RESUMO
Due to the lack of a precise in vitro model that can mimic the nature microenvironment in osteosarcoma, the understanding of its resistance to chemical drugs remains limited. Here, we report a novel three-dimensional model of osteosarcoma constructed by seeding tumor cells (MG-63 and MNNG/HOS Cl no. 5) within demineralized bone matrix scaffolds. Demineralized bone matrix scaffolds retain the original components of the natural bone matrix (hydroxyapatite and collagen type I), and possess good biocompatibility allowing osteosarcoma cells to proliferate and aggregate into clusters within the pores. Growing within the scaffold conferred elevated resistance to doxorubicin on MG-63 and MNNG/HOS Cl no. 5 cell lines as compared to two-dimensional cultures. Transcriptomic analysis showed an increased enrichment for drug resistance genes along with enhanced glutamine metabolism in osteosarcoma cells in demineralized bone matrix scaffolds. Inhibition of glutamine metabolism resulted in a decrease in drug resistance of osteosarcoma, which could be restored by α-ketoglutarate supplementation. Overall, our study suggests that microenvironmental cues in demineralized bone matrix scaffolds can enhance osteosarcoma drug responses and that targeting glutamine metabolism may be a strategy for treating osteosarcoma drug resistance.
Assuntos
Neoplasias Ósseas , Osteossarcoma , Humanos , Glutamina , Matriz Óssea/metabolismo , Matriz Óssea/patologia , Metilnitronitrosoguanidina/uso terapêutico , Neoplasias Ósseas/tratamento farmacológico , Neoplasias Ósseas/genética , Neoplasias Ósseas/metabolismo , Osteossarcoma/tratamento farmacológico , Osteossarcoma/genética , Osteossarcoma/metabolismo , Linhagem Celular Tumoral , Resistência a Medicamentos , Microambiente TumoralRESUMO
Osteoporosis is associated with poor dietary habits. Malnutrition is characterized as a deficit on the intake of necessary nutrients that are essential for optimal health maintenance. It is known that malnutrition during the lactation period can affect the offspring. The present study aims to evaluate the chronic effects caused by maternal energy-protein restriction during lactation period in the offspring. At parturition, Wistar rat dams were divided in three groups: (1) Control group (C) - which received a 23 % protein diet without restrictions; (2) Protein-Energy restriction group (PER)- which received a 8 % protein diet; (3) Energy restriction group (ER) which received a 23 % protein diet in limited amounts, according to the ingestion of the second group. Each group had 12 pups. After weaning, all pups received free access to a 23 % protein diet until 180 days and then were euthanized. Their femur was excised, decalcified, histologically processed and analyzed under a microscope. The measurements of the osteon lacunae on the C, ER and PER groups were, respectively: 2.1 µm, 10.9 µm and 14.7 µm (p<0.05). A poor ingestion of proteins and calories during lactation period provoked critical and permanent changes on the bone matrix of the femur, which simulated osteoporosis.
La osteoporosis se asocia con malos hábitos alimenticios. La desnutrición se caracteriza como un déficit en la ingesta de los nutrientes necesarios que son esenciales para un mantenimiento óptimo de la salud. Se sabe que la malnutrición durante el período de lactancia puede afectar a la descendencia. El presente estudio tiene como objetivo evaluar los efectos crónicos causados por la restricción energética-proteína materna durante el período de lactancia en la descendencia. En el parto, las hijas de rata Wistar se dividieron en tres grupos: (1) grupo control (C) - que recibió una dieta con 23 % de proteína sin restricciones; (2) Grupo restricción de energía de proteína (PER) - que recibió una dieta con 8 % de proteína; (3) Grupo restricción de energía (ER) - que recibió una dieta de 23 % de proteína en cantidades limitadas, de acuerdo con la ingestión del segundo grupo. Cada grupo tenía 12 crías. Después del destete, todas las crías recibieron acceso libre a una dieta con 23 % de proteína hasta 180 días y luego fueron sacrificadas. Su fémur fue extirpado, descalcificado, procesado histológicamente y analizado bajo un microscopio. Las mediciones de las lagunas de osteón en los grupos C, ER y PER fueron, respectivamente: 2,1 mm, 10,9 mm y 14,7 mm (p <0,05). Una mala ingesta de proteínas y calorías durante el período de lactancia provocó cambios críticos y permanentes en la matriz ósea del fémur, que simulaba osteoporosis.
