uses and applications. It allows the application of electrical energy in order to obtain tissue destruction or to make haemostasis. The APC uses a high frequency of electrical current given by the gas ion of argón. This gas, while it ionizes, allows the conduction of electricity. Our objective was to analyze the utility, effectiveness and frequency of the APC treatment. 76 clinical histories of patients treated with endoscope and APC were reviewed. We observed 96% of general therapeutic success, and 95.5% as therapeutic haemostatic treatment alone or combined. It is a useful therapeutic alternative in patients with esophagus of Barret and its utility is increasing for actinic proctitis, and it liave satisfactory results in case of low digestive hemorrhage.

Occurrence and ultrastructural characterization of "nuage" during oogenesis and early spermatogenesis of Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887 (Teleostei)

We investigated the occurrence and ultrastructurally characterized electrondense nuclear material (nuage) released from the nucleus during oogenesis and early spermatogenesis of Piaractus mesopotamicus, a fish from Pantanal Matogrossense (Brazil) having a seasonal reproductive cycle. The female germ cells presented two instances of nuclear material extrusion: in the oogonia and in the oocyte in the perinucleolar phase. In males, material with similar morphology and behavior occurred in the spematogonia. In all cases, this material was associated to mitochondria. The possible function of this material is discussed.

Foi investigada a ocorrência e caracterizada ultra-estruturalmente a eliminação de material nuclear eletrondenso (nuage) para o citoplasma durante a ovogênese e durante os estágios iniciais da espermatogênese de Piaractus mesopotamicus, um peixe do Pantanal Matogrossense de ciclo reprodutivo sazonal. Constataram-se nas células germinativas femininas dois momentos de eliminação desse material, na ovogônia e no ovócito em fase perinucleolar. Nas células masculinas, material com morfologia e comportamento muito semelhante foi encontrado na espermatogônia. Em todos os casos, o material associou-se a mitocôndrias. A possível função desse material foi discutida.

Occurrence and ultrastructural characterization of "nuage" during oogenesis and early spermatogenesis of Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887 (Teleostei)

We investigated the occurrence and ultrastructurally characterized electrondense nuclear material (nuage) released from the nucleus during oogenesis and early spermatogenesis of Piaractus mesopotamicus, a fish from Pantanal Matogrossense (Brazil) having a seasonal reproductive cycle. The female germ cells presented two instances of nuclear material extrusion: in the oogonia and in the oocyte in the perinucleolar phase. In males, material with similar morphology and behavior occurred in the spematogonia. In all cases, this material was associated to mitochondria. The possible function of this material is discussed.

Foi investigada a ocorrência e caracterizada ultra-estruturalmente a eliminação de material nuclear eletrondenso (nuage) para o citoplasma durante a ovogênese e durante os estágios iniciais da espermatogênese de Piaractus mesopotamicus, um peixe do Pantanal Matogrossense de ciclo reprodutivo sazonal. Constataram-se nas células germinativas femininas dois momentos de eliminação desse material, na ovogônia e no ovócito em fase perinucleolar. Nas células masculinas, material com morfologia e comportamento muito semelhante foi encontrado na espermatogônia. Em todos os casos, o material associou-se a mitocôndrias. A possível função desse material foi discutida.