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Núcleo Celular/enzimologia , Citoplasma/enzimologia , Células HeLa/enzimologia , DNA Polimerase Dirigida por RNA/isolamento & purificação , Animais , Centrifugação com Gradiente de Concentração , Cromatografia , Cromatografia DEAE-Celulose , Cromatografia por Troca Iônica , DNA/metabolismo , DNA Nucleotidiltransferases/metabolismo , Desoxirribonucleotídeos/metabolismo , Células HeLa/citologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Humanos , Soros Imunes , Masculino , Peso Molecular , Oligonucleotídeos/metabolismo , Polinucleotídeos/metabolismo , DNA Polimerase Dirigida por RNA/imunologia , DNA Polimerase Dirigida por RNA/metabolismo , Inibidores da Transcriptase Reversa , Salmão , Espermatozoides , Relação Estrutura-Atividade , Moldes GenéticosAssuntos
Antraquinonas/toxicidade , Células Cultivadas/efeitos dos fármacos , Animais , Bovinos , Linhagem Celular , Fenômenos Químicos , Química , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Células L/efeitos dos fármacos , Células L/crescimento & desenvolvimento , Leucemia Linfoide , Fígado/citologia , Camundongos , Micotoxinas/farmacologia , Ratos , Relação Estrutura-AtividadeAssuntos
Células HeLa/enzimologia , Peptídeo Hidrolases/biossíntese , Prednisolona/farmacologia , Radioisótopos de Carbono , Membrana Celular/efeitos dos fármacos , Membrana Celular/enzimologia , Membrana Celular/metabolismo , Repressão Enzimática , Glucose/biossíntese , Glicopeptídeos , Células HeLa/citologia , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Humanos , Concentração de Íons de Hidrogênio , Cinética , Ácidos Neuramínicos/análise , Peptídeos/isolamento & purificaçãoAssuntos
DNA/biossíntese , Células HeLa/enzimologia , Proteínas de Neoplasias/metabolismo , Nucleotidiltransferases/metabolismo , Difosfato de Adenosina , Trifosfato de Adenosina/farmacologia , Divisão Celular , Células Cultivadas , DNA Nucleotidiltransferases/metabolismo , Escherichia coli/enzimologia , Células HeLa/citologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Açúcares de Nucleosídeo Difosfato , Estimulação Química , Frações Subcelulares/metabolismo , Moldes Genéticos , Nucleotídeos de Timina/metabolismo , Transcrição Gênica , TrítioAssuntos
DNA/biossíntese , Genes , Células HeLa/metabolismo , Mitocôndrias/metabolismo , Simplexvirus/crescimento & desenvolvimento , Núcleo Celular/efeitos dos fármacos , Núcleo Celular/metabolismo , Etídio/farmacologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Mitocôndrias/efeitos dos fármacos , Biossíntese de Proteínas , RNA/biossínteseAssuntos
Células da Medula Óssea , Medula Óssea/crescimento & desenvolvimento , Carcinoma de Ehrlich , Animais , Linhagem Celular , Células Cultivadas , Células Clonais/crescimento & desenvolvimento , Técnicas de Cultura , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Humanos , Células L/crescimento & desenvolvimento , Leucócitos , Métodos , Camundongos , Camundongos Endogâmicos , UrinaAssuntos
Nucleotídeos de Adenina/análise , Células HeLa/análise , Polinucleotídeos/análise , RNA Mensageiro/análise , RNA/análise , Nucleotídeos de Adenina/isolamento & purificação , Adenosina/metabolismo , Sequência de Bases , Boroidretos , Núcleo Celular/análise , Fenômenos Químicos , Química , Células HeLa/citologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Oxirredução , Ácido Periódico , Fosfatos/metabolismo , Isótopos de Fósforo , Polinucleotídeos/isolamento & purificação , RNA/biossíntese , RNA/isolamento & purificação , Ribonucleases , Sódio , Trítio , UltracentrifugaçãoRESUMO
Using a colloidal silica density gradient, HeLa cells in mitosis were found to have a density of 1.040-1.046 g/cc, lighter than the remaining interphase cells. The mitotic cells could be harvested and cultured after centrifugation, showing growth synchrony by measurement of a peak in mitotic index 21 hr after establishing the culture. By using Colcemid or vinblastine sulfate, HeLa cells were arrested in metaphase and centrifuged on the colloidal silica density gradient. The blocked metaphase cells were lighter in density than the interphase cells but somewhat more dense than untreated cells selected by the density gradient centrifugation. Near-equilibrium conditions were established during the centrifugation of cells so that cell density measurements could be made, and the gradient medium employed was not measurably toxic to those cells tested.