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Ratos , Matriz Óssea/patologia , Aleitamento Materno , Desnutrição , Fêmur/patologia , Remodelação Óssea , Ratos WistarRESUMO
Autogenous bone grafts are considered to be the gold standard in bone regeneration because of their osteogenic activity; however, due to limited availability of intraoral donor sites and the need to resolve the demands of patients requires an alternative to these. Two male patients were submitted to implant surgery in two stages with 6 months intervals between each of them: the first was exodontia and placement of DBM graft into the socket; the second stage was the drill with a 2 mm internal diameter trephine in center of the alveolar ridge previously grafted with DBM and subsequent implant placement. The samples were analyzed under histological techniques. A very mature bone was observed at 6 months after DBM graft placement in the sockets, showing it to be a good alternative as bone graft.
Los injertos de hueso autólogo son considerados el "gold standard" en regeneración ósea debido a sus propiedades osteogénicas; sin embargo, debido a la limitada cantidad de sitios intraorales y la necesidad de resolver las necesidades de los pacientes, es que se requiere una alternativa para el mismo. Dos pacientes masculinos fueron sometidos a una cirugía de implantes en dos etapas con 6 meses de intervalo entre cada una de ellas: la primera consistió en la exodoncia y el posicionamiento del injerto de DBM en el alvéolo; la segunda etapa consistió en el fresado con una trefina de dos milímetros de diámetro interno en el centro del reborde alveolar previamente injertado con DBM y luego se posicionó el implante. Las muestras fueron analizadas bajo técnicas histológicas. Un hueso muy maduro fue observado a los 6 meses de haber injertado el DBM en los alvéolos, demostrando que podría ser una buena alternativa como injerto óseo.
Assuntos
Pessoa de Meia-Idade , Alvéolo Dental/cirurgia , Desmineralização Patológica Óssea , Regeneração Óssea , Matriz Óssea/patologia , Materiais Biocompatíveis , Transplante Ósseo , Implantes Dentários , Período Pós-Operatório , Cirurgia BucalRESUMO
It has recently been reported that machined and microrough (micro) Brazilian titanium (Ti) implants have good production standards. The aim of this study was to evaluate in vivo bone formation around 2 different implant surfaces placed in dog's mandible. Thirty-two screw-typed Ti implants were used in this study. Mandibular premolars were extracted in 8 dogs and, after 12 weeks, 2 machined (Neodent Titamax, Brazil) and 2 micro implants (Neodent Titamax Porous, Brazil) were placed in each animal. Biopsies were taken at 3 and 8 weeks post-implantation and stained with Stevenel's blue and Alizarin red for histomorphometric measurements of bone-to-implant contact (BIC), bone area between threads (BABT) and bone area within the mirror area (BAMA). Data were analyzed statistically by two-way ANOVA (á=0.05). While at 3 weeks micro implants exhibited significantly more BIC than machined ones (55 ± 12.5 percent and 35.6 ± 15 percent, p<0.05), no significant difference in such parameter was detected at 8 weeks (51.2 ± 21 percent and 48.6 ± 18.1 percent, p>0.05). There were no significant differences in BABT and BAMA between the implants. Micro surfaces promoted higher contact osteogenesis. These data indicate that this commercial micro Ti implant surface enhances contact osteogenesis at an early post-implantation period when compared to the machined one.
Estudos recentes demonstram que implantes nacionais de titânio (Ti) usinados e micro-rugosos apresentam padrões adequados de produção. O objetivo deste estudo foi de avaliar a neo-formação óssea in vivo em 2 tipos diferentes de implantes colocados em mandíbulas de cães. Trinta e dois implantes rosqueáveis de Ti foram utilizados neste estudo. Os pré-molares mandibulares de 8 cães foram extraídos e, após 12 semanas, 2 implantes usinados (Neodent Titamax) e 2 implantes micro-rugosos (Neodent Titamax Porous) foram colocados em cada animal. Após 3 e 8 semanas da implantação os espécimes foram biopsiados, corados com Stevenel's blue e Alizarin red e analisados histomorfometricamente quanto à porcentagem de contato-osso-implante (COI), área de osso mineralizado entre as roscas (OMER) e área de osso mineralizado na área em espelho (OMAE). Os resultados foram analisados estatisticamente pelo teste de ANOVA a dois fatores. Os implantes micro-rugosos apresentaram maior COI do que os implantes controle em 3 semanas (55,0 ± 12,5 por cento e 35,6 ± 15,0 por cento; p<0,05), enquanto não houve diferença em 8 semanas (51,2 ± 21,0 por cento e 48,6 ± 18,1 por cento; p>0,05). Não houve diferença quanto ao OMER e OMAE. Esses dados nos indicaram que os implantes micro-rugosos utilizados neste estudo aumentam a osteogênese de contato nos períodos iniciais pós-implantação quando comparados com implantes usinados.
Assuntos
Animais , Cães , Masculino , Implantes Dentários , Materiais Dentários/química , Osteogênese/fisiologia , Titânio/química , Biópsia , Medula Óssea/patologia , Matriz Óssea/patologia , Calcificação Fisiológica/fisiologia , Implantação Dentária Endóssea , Planejamento de Prótese Dentária , Processamento de Imagem Assistida por Computador/métodos , Mandíbula/patologia , Mandíbula/cirurgia , Osseointegração/fisiologia , Osteoblastos/patologia , Osteoclastos/patologia , Distribuição Aleatória , Propriedades de Superfície , Fatores de TempoRESUMO
Innocuous biocompatible materials have been searched to repair or reconstruct bone defects. Their goal is to restore the function of live or dead tissues. This study compared connective tissue and bone reaction when exposed to demineralized bovine bone matrix and a polyurethane resin derived from castor bean (Ricinus communis). Forty-five rats were assigned to 3 groups of 15 animals (control, bovine bone and polyurethane). A cylindrical defect was created on mandible base and filled with bovine bone matrix and the polyurethane. Control group received no treatment. Analyses were performed after 15, 45 and 60 days (5 animals each). Histological analysis revealed connective tissue tolerance to bovine bone with local inflammatory response similar to that of the control group. After 15 days, all groups demonstrated similar outcomes, with mild inflammatory reaction, probably due to the surgical procedure rather than to the material. In the polymer group, after 60 days, scarce multinucleated cells could still be observed. In general, all groups showed good stability and osteogenic connective tissue with blood vessels into the surgical area. The results suggest biocompatibility of both materials, seen by their integration into rat mandible. Moreover, the polyurethane seems to be an alternative in bone reconstruction and it is an inexhaustible source of biomaterial.
Assuntos
Animais , Bovinos , Masculino , Ratos , Materiais Biocompatíveis/uso terapêutico , Matriz Óssea/transplante , Regeneração Óssea/fisiologia , Substitutos Ósseos/uso terapêutico , Óleo de Rícino/uso terapêutico , Poliuretanos/uso terapêutico , Matriz Óssea/patologia , Colágeno , Tecido Conjuntivo/irrigação sanguínea , Tecido Conjuntivo/patologia , Mandíbula/patologia , Doenças Mandibulares/patologia , Doenças Mandibulares/cirurgia , Osteoblastos/patologia , Osteoclastos/patologia , Osteócitos/patologia , Osteogênese/fisiologia , Ratos Sprague-Dawley , Fatores de Tempo , Transplante HeterólogoRESUMO
Foi investigado um enxerto alternativo para correçäo de falhas ósseas diafisárias. Cilindros tubulares descalcificados de rádio de coelhos doadores foram implantados durante quatro semanas no músculo reto abdominal de coelhos receptores. Depois disso foram transferidos para uma falha óssea equivalente no rádio destes mesmos animais. O processo de reparaçäo foi seguido durnte oito semanas por radiografia, histológica e fluorescência óssea. Quando comparada com os controles (falha vazia e preenchimento com gelfoam), a falha óssea preenchida pelo enxerto descalcificado foi mais rápida e intensamente preenchida por osso neoformado