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Técnicas Citológicas , Células HeLa , Mitose , Separação Celular , Centrifugação com Gradiente de Concentração , Colchicina/farmacologia , Demecolcina/farmacologia , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Mitose/efeitos dos fármacosAssuntos
Células HeLa/metabolismo , Hidrocortisona/farmacologia , Fosfatase Alcalina/metabolismo , Metabolismo dos Carboidratos , Membrana Celular/efeitos dos fármacos , Membrana Celular/metabolismo , Núcleo Celular/metabolismo , Centrifugação , Glucosamina/metabolismo , Glicolipídeos/metabolismo , Glicoproteínas/metabolismo , Células HeLa/citologia , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Células HeLa/enzimologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Humanos , Metabolismo dos Lipídeos , Proteínas de Neoplasias/metabolismo , Ácidos Neuramínicos/metabolismo , Nucleotidases/metabolismo , Fosfolipídeos/metabolismo , RNA Neoplásico/metabolismo , Especificidade da Espécie , Transferases/metabolismoAssuntos
Envelhecimento , Fibroblastos/crescimento & desenvolvimento , Luz/efeitos adversos , Aminoácidos/efeitos da radiação , Divisão Celular/efeitos dos fármacos , Células Cultivadas , Meios de Cultura , Feto/citologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Humanos , Técnicas In Vitro , Pulmão/citologia , Fatores de Tempo , Raios Ultravioleta , Vitaminas/efeitos da radiaçãoAssuntos
Antibacterianos/farmacologia , Eritromicina/farmacologia , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Leucomicinas/farmacologia , Paromomicina/farmacologia , Cloranfenicol/farmacologia , Citocromos/biossíntese , Transporte de Elétrons/efeitos dos fármacos , Células HeLa/citologia , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Células HeLa/metabolismo , Cinética , Lactonas/farmacologia , Mitocôndrias/efeitos dos fármacos , Mitocôndrias/metabolismo , Proteínas de Neoplasias/biossíntese , Consumo de Oxigênio/efeitos dos fármacos , Peptídeos/farmacologia , EspectrofotometriaAssuntos
Núcleo Celular/análise , RNA Neoplásico/isolamento & purificação , Centrifugação com Gradiente de Concentração , Dimetil Sulfóxido , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Formaldeído , Células HeLa/análise , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Substâncias Macromoleculares , RNA Ribossômico/análise , TrítioRESUMO
The cardiac glycoside, ouabain, inhibits alkali-cation transport in HeLa cells. It binds to 0.75 x 10(6) sites per cell, and the half-time for its dissociation is 16 hr. After partial blockade by ouabain, the cell generates new ouabain-binding sites, with total restoration of transport in 10% of a cell cycle( approximately 3 hr). This recovery requires protein synthesis and appears to be a response to altered cell-electrolyte content, since growth of cells in media with low K(+) concentration enhances the titer of the transport enzyme in a fashion similar to the effect of ouabain. Totally blocked cells do not recover.
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Células HeLa/metabolismo , Ouabaína/farmacologia , Rubídio/metabolismo , Animais , Sítios de Ligação , Transporte Biológico/efeitos dos fármacos , Linhagem Celular , Células Cultivadas , Cicloeximida/farmacologia , Células HeLa/efeitos dos fármacos , Células HeLa/crescimento & desenvolvimento , Cinética , Leucina/metabolismo , Camundongos , Proteínas de Neoplasias/biossíntese , Ouabaína/metabolismo , Potássio/farmacologia , Radioisótopos , TrítioRESUMO
1. Girardi and Hela cells (derived from human heart and cervix respectively) were grown as monolayer cultures in B.M.E. (Eagles basal medium) containing concentrations of ouabain up to 5 x 10(-8)M for periods ranging up to 5 days. The cell sizes, numbers, Na, K, Cl, and Ca concentrations and fluxes were then measured.2. Twenty-four hours incubation in ouabain concentrations equal to or less than 5 x 10(-8)M caused a rise in [Na](i) and an almost equal fall in [K](i) to new steady levels. The concentrations so reached were linearly related to the ouabain concentrations, such that in 5 x 10(-8)M ouabain [Na](i) rose to 124 m-mole/l. intracellular water and [K](i) fell to 55 m-mole/l. i.c. water in Girardi cells. In Hela cells the changes were smaller at any particular ouabain concentration. These levels were maintained constant for at least 5 days.3. In cells in the logarithmic phase of growth, raising [Na](i) and lowering [K](i) by ouabain caused a slowing of growth rate proportional to the ouabain concentration used. In cells in the stationary phase there was no change in the cell numbers over 24 hr. The volume of the cells was not directly affected by the treatment.4. Reducing [K](o) from the normal value of 5.4 to 2.5 mM increased the effect of any ouabain concentration, whereas increasing [K](o) to 7.5 decreased the effect of ouabain.5. Reduction of [K](o) to 2.5 mM had no effect on the [K](i) or [Na](i) but halved the cell numbers, probably by a reduction in the growth rate. The mechanism of this effect is obscure.6. In Girardi cells raising [Na](i) and lowering [K](i) by prolonged treatment increases the total Na fluxes and decreases the total K fluxes but keeps the total Na + K flux constant. High-Na, low-K cells had a reduced Na:K exchange compared to fresh cells and also had a Na:K pumped ratio nearer 4:1 than the 3:2 normally found.7. These cells also show ouabain-sensitive and ouabain-insensitive Na:Na exchanges. In high-Na, low-K cells the ouabain sensitive Na:Na exchange is the same as in fresh cells. The effect of treatment on the ouabain insensitive Na:Na exchanges has not been elucidated.8. The Cl content and fluxes are not altered by prolonged ouabain treatment. From this it is inferred that the membrane potential in high-Na, low-K cells is the same as in normal cells.9. High-Na, low-K cells have the same calcium content and fluxes as fresh cells. From this it is concluded that there is no Na:Ca coupling in these cells